Принципи на култивиране на микроорганизми - микробиология с техниката на микробиологични изследвания

ЗНАЧИТЕЛНИ култивиране на микроорганизми

1. Засяването на хода на наклон. Дясната ръка, като една линия и да го изгори на горещия пламък на горелката. Лява ръка между палеца и показалеца държите тубата агар почти в хоризонтално положение, така че по време на това сеитба не се получи микроби от въздуха. Усукване леко освободен памучен тампон и малкия пръст на дясната си ръка, държейки дланта на ръката си, го премахнете от тръбата. Краят на тръбата се леко изгаря. Loop отнеме малко материал, съдържащ микроби и зигзаг движения приложени към повърхността на агар ин витро. След посяване произведени цикъл се отстранява от епруветките, изгаряне на краищата и се покрива с памучен тампон. След това отново горят примката в пламъка на горелката, за да унищожи останалите върху него микроби.
2. Перес наклон. Материал, съдържащ микроби също съхраняват в епруветки. За да направите презасаждане на една тръба до друга, двете тръби, т.е.. Е. този от който сте засаждане, и този, който е предмет на засяване, взети заедно и захваната с палеца и показалеца и средния пръст на лявата си ръка. След отстраняване на тръбата от първата тръба по метода, посочен по-горе, се набира материал и прехвърляне на материал върху повърхността на стерилен агар, където инокулира, тръби след това се печени ръбове и затворени (фиг. 33).
3. Засяването на акцията. Засяването на акцията или бульон, за да бульон или агар, както и засяване на агар, но всички манипулации трябва да се направи внимателно, така че чорбата не се изсипа на тръбата или не, напоена неговите краища. Материалът се въвежда в бульон за сеитба стрива в стената на тръбата най-близо до течна хранителна среда и се разбърква. Субкултура от бульона в супа може да се извърши също със стерилна пипета на Пастьор.
4. Засяване на мляко и други хранителни вещества (течност) среда се получава по същия начин, както семената в бульон.
5. Засяване убождане в агар колона или желатин. агар на тръба или желатин поддържа отдолу нагоре. Материалът за посев вземат платина игла, която се инжектира перпендикулярно на повърхността на агар или желатин и придвижва по протежение на оста на тръбата до дъното. Иглата след това се възстановява и накалена затворена запушалка тръба (фиг. 34).

В външната среда и в микробите човешкото тяло най-често се срещат в комбинация с други микроби. За изследване на свойствата на микроби (без които не може да се диагностицира) трябва да бъде в чиста култура, т. Д. Тя трябва да бъде отделен от други бактерии, с които тя е смесено.

Фиг. 33. Засяването линия.

Фиг. 34. Сеитбата убождане.

Фиг. 35. Изливане агарови плаки.
Има следните методи за изолиране на чисти култури от бактерии:
а) засаждане в сряда в чаша Geidenreich - Petri-
б) биологични методи (прилагащи среда избор, използването на различни оптимални температури, инфекция на лабораторни животни). Най-честата употреба на материала в средата за засаждане в чаша Geidenreich - Петри.

1. засяване оборудване за чаша Geidenreich - замразени ястия с агар. Агар в колби, бутилки, туби, отливани в кипяща водна баня. След агар се охлажда до 50-60 ° С и се излива в чаши Geidenreich - Петри. Чашките трябва да са стерилни. Те са поставени върху хоризонтална повърхност, и от съда, съдържащ стопен агар, щепселът се отстранява, на ръба на съда се задейства, след което средата се излива в чашата (фиг. 35). капак Cup вдигна лявата си ръка, от една страна, без да се отваря чашата напълно. Леко наклоните чашата в различни посоки, тя се разпределя излива агар равномерно по дъното. Когато агара се втвърдява, чаши поставят в термостат с главата надолу за сушене. Също така е полезно да се отстрани стерилен памук кондензационна вода се събира върху капака на чашата. Засяване върху агарни плочки, произведени чрез използване на сензорния линия или триене стъклена шпатула. От своя изисква производство дебелина на стъклена пръчка (4- 5 mm) се въвежда в пламъка на горелката загрява до омекоти, на края се кантоват и предварително загрята ploskozubtsami придават триъгълник форма (фиг. 36). Почти по-удобно да се използва метална шпатула Drygalski.

Засяването линия следва. Platinum усилване малко количество материал се извършва лесно от повърхността на агара чрез прилагане на серия от паралелни линии. Същата линия материал, без набиране отново докосва прилага за втора и трета блюдо с агар. В първия чашата може да се превърне твърдо вещество растеж, а вторият и третият повишаването на единични, изолирани колонии. Всяка колония е отделна група от подобни микроби. Можете да използвате една чаша и я разделя на няколко сектора, което води до линията, разделяща стъклената дъното на чашата.

Фиг. 36. Лопатка Drygalski.
Всеки отделен сектор ще замени една чаша. В последващото повторно засяване на колонии на агар наклон или друга хранителна среда са чиста култура.
При сеитба шпатула върху повърхността на агара се прилага една капка тест линия материал. След отваряне на чаша и калциниран ostuzhennym стъклена шпатула се стрива капка по повърхността, създавайки леки движения гали целия агаровата повърхност (фиг. 37). Без изгаряне на шпатула, се засява втора и трета плочи с агар.

Фиг. 37. Сеитбата шпатула.

Биологични методи за изолиране на чисти култури. Изолиране на чисти култури на базата на различни биологични свойства на бактерии обикновено проведени на специална хранителна среда. Например, специални носители са широко използвани в разпределението на агенти на чревни инфекции. Добавянето към културалната среда или малахит брилянтно зелено, жлъчни соли, значителни концентрации на сол или соли на лимонена киселина инхибира растежа на Ешерихия коли и не оказват влияние върху разпространението на патогенни бактерии kishechnotifoznoy група. За да се изолира от храчки и храчки култура коклюшни пръчки към културалната среда беше допълнена с пеницилин антибиотик, който инхибира растежа на придружаващите микрофлора и, в същото време не забавя растежа и размножаването на патогена на магарешка кашлица. За изолиране на Vibrio холерният използване селекционна среда - пептонова вода, и за изолиране на дифтерия бацил - валцувани конски серум.

За да се улесни изолирането на чисти култури на някои бактерии могат да се възползват от факта, че те растат при различна температура Optima. Като пример, метод за изолиране на чиста култура на Ешерихия коли от водата чрез отглеждане на култури в термостат при 43 °, причинител на язвата изолиране на замърсен материал чрез култивиране при 20 ° С и дори при 5 °.
Накрая следва да се отбележи, че растежа на някои патогенни бактерии (Streptococcus пневмония, антракс, туларемия бактерии и др.) Могат да бъдат получени в чиста култура, заразяване на лабораторни животни, податливи на или други микроби. Например, за да се подчертае културата на пневмококи от болния на храчки, произведени заразяване на бели мишки.

термостат

Фиг. 38. термостати.

Поставеният среда се поставя в пещ, където температурата е най-благоприятна за отглеждане на микроби. За патогенни бактерии, тази температура трябва да съответства на човешкото тяло температура, т.е.. E. 37 °. Електрическа печка с автоматично регулиране на температурата са различни razmerov- от големината на една малка кутийка със стойността на стаята. Термостат за бактериологични рутинна работа е шкаф с двойни стени метал или дърво, кожа извън лоши проводници на топлина, като например корк, азбест и така нататък. N. (фиг. 38). Термостатът има двойна врата, външна обвивка от изолиращ слой, и вътрешна рамка с чаша. Термостат разположен вътре рафтовете на метална мрежа.

Видео: Сеитбата на микроорганизми и вода 1 урок от биологията КЪЩА