Импрегнирани елементи macroglia - бази хистология

Импрегниране елементи macroglia (астроцити)
Най-добрият метод е импрегниране на злато хлорид астроцити метод Cajal. Определяне материал се извършва в 12% разтвор на формалин, или по-добре в специален фиксатор бромид, състояща се от 14 мл на формалин (силна неутрален), 2 г амониев бромид и 100 мл дестилирана вода.

Ремонт трае 2-8 дни (вече не). След това трябва да се измие с течаща вода и се нарязва на замръзване микротом. Дебелината на резени 20-30 микрона. Още от ножа микротомни секции се прехвърлят обратно в бромид фиксатор и в продължение на 2 дни в термостат съхраняват при 37 ° С След това бързо се промива с дестилирана вода и се прехвърля в импрегниращата смес със следния състав.
злато разтвор хлорид
1 мл от 10%
живак дихлорид Разтвор на 5% кристален 8ml
Дестилирана вода 50 мл
Сместа трябва да се приготвя и да бъде в контейнери от тъмно стъкло.
В тази смес за импрегниране филийки стоят 2-8 часа. Парчетата трябва да лежат свободно в разширено състояние.
За да направите това, 25 мл от пускането на не повече от 5-8 филийки. В процеса на импрегниране на филийки превърне кафяво с червеникав оттенък. Ако импрегниране е слаб, че е възможно да се запази секциите в този ден на разтвора и др.
За определяне на злато в метални структури последните парчета се поставят в 10% разтвор на натриев тиосулфат в продължение на 15-20 минути, когато секциите са блед и да виолетов цвят. След това те се промиват в 40-50% алкохол бързо извършва чрез абсолютен алкохол, ксилен и вградени в балсам. Методът обикновено е надеждна. Недостатъци могат да зависят от замърсяване или бедни фиксиране реагенти. Оптималната температура за импрегниране 20 ° С
Резултати. Астроцитите с krasnofioletovogo процеси, сиво-лилаво или кафяви.

Импрегниране на микроглиални клетки чрез VK Beletsky

Това прави възможно да се импрегнира както хистиоцити не само на мозъка, но и на черния дроб, подкожна тъкан, капилярни адвентиция клетки, и така нататък. D.
Методът се основава на способността на импрегниране сребро раамин. Наблюдава всички условия, посочени по-горе в описанието на метода на Gross-Bilshovskogo модификация BI Lavrenteva (реагенти чистота и стъклени).
Определяне материал 10% разтвор на формалин, неутрален по-добре (до 5 дни). Материалът, фиксирана недълготрайни, импрегнирани по-добре от старите.
След фиксиране, материалът трябва да бъде добре се промива в течаща вода (24 части) и след това се дестилира (30 мин). Освен това, материалът може да бъде: 1) сключване разрез на замръзване mikrotome- 2) сключва zhelatin- 3) в затворено целоидин.
Трябва да се отбележи, че най-добри резултати се получават при сключване на желатин (карбол или просто), но в определен умение са добри лекарства и без заключение. Срезите са направени на замръзване микротом (дебелина парче от 10-20 микрона) и се извършва чрез дестилирана вода.
За импрегниране трябва да се приготвя 10% -ен разтвор на сребърен нитрат раамин и 10% разтвор на неутрален формалин.
Работата се извършва в четири широки Buxy. Първият се излива 10% разтвор на сребърен раамин, във втората - дестилирана вода, третият - 10% разтвор неутрален формалин, в четвъртата - дестилирана вода. Частите бяха прехвърлени от дестилирана вода в тегловно стъкло с първи сребро раамин 20-30 секунди и след това в дестилирана вода (втори тегло бутилка) в продължение на 1 сек и след това - трети тегло бутилка (формалин). Всички тези манипулации правят бързо да се намали не лежеше във вода за повече от 2 секунди. Silver във формалин трябва да бъде бавно да се възстановява: разреза става черен, а след това тя се превръща в сиво-жълт или жълто-кафяв. Дисковете са били поставени в четвърта претегляне бутилка с дестилирана вода, където са уловени на стъкло и го изследвайте под ниско увеличение.
Със слаб импрегниране трябва да бъде по-дълъг (часа) за поддържане на участъци от формалин в последния претегляне бутилка. Ако хистиоцитите не се разкрива, е необходимо да се отбележи, какви структури може да се види на среза. Можете да използвате топла формалин той бързо възстановява сребро. Ако участъци от белите (бели петна) или бледо жълт и ако те могат да се видят само на няколко основни структури, или не виждаме, тогава, материалът е "кисел". В този случай парчетата преди импрегниране се поставят за 20 30 минути (може да бъде до 1 ден, в зависимост от степента на киселинност) в амонячна вода (3.4 мл амоняк вода 50 мл) и след промиване за провеждане на импрегниране.
Може да се отлага върху част от гранулата (зърно) или сребърни люспи и идентифицирани много ядра, което означава, че импрегнирането е твърде "киселинни" условия за този материал. Това може да се избегне: а) увеличаване б) разтвор нитрат импрегниране време Silver-на алкалност на сребърен нитрат. Знаейки, че пълното разтваряне на всички утайка от сребърен разтвор нитрат амоняк се превръща леко алкална, е възможно да се увеличи алкалността на разтвора, на капки растящите амоняк, или намаляване на алкалност чрез добавяне на капки 1% разтвор Silver-нитрат) загряване формалин и намалява неговата концентрация до 1-5 %. Срезите са както се изисква да бъде намалена в топла или гореща формалин.
Ако части от формалин бързо потъмняване или стават черни, материалът е "алкална". Материалът може да бъде освободен от прекомерна алкалност, пускането парчета преди импрегниране на 1-2% разтвор на оцетна киселина в продължение на 15-20 секунди, или повече (до 1 ден), в зависимост от степента на алкалност. След промиване произвеждат импрегниране.
Добри секции откриване в влакнести структури (колаген, retikulinovye, нервните влакна) означава, че за даден материал условия за импрегниране са твърде "алкални". Това може да се избегне: а) намаляване на времето impregnatsii- б) отглеждане на Silver-разтвор нитрат) намаляване разтвор алкалност сребърен нитрат (виж по-горе) - г) заместване на неутрален формалин kislym- г) увеличаване на концентрацията на киселината до 20% формалин ..