Пералня, дехидратация хистологичен материал - на базата на хистологията

Успешен тест за свръзване на обект - само първото условие, необходимо за подготовката на качествени micropreparations. Въпреки това, за да се постигне производство на тънки филийки (в хилядни от милиметъра), записан материал трябва да бъде правилно приготвяне: направи достатъчно плътен и в същото време чуплива. Трябва да му се даде състояние на режещия тя не се разпадне и няма да се деформират, и отсече тънък равномерен слой. За тази цел на плата трябва да бъде освободен от излишъци заключване, неутрализират, да се импрегнира и да попълните всяка запечатване среда.

миене

Целта на тази процедура - за освобождаване на обекта се изследва чрез прекомерно количество на резето. процес измиване зависи от методи на фиксиране. Например, след определяне на смеси, съдържащи пикринова киселина, живачен дихлорид, трихлороцетна киселина, етилов алкохол, използван различни концентрации (вж. В предишния раздел). След фиксиране на формалдехид, в течности, съдържащи хром, осмиева киселина обикновено се използва вода. В повечето случаи, тъкан парчета произвеждат промиване в течаща чешмяна вода. Това е най-удобно да се направи това чрез поставяне на предмет от стъкло или порцелан сито (фиг. 60), който се затваря и потапя в съд с вода. Корк осигурява плаваемост и дупките - постоянна циркулация на вода. Ако не поиска връвчица, етикетът също е поставен в сито. При липса на сита парче увити в марля и се суспендира с резба в съд, пълен с вода. В горната част на кораба се покрива с марля и прави малък отвор в нея. На кран притегляне връзка каучук маркуч или кабел (ивица превръзка), свободният край на който е преминал през тензух в буркан и се оставя на него малко водна струя. Средното време измиване 20 - 24 часа.

дехидрация

От този етап и до края на подготовката на хистологичен препарат да се спазват правилата за постепенни експозиция прилагани вещества върху тъканта.
Фиг. 60.
Промиването материал след фиксиране.

След промиване на парчета се подлагат на допълнително уплътняване чрез обезводняване в алкохоли с нарастваща концентрация.
За номера на процедура необходимо се получават тегло бутилки или чаши с земята покрива, тяхното етикетиране и се излива алкохоли: 50, 60, 70, 80 и 96% (за две чаши), 100% (две чаши). Такава последователност на съдове нарича хистологично батерия.
Таблица 2
Получаване на различни концентрации на алкохоли

Алкохоли желаните крепост получен предварително чрез разреждане специална таблица (таблица. 2) от 96% алкохол (за получаване на 100 мл от 60% -ен алкохол, е необходимо да се вземат 63 мл 96% алкохол и 37 мл дестилирана вода и т. Д).
Метод за получаване на абсолютен алкохол. Нормално отстранени алкохол съдържа 96% чист алкохол и 4% вода. За да се получи абсолютен алкохол, е необходимо да се отстрани водата. Най-разпространеният метод е обезводняване чрез използване на калцинирания син камък (меден сулфат).
Методът се основава на меден сулфат и свързване на собственост за получаване на молекула вода, промяна на цвета (калциниран меден сулфат има форма serovatobelogo poroshka-, че добавянето на вода става синьо).
Излейте калциниран прах на меден сулфат (около 10 г на 100 мл алкохол) в стъклена бутилка чист със стъклена запушалка, се излива 96% алкохол. След това бутилката се разклаща за разпространение на прах. Подобна процедура се повтаря в продължение на 1-2 дни. Както абсорбцията на вода става син цвят прах. Единична лечение обикновено предотвратява дехидратация, така алкохол се излива в друг съд, съдържащ прясна партида на меден сулфат. Същата процедура се повтаря, докато, докато утайката престава да придобие син цвят. Дехидратиран алкохол се филтрува в чиста купа, която е плътно затворен. Желателно е да се проверява рН абсолютен алкохол, като след третиране с меден сулфат, той може да стане леко киселина. За да неутрализира достатъчно да се добави малко количество калциев карбонат (СаСО3).
Ако не заводска лаборатория прах безводен меден сулфат, след това може да бъде получено чрез, калциниран кристална сол на огъня в общ порцеланова чиния (нагоре, докато се образува кристали от синьо бял прах). За равномерно калциниране трябва да се смесва със стъклена пръчка сулфат а. Не можем да позволим потъмняването (особено забележимо по краищата на чаша на) покажи perekalivanii. По същия начин се обработва меден сулфат, оставащ след алкохол дехидратация.
Трябва да се помни, че меден сулфат прах дразни лигавицата. Калциниране трябва да се провежда в аспиратор или защита на лигавиците на носа и устата обикновено марля маска.
абсолютен алкохол тест за съдържание на вода, произведена чрез понижаване на някои зърна на калциев карбид. Появата на характерната миризма на ацетилен и мътност показва наличието на вода. Твърда метод - добавяне на няколко капки от абсолютен алкохол до 4-5 мл бензол или ксилол. Мътността на течност показва, че алкохолът съдържа около 3% вода.
Ако препаратът се промива с вода, дехидратиран старт с 50% алкохол, и ако в алкохоли (след течност Zenker на и др.), Обектът се поставя в алкохол, последвано от крепост (от 70% до 80%, и така нататък. D.). Когато тънки цитологични изследвания на дехидратация започват с 10-20% алкохол. Времето на престой в отделните части на алкохоли се определя от техния размер и свойства. Обекти на средната стойност (5 mm) е достатъчно да се запази слаби алкохоли (до 60%) за 2-4 часа, и по-силен -. 12 до 24 часа малките и по-тънки предмети могат да се извършват по-бързо, съответно.
За алкохол прониква в тъканта равномерно от всички посоки, предметът се поставя върху слой от памук (или обикновен стъкло) и се суспендира в стъклена сито. При това подреждане на части от алкохол, консумират вода от тъканите и течащи надолу към дъното, това не предотврати по-нататъшно обезводняване.
Трябва да се помни, че продължителното излагане на обекта в алкохоли ниска концентрация води до накисване на тъкани, докато прекомерно в алкохоли прекалено висока концентрация ги уплътнява. Ето защо, ако искате да прекъснете процеса на дехидратация, материалът може да бъде оставено (за няколко дни) в "безразлични" алкохол, който е крепост на 70-80%.
Също така трябва да се има предвид, че алкохолът в процеса на дехидратация доста бързо замърсените вещества, извлечени от тъканите, особено мазнини. Да не се използва за дълго време едни и същи алкохоли. Трябва време, за да ги промените.
грешки могат да бъдат толерирани в процеса на обезводняване: 1) с пълно уплътняване obezvozhivanii- 2) нормален уплътняване с недостатъчен обезводняване. И двете от тези недостатъци са резултат ако оптималните условия за обезводняване и влияят негативно върху по-нататъшната обработка на материала. Постигането на добри резултати се получават само от опит, така че е важно да записва всички етапи и анализиране на резултатите внимателно (особено при разработването на методи).
Преди прехвърляне лице 96% или абсолютен етанол трябва да даде крайния парче форма и размер (нарязани повреден или ненужни части). За напълно хидратиран материал трябва да бъде последователно през две части абсолютен етанол (за 12-24 часа).