Санитарно-бактериологично изследване на храни за наличие на Staphylococcus - микробиология с техниката на микробиологични изследвания

ПРОУЧВАНЕ ЗА НАЛИЧНОСТ стафилококи

Стафилококите са най-често се срещат благоприятна среда за размножаване в храни с повече протеини и нишесте (мляко, сметана продукти, сладолед, сирене, спредове, варена риба, месо, картофено пюре, консерви риба под масло).
Методи за изследване. Продукти течна консистенция инокулира върху твърда хранителна среда (1-2 капки) и носител (сол) 0,5-1 мл. на гъста консистенция на продукта се разрежда със стерилна вода от чешмата, твърдо вещество - смила и пулверизира с вода в хаванче. От приготвената емулсия, или каша получава петна оцветяват от Грам и mikroskopiruyut, като отбелязва присъствието на стафилококи (единичен, малки, много). Едновременно да култури в средата за съхранение съдържание 10 и 6.5% натриев хлорид и вителиновата чашата с физиологичен разтвор агар (Chistovich среда).
носител 1
Месо пептон еднолитър
Натриев хлорид 65гр
Агар 1 "
Лактоза 15 "
съхранение среда 2
Месо пептон еднолитър
100 г натриев хлорид
Агар 1 "
Лактоза 15 "
рН 7,4. Стерилизира при 120 ° в продължение на 30 минути.

Сряда Chistovich - вителиновата-сол агар. агар на месо-пептон с 10% натриев хлорид, се стерилизира при 120 ° в продължение на 30 минути, се топи, охлажда се до 45-48 °, добавя се 20% от обема на суспензия жълтък (един яйчен жълтък с 150 мл физиологичен разтвор), разбърква се добре, изсипва се в чаши , Средата може да се приготви за бъдеща употреба и се съхранява в хладилника.
Културите се поставят в термостат при 37 ° в продължение на 48 часа. Положителният случаи вителиновата на агар-агар физиологичен разтвор патогенни стафилококи растат до образуване на пигмент (щамове, които пигмент и различни нюанси на оранжево крем трябва да се счита златни) и мътност зона около колонията (ако lecithinase унищожаване на хранителна среда, лецитин). Тези колонии се субкултивират 1) върху плочи с кръвен агар за изследване hemolyzing svoystv- 2) върху агарови наклонени за 16-24 часа формулировка чрез реакция plazmokoagulyatsii- 3) бульон захар (на 6 часа в термостат при 37 °) за изследване на морфологията ( малък коки, местоположение ацинарен).
Ако след 24 часа PAS плочи с кръвен агар не се появяват хемолиза, ги оставя за още 24 часа при стайна температура. При липса на хемолиза правят повтаря субкултура на кръвен агар блюдо с посев се поставя в ексикатор, съдържащ 20% С02 и се поставя в термостат при 37 °. След 24 часа на растеж в атмосферно С02 загубили hemolyzing свойства са възстановени. За образуването на СО 2 в дъното на ексикатор 1-2 литра обем чаша се поставя с сода бикарбонат (2.1 д) и фина дупка през лявата пипетата изсипва 16-18 мл 10% солна киселина.
От наклонена култура на Staphylococcus вземат контур и се прилага към епруветка с 1: 4 разреждане на човешка плазма или цитратна кръв заек. Поставете в инкубатор при 37 ° С и в продължение на 1 -10 часа се наблюдава на всеки час плазмен коагулационен вид. В случаите, когато вителиновата на агар-агар физиологичен разтвор (VSA) № Staphylococcus растеж съмнителни колонии, като се засадят отново на носители на чиния с вителиновата сол агар и продължи анализа на горната процедура.
В проучване на продуктите планомерно да бъде ограничено до някои основни свойства на стафилококи в диаграмата. В случаи на хранително отравяне е по-подробно изследване на изолирани щамове Staphylococcus, т.е.. Д. Определяне наличието на токсина и степента на хемолитична активност.
Биологичната проба е описана в "Private микробиология" (стр. 202), но може да се процедира, както следва. Изолираният щам се инокулира върху плочи ауреус с 0.75% агар в телешко инфузия бульон или на Hottinger бульон с 0.25% глюкоза (рН 7,0). Чашите се поставят в ексикатор с С02 20% и се поставят в термостат при 37 ° в продължение на 2 дни с главата надолу. След 48 часа, се изважда и повърхността на агара се изсипва 10 мл физиологичен разтвор. Агар смачкани с шпатула до пастообразна консистенция и се оставя при стайна температура в продължение на 2 часа. След като екстрактът се прехвърля в епруветки и се центрофугира, за да се получи бистър слой, който се филтрува с изсмукване. Загрява в кипяща водна баня за 30 минути и се прилага на котки в вена ухо или феморалната вена в количество от 0,5 мл на 1 кг телесно тегло. Появата на повръщане и диария или повръщане само в последващия период за от 30 минути до 3 часа показва наличието на токсина. 12-2 или да-месечни котенца и на гладно, прилаган пипетират в устата на 15-20 мл Negrete токсин смесва с мляко или сметана. 30-60 минути започва повръщане, понякога диария, както и общи изтощение. Наблюдение се извършва в продължение на 4-5 часа. Можете да въведете токсин бял мишки чрез тръба в хранопровода.
За окончателно потвърждение за ролята в етиологията на избрания стафилококова хранително отравяне това е необходимо да се постави реакция аглутинация със серума на кръвта на пациента. Като антиген вземат изолиран щам на Staphylococcus. Реакционната смес се поставя от вида на реакцията Widal, започвайки с разреждане от 1: 50 до 1: 800. Като контрола, е желателно да се постави реакцията на аглутинация е ясно известен токсичен щам.
Наскоро произвеждат фаги на патогенни стафилококи, което позволява да се установи самоличността на култури, изолирани от различни места и от различни хора, което е важно за здравето на услугата.