Методи за изследване на секс хроматин - хипоспадия и третирането

Видео: пениса лечение кривина

Материалът за първите изследвания на пола на хроматина, Barr направен с персонала, поднесени нервите на мъжки и женски котки. Установено е, че когато Feulgen оцветяване (реакция на нуклеиновата киселина) хроматин вещество в мъжки клетки диспергиран като фини зърна равномерно в цялата сърцевина.
Женските на клетъчните ядра в дифузно разпределени хроматин, е също ексцентрично разположени кичури с размер 1,5-2 микрона, който се намира под ядро ​​покритие, по-интензивно оцветени с Feulgen и с триъгълна форма или лещовидна. При изчисляване на тези бучки беше установено, че в ядрата на клетките на женското тяло, съдържащи се в 70- 90% и в ядрата на мъжкото тяло клетки - 5-10% грешка ± 5%. служители Barr нарича това кичури на хроматина секс хроматина, Аспергер - "хроматин граница" или "ядрена сателит," Сакс, Сер и Danok (Sachs, SERR, Danok) - (. фигура 4, б) полово chromocenters.
По-късно е установено, че особено в устройството за секс хроматин присъщи organizma- ядра на всички клетки на устната лигавица клетки (Moore и колеги), кожа (Teter, Barr, Sachs и сътрудници) и други тъкани. През 1954 г., на секс хроматина се намира в ядрата на сегментни левкоцити, въпреки че преброяването им не са толкова убедителни, отколкото в други клетки. Според Дейвидсън, Dux, Добровски (Дейвидсън, Dux, Dabrowska), в проучването на 500 жени сегментирани левкоцити сексуална хроматина като "кълки" се намира в 5-б левкоцити, докато мъжете не се срещат в левкоцити. Натрупванията на хроматина, напомняща на "кълки" на много тънък стрък.
Понастоящем, най-често изследване на секс хроматин в ядрото на клетките на кожата, лигавиците и сегментирани левкоцити, въпреки че последният метод и съдържа елементи на субективността се дължи на факта, че освен от истинските "кълки", има фалшиви, не са лесно различава от вярно.

Фиг. 4. Място на хроматин в ядрата на клетките на Malpighian епителен слой на кожата (Feulgen петно). Микрография.
прибл. 90, об. 15:
и - женски ядрени сателити, пол хроматина под формата на ексцентрично разположен zeren- P - мъже. разпределение Хроматиново под формата на малък
зърна.

изследвания на кожата. За да се изследва парче на кожата е, че се отнася до размера 0,5X1 подкожната тъкан. Решаващо условие за получаване на добри лекарства е правилно и бързо фиксиране.
парче кожа е по-добре да се придържат към стъклена пръчка (предотвратяване на деформация) и понижава в блокиращ течност веднага. Когато оцветени Feulgen фиксиращ разтвор се счита за най-добре смес Дейвидсън (алкохол 96 ° -35%, ледена оцетна киселина 10% формалдехид - 40 ° -20%, Aquae Цел - 35%).
Покритие на крезил-виолет и хематоксилин-еозин разрешения за фиксиране в буфериран неутрален 10% разтвор на формалин (Arnaud и др.). Определяне на минималния срок от 24 часа. След това материалът се обработва или прехвърлени или в алкохол, при неограничено време може да се съхранява без повреда. Дебелината на филийки трябва да бъде не повече от 5-7 millimikron- при дебелина 12-15 милимикрона, както се препоръчва от Bro-Расмусен, Хансен и Мур, проучване на фината структура на ядрото е много трудно.
Неуместно е да се използва ярка осветеност в изследваните медикаменти. Iris и коригиране на височината на кондензатора може да се постигне максимално желаната фина структура на ядра за откриване, като ярко осветление прикрива разлики в цвета на интензивност на различните елементи на ядрото. По-добро откриване на секс хроматина дава Feulgen петно, въпреки че е по-трудно. За разлика от това, оцветяване или крезил-виолетово оцветяване Feulgen свежда до минимум възможността от грешки. Тя изисква стриктно спазване, чисти и свежи реагенти.
Garnden, Армстронг, Barr Грийн описано няколко случая gynandromorphism секс хроматин при пациенти с Хермафродитизмът, която се характеризира с факта, че на тялото пол хроматин една страна е на мъжки тип, от друга страна - на женската. Ето защо, за да се избегнат възможни грешки в случаите, когато пациентът има хипоспадия характеристики на Хермафродитизмът, се препоръчва да се вземат на материала (кожата, на лигавицата остърган) с двете половини на тялото.
Лекарства изследвани под immersiey- предвид пол хроматин е направена на Брой базалния клетъчен слой 100. Повече повърхностни слоеве не са подходящи за изследването.
Изследване на устната лигавица епител, което предполага, че Мур и колеги - е опит да се избегне хирургическа биопсия, да го замени с един прост метод на събиране на материала и по този начин повишава клиничната употреба на метода.
Използвали сме този метод, както следва: лигавица остърган взети от вътрешните повърхности на бузите, или, ако не е необходимо да се проучи и симетричното, намиращи се в лигавицата на долната устна, където конските краищата. Последното е за предпочитане от гледна точка на добър достъп. Устната кухина преди старателно се промива с 2% разтвор на сода, което донякъде намалява сместа на слуз и бактерии на изпитвания материал.
Епитела на устната лигавица се отстранява от стъклото малко заоблени ъгли с лигавицата на прицелното място изпъкнали чувствително на натиск пръст отвън. Тъй като само подходящ за изследване на базалния слой остъргването трябва да се извършва под силен натиск. Мазен материал с форма суспензия с фини включвания за изследване е неподходяща, тъй като тя съдържа само клетки са отхвърлени горната sloya- необходимо за получаване на лигавицата отделен слой, който понякога се придружава от слабо кървене.
Както и при превземането на кожата, на лигавицата остърган след равномерното разпределение на стъклото е фиксирана веднага. Dixon и Тар и Nokes риба (Dixon и. Таг, Noques а. Fisch) препоръчваме определяне материал в продължение на 24 часа в смес от равни части от алкохол и етер. Състави krezil- виолетово петно ​​или намазка метод, и ако е необходимо дълго съхранение конвенционален метод са както Канада балсам.
Най-добри резултати при обработката на мукозни остъргвания ние получени по време на фиксиране на материала за 24 часа в Дейвидсън смес, последвано от Feulgen оцветяване (например в събирането на кожата). Клетките от базалния слой трябва да бъдат изследвани, боядисани в светъл цвят червено, клетъчните слоеве на умиращите, не е подходящ за изследване - в светло кафяво.
Едно проучване на левкоцитите, предложен през 1954 г. от Дейвидсън. За проучване сексуална хроматин сегментирани левкоцити са подходящи кръвни продукти, приготвени по конвенционален начин за броене формула левкоцити. Задоволителни резултати могат да бъдат получени, когато се оцветяват с май-Grunwald-Giems&rsquo-у. Препаратите трябва да бъдат тънки и равномерно оцветени, тъй като дебел слой при определяне левкоцити се свиват и да станат не са подходящи за изследване на хроматин. За преброяване на левкоцитите, съдържащи сексуална хроматин използване preparatovoditelem разгледана по системата за потапяне 500 левкоцити. Проучването на такъв голям брой клетки консумират афера и отнема най-малко на 1,5 часа. В допълнение, оценката установи, секс хроматина възможно значителен елемент на субективност, че да се разграничат истинските "кълки" хроматин фалшива не винаги е лесно (фиг. 5а, б, в).

Фиг. 5. Местоположение на секс хроматина в ядрата на левкоцитите:
и - вярно "кълки" секс хроматина в женския б - фалшиви "барабанни пръчки" на дебел ствол, намерени в двете жени и мъже в-в - фалшиви "кълки", често многократно, се срещат само при мъжете.
Нашият опит от секс хроматина проучване ни позволява да се заключи, че трябва да се даде на хистологично изследване на кожата като най-точен и чист метод, въпреки че е свързано с леко хирургия. С внимателно спазване изкуство оцветяване може да бъде получена по този метод, различен и убедителни резултати. Изследване на устната лигавица изстъргване е проста вземане на проби от материал, който предоставя този метод дори при амбулаторно изследване на пациенти. Въпреки това, материалите примесване на значителни количества слуз възпрепятства производството на качествени продукти, както и наличието на микроби - тяхното изследване. Последното обстоятелство може да бъде причина за грешка при оценката на различни ядрени включвания, така че методът за изследване на лигавични остърган се препоръчва като метод за употреба в изследването на амбулаторни деца. метод за изследване на секса хроматина в левкоцитите е изключително прост и лесен за изпълнение в условията на всяко съоръжение (което не е метод на Feulgen), но изследването на лекарства е много труден процес. Във връзка със значителното елемент на субективността на този метод е малко вероятно да се превърне в широко използван метод в конвенционални лаборатории.
Едно проучване на секс хроматина в нашите пациенти показва, че местоположението на характеристиката на генетичен мъжки, е намерен в 46 пациенти с хипоспадия, без признаци на Хермафродитизмът. В 6 пациенти с истински Хермафродитизмът явления секс хроматина то също се намира на мъжки модел. Всичките три пациенти с фалшива женски Хермафродитизмът са носители на женски хроматин (което съответства на Аспергер, Wilkins и др.).
Нашите резултати до голяма степен съвпадат с тези на чуждестранна литература и показват, че при определянето на генетична сексът е от съществено значение, особено в определянето на пола при новородени (в трудни случаи) и при възрастни пациенти с хипоспадия, които са написани на грешен пола при раждането. Случаи, в които изследването на сексуалните хроматина улеснени корекция етаж, описани Voevsky, Беноа (Benoit), и др.
Въпреки това, най-важното секс хроматина е в диференциалната диагноза на тежки хипоспадия и невярна жена Хермафродитизмът при кърмачета и малки деца. В тези случаи, социална пол и psihoorientatsiya все още играе никаква роля в облекчаването на генетичен пол и пола може да бъде от решаващо значение. В допълнение, участието в случай на съмнение, друг фактор определяне пола ще помогне да се намалят грешките при определяне на пола и да ги премахнете, когато те са допуснати.

Видео: Лекция на епигенетиката