Просвещението и заключение секции са затворени в смола - на базата на хистологията

Просвещението и заключение секции

За оцветени лекарство може да се изследва при преминаваща светлина и евентуално вече за съхранение, то трябва да бъде прозрачен и защитени от изсушаване, замърсяване и повреждане.
Всички тези условия са предвидени просвета и заключението на препарата в специална среда, която да запази своята яснота, цвят и структурна цялост.
Среда за сключване могат да бъдат разделени на две основни групи: а) вода-смесими (глицерин, гума арабика, желатин) - б) не се смесва с вода (различни смола). Веществата от първата група са едновременно изясняват и не изискват дехидратация на лекарството, докато преди приключване на лекарството в смолата, тя трябва да бъде старателно дехидратиран и освети в karbolksilole (толуен, бензен) или оптични масла (бергамот, cajeput, карамфил и др.). Въпреки факта, че процедурата за приключване на подготовката в безводна среда (смола) е по-сложна и увеличава цената на лекарството, се използва най-често защото има няколко важни предимства пред метода на задържане във водната среда. Основните от тях са: висока степен на прозрачност при подготовката, дългосрочно запазване на цвета и структурата непроменена, магазин за хранителни стоки на. Най-често срещаният терена за сключване на балсам (ела или канадски).

Заключение смола

Дехидратация (пълна) подготовка е предпоставка за сключване смола.
За получаването на оцветена вода се провежда чрез серия от увеличаване на концентрацията на алкохол (60, 80, 96 и 100%).
Просветлението идва лекарство вече в процес на дехидратация, но тъй като алкохолът не се разтваря балсам, то трябва да бъде премахнат. За тази подготовка, се поставя в един от балсам разтворители, които отстраняване алкохол, едновременно увеличава прозрачността на лекарството. Най-често използвани за тази цел ксилен, който може да се заменя с толуен или бензен.
При обработка tselloidinovyh не залепени желатинови замразени секции трябва да бъдат 100% алкохол замени карболфуксин-ксилен, така че абсолютен етанол причинява подуване на първата и втората нагъването. Тъй карболфуксин-ксилен разрушава някои багрила остават в него лекарства не трябва да надвишава 3-4 минути, след което трябва да бъде внимателно измити в две порции чист ксилен.
За да се подготви карболфуксин-ксилен разтвор, за да се стопи в инкубатор (при 56 ° С) кристален карболовата киселина и след това се смесва с ксилол в съотношение 1: 4, 1: 6.
Трябва да се помни, че карболфуксин-ксилен нарушава двулъчеппречупване вещества в тъканите, така че не може да се използва за изследвания поляризация.
Ако е необходимо да се избегне прилагането на абсолютен алкохол, освен карболфуксин-ксилен, е възможно да се използва оптично масло (cajeput, бергамот, карамфил). След отстраняване на излишния алкохол nakapyvayut масло, след това след 2-3 минути, попива нарязани (гладка) хартиен филтър и чрез повтаряне на такава процедура няколко пъти, се извършва чрез ксилен (бензен, толуен).
Ако е необходимо да се изключи лечение препарати алкохоли малка крепост (елуиране някои багрила -. Оцветяване picrofucsin т.н.), плъзгачът се поставя върху филтърна хартия с главата на лекарството и се блотират парче сгънат няколко пъти гладки * филтърна хартия от внимателно покриващ неговото получаване и работи пръст по стъклото. След това, същото филтърната хартия се отстранява внимателно и се поставя в 96% лекарство алкохол. Допълнителната обработка се извършва, както обикновено.

* Филтърна хартия с грапава повърхност, за тези цели е неподходяща като лекарство замърсява фибрили.

Ако лекарството не се отделя достатъчно от водата, а след това, когато е потопена в ксилен се появява белезникава мъгла. В този случай, лекарството трябва да бъде отново поставя в абсолютен алкохол за крайно обезводняване.
При прехвърляне на резени от една течност в друга, че е необходимо не замърсяват последващ част от предишната. Особено важно да се запази това състояние в прехвърлянето на алкохола в препарати ксилен. Следователно се получава добро изтичане на течност извън и ако стъклото подредени по двойки, те са непременно в същото прекъсване на връзката и изтриване на дъното на филтърната хартия или плат. Тя не трябва да бъде дълъг, за да се запази секциите във въздуха, тъй като те пресъхват в същото време (има се бланширане) и пристанището.
Може да се изразява дехидратация и просветление като свободно плаващи секции и поставили върху стъклото. Въпреки това, когато свободно плаващи секции в силни спиртни напитки и карболфуксин-ксилен те се свиват, стават крехки и не вкара в правия път, когато е поставен върху предметно стъкло. Ето защо, когато е възможно, свободно плаваща точка (желатин, tselloidinovye и замразени), което трябва да поставите на предметно стъкло до дехидратация и просветление. За тази парче прехвърля от вода до 70% алкохол, когато се понижава плъзгача, към който с помощта на четка (или игла) и нарязани разтегателен изправяне. След това стъклото се отстранява внимателно, хартията филтър се отстранява около нарязани излишната влага и след това силно натискане гладка филтърна хартия, навлажнена с 96% алкохол (може да бъде предварително смазани стъкло протеин-глицерол). По-нататъшната обработка се извършва, nakapyvaya последователно дехидратиращи и антирефлексно разтвори, сборния секции периодично навлажнена филтърна хартия в алкохол. Необходимо е да се избегне изсушаване секции.
Обработка в биологични чаши филийки поставени х начин посочено по-горе, често води до разслояване.
Заключение секции. За дехидратирани и просветлени лекарства най-често използвани за влизане на средата е балсам, който е прозрачен, жълтеникава смола. Балсам има консервиращи свойства на лекарството и запазва прозрачността има индекс на отражение в близост до пречупване на стъкло. Последното свойство се вижда лесно чрез разглеждане на стъклен прът потопен в балсам (част от смола почти не се вижда).
Има два вида на балсам - канадски и ела. Метод за получаване на същото: парче (или броя) от закалена смола се поставя в чиста, суха, широко гърло стъклен буркан и залива ксилен (или толуен), поставя в термостат. Типично, разтвор на течна консистенция, която се филтрува и се оставя в отворен съд (за предпочитане в аспиратор). Като разтворител се изпарява балсам започва да се сгъсти. Когато последователност ще приличат на течен мед, решението е готов за употреба.
Обикновено балсам има леко кисела реакция. В случаите, когато кисела среда неблагоприятно засяга цвят, неутрален балсам трябва да се прилага, което се получава чрез добавяне на малко количество калиев карбонат или натриев прах. Balsam съхранява в специални широки буркани в устата, запушалка за затваряне капачки шлайфане смазват с тънък слой от вазелин. Ако няма специални бутилки, можете да използвате малка бутилка с широко гърло, изпод лекарства, се запечатва отново гъвкав винил хлорид запушалка. тапа център се добавя и се прави дупка в него стъклена пръчка, с помощта на която възстановява балсам.
Методика. След отстраняване на стъклото с парче от ксилен, бързо изтриване на задната страна, и постави в хоризонтално положение на масата (или плосък багажник), се прилага няколко капки балсам. След това вземете варени стъклен капак (чисти пинсета или с грижа на два пръста на страничните ръбове, така че да не се замърси повърхността), сложи го в слайда до лекарството под ъгъл от 45 °, а след като балсам ще бъдат разпределени по ръба на покривното, бавно се понижава (фиг. 80). Въздухът постепенно се заменя и формулиране балсам обхваща тънък равномерен слой. Предпазни стъкла трябва да бъдат подготвени предварително. Отделно от това, че те трябва да са абсолютно чисти, те трябва да бъдат подредени в добри и лоши времена. Ако препарати се рисува разгледан цел потапяне, той не може да влезе в плътен слой стъкло, тъй като фокусното разстояние на обектива ще бъдат по-малко от общата дебелина на затворника на лекарството, а акцентът няма да бъде постигната.

Фиг. 80.
Заключение секции по стъклото на капака.
Номер балсам трябва да се изчислява по такъв начин, че това е достатъчно само да се покрие цялата площ под покривния плъзгач. Ако малко балсам за него ще остане свободно пространство между стъклата, макар и много, решението ще бъде разпределен в слайда и да остане петно. В първия случай, трябва да се сложи една капка балсам върху предметно стъкло на ръба на стъклото на капака, при които всички останали въздух, и тя ще запълни празнината. Ако балсам течеше под стъклото на капака, тя трябва незабавно да избършете с кърпа, леко навлажнена с ксилен. Сключен лекарството се поставя върху специална плоча и се поставя на натоварване покривно за 24 часа за изправяне. Ако е необходимо да натиснете силно (голяма грапавост на повърхността на лекарството), след това се прилага клипове бельо. Лекарството трябва да бъде в хоризонтално положение е не по-малко от 24 часа. След сгъсти балсам, лекарството може да се прилага всяка позиция.
Съхранение. Съхранявайте хистологични препарати трябва да бъдат защитени от прах и светлина. Най-подходящия начин - съхранение в специални кутии с рафтове. папки за съхранение е по-малко удобни, тъй като той не изключва прах и изисква много място. Удобно изсушени препарати могат да се съхраняват в конвенционални кутии (от бонбони, цигари и други подобни. Г.). В тези случаи, по двойки на прозореца сгънати гръб и всяка двойка е отделена от последващо хоризонтална лента от дебела хартия. Необходимо да направи бележки по външната повърхност на стените на кутията.
Възможни грешки при заключителните: а) всички на лекарството е покрита с малки капчици на прах като (недостатъчно дехидратация) - трябва да се промени решения увеличават obezvozhivaniya- б) подвижни пъстри стъклени мехурчета (въздух е затворен в края) - ако мехурчетата са разположени над дисекция на лекарството и лек натиск игла върху покривното не изчезва, е необходимо да се поднови preparat- тази чаша с лекарството и потопен в ксилен поддържа толкова дълго, тъй като стъклото на корицата ще се плъзне много лесно или п oddastsya изместване дисекция igloy- в) подготовка или назъбени напречни структуриран обемни фибрили, на участък са разположени различни включвания (замърсяване на лекарството през процеса на разтвори замърсени балсам или слабо почиства покривно) - филтрирани разтвори бяха внимателно се избърсват покривни стъкла.