Агентите на причинителя на коремен тиф и паратиф - микробиология с техниката на микробиологични изследвания

Бактерии коремен тиф и паратиф заболявания могат да причинят подобни патогенезата, клиниката и епидемиология. агент причинител на коремен тиф описан за първи път от Ebert през 1880 г., Паратиф бактерии - Ashari и Bansodom (1896), и се диференцират в два вида Shottmyullerom: S. paratyphi A и S. schottmulleri.
В съвременната таксономия на бактерии от коремен тиф, паратиф и хранителните патогени въз основа на тяхната антигенна структура и други атрибути са комбинирани в един род Salmonella (в чест на сьомга на бактериолог).
Морфология. Пръчици по размер и форма, подобна на чревна имат средно от 2 до 3 микрона в дължина и 0.5 до 0.7 микрона дебелина (вж. Фиг. 78). Спорът и капсулите не формират добре подвижни, грам-отрицателни.
Културни и биохимични свойства. Коремен и Паратиф бактерии растат върху обикновените хранителни среди, при аеробни условия. Оптималната растеж между 30 и 37 °.

Фиг. 79. Salmonella паратиф Б. Колонии на говеждо-екстракт агар. SW. 12
На агар колонии пръчки коремен тиф и паратиф имат умерено изпъкнала форма мокро прозрачни дискове с по-малък и по-деликатен от колонии на Е. коли (фиг. 79). Паратиф Bacillus колонии в различни характеристика на структурата, която е за образуване на колонии в периферията на издигнатия мукозна ролка заобикаляща плосък центъра на колонията като бутон яка. Roller се появява, когато се съхранява култури (след 24 часа престояване в пещ) в продължение на няколко дни при стайна температура.
Колониите коремен тиф и паратиф пръти отбелязани в началото и на височината на заболяването, има гладка форма (тип А), и получени в етапа на възстановяване често се развиват в груба форма (тип R), състояща се от malovirulentnyh бактерии.
Когато ивици върху наклонени получени от твърд увеличение граници, първо леко със синкав оттенък, след груб но мек растеж на Ешерихия коли. Бульон появява дифузно растеж.
Мляко и коремен тиф бацил Паратиф изобилно се умножават, млякото е пресечено. Те не ферментира лактоза и глюкоза, малтоза и манитол се разгражда само коремен тиф бактерия Паратиф киселина до киселина и газ. Ензимните свойства паратиф бактерии обикновено са подобни, но бактериите паратиф А по-малко активни, метеоризъм и изглежда малко по-късно.

Биохимични свойства на чревни бактерии коремен група

Легенда: R - образуването на киселина-D - образуването на газ е - не реакционно + наличността на реакцията.

Бактериите в лакмус мляко за производство трупът, която се изразява в първата поява на повърхността на среда синьо ръб около ръба на филма, а оцветяването се проявява тогава цялата среда в синьо. Пръчици коремен тиф и паратиф А причина лакмус мляко за производството на слаба киселина, която се появява светлина pinkness среда (раздел. 12).
Антигенни структура. Бактериите коремен тиф, паратиф и хранителните патогени се характеризират чрез соматична О-антиген и флагеларно Н антиген. В допълнение към тези два антигена, Felix и Pitt открили, че допълнително коремен бацил антиген-антиген вирулентност (V1-антиген). Както соматични и флагеларни антигени са сложни по състав. Изследването на състава на тези антигени позволи Kaufman и бяло направи класификационна схема за целия Salmonella група. В основата на тази класификация постави разлики в структурата на О-антигени, които дават възможност да се прекъсне в редица салмонелни серогрупи (A, B, C, D, E и т. Д). Бактериите във всяка група имат общи соматични антигени. Например, коремен бацил (група D) съдържа три различни О-антиген (9, 12, и VI). Флагеларно (Н) антиген също е хетерогенна. Различията в Н-антиген като специфичен (I фаза) и неспецифичното (II фаза) е позволено в рамките на отделните групи диференцират видове (вж. Таблица. 12). Специфична фаза Н аглутини антиген специфичен вид серум, неспецифично аглутинира не само видове, но също серум група.
Схемата Kauffman и бяло позволява реакцията на аглутинация на стъклото за идентифициране на бактериите от рода Salmonella. За това е необходимо да има набор monoretseptornyh серуми (анти-O и анти-H антигени). О-серум съответстват на отделните групи (А, В, С и така нататък. Г.) и бяло Kaufman верига. Н monoretseptornye серум фаза мач специфичен антиген флагеларно: А, В, С, D, G, m, и т.н. Серумите се използва в неразредена форма ...
Когато идентификацията се прилага група О серуми чаша капчиците. Всяка капка линия емулгиран малко количество тест агар култура, отстранен от горната част на наклона. Появата на аглутини в един или друг начин капка означава група, към която принадлежи култура. Тогава сложи реакцията на аглутинация с N-серуми, съдържащи антитела срещу антигени на Н-фазови специфични видове Salmonella, които са включени в тази група. Микробната маса в този случай трябва да се вземат от дъното на наклона и кондензирана вода. В присъствието на аглутинация е решена антиген специфична фаза и по този начин се образува култура.
Resistance. Директна слънчева светлина убива микробите коремен тиф, паратиф група за 4-8 часа. Ниските температури, те страдат от дълго време, като същевременно се запази жизнеспособността на лед в продължение на няколко седмици и месеци. Културите коремен тиф и паратиф пръти при нагряване до 60-65 ° убити час по-късно.
Typho-Паратиф бактерии устойчиви на сушене, могат да се съхраняват дълго време в почвата, канализационни и речни води и различни храни: .. месо, мляко, зеленчуци и др Бързото разрушителен ефект имат на дезинфекционни вещества (5-10% разтвор на белина фенол, лизол и други вещества).
Патогенност при животни и образуване токсин.
При естествени условия коремен тиф и паратиф само при хората. Лабораторни животни, които не са податливи на бактерии коремен тиф и паратиф. Истинските токсини не са получени от хранителни среди.
Патогенеза и клиника. Източникът на инфекцията от коремен тиф и паратиф е болен човек и bacillicarriers които произвеждат пръчки с изпражнения и урина. Инфекцията може да настъпи в контакт домакинствата от (от пациентите и оздравяващи bacillicarriers) и вода и храна. Първи през устата в стомаха, бактерии коремен тиф и паратиф изложени на вредните въздействия на киселинен стомашен сок и често биват убивани. Само пропуска основната бариера (с намалена стомашна киселинност, обилно с напитка и т. Д), пръчици са в тънките черва лигавица и което е инфекция шлюз.
В червата, някои от тях умират, а другият влиза в лимфната система, на тънките черва (самотни фоликули и Пайерови плочки), а след това да регионалните (мезентериална) лимфните възли. Тук бактериите се размножават и силно инхибиращи им бариерна функция избухне в кръвния поток. Тази фаза се нарича
bakteriemicheskogo и белязана от появата на първите симптоми на заболяването. Бактеримията - ключов елемент от инфекция с коремен тиф и паратиф, което се случва по време на целия период на заболяването. Поради частично унищожаване на микроби в кръвта и лимфните възли, ендотоксини са освободени, което води до интоксикация, което се отразява в клиничната картина на болестта. С кръвни пръчки разпределени по цялото тяло и са фиксирани в клетките на ретикулоендотелната система на лимфните възли, костен мозък, черен дроб и др. Органи.
Фазата на паренхимни дифузия. Това ограничава разпространението на патогена в тялото, генерализирана инфекция превръща в локализиран (AF Bilibin). Защитната реакция на тялото, която се изразява в повишаване на фагоцитната активност на ретикулоендотелната клетки и производство на специфични антитела води до освобождаването на паренхимни органи и кръв от микроби. Начало роля в това отношение принадлежи на бъбреците и черния дроб. Те се съхраняват в големи количества в съдържанието на червата и в жлъчния мехур като жлъчна намалява ефекта на антитела и е добра почва за отглеждане на коремен тиф и паратиф пръчки. Понякога бактериите след пълно възстановяване в рамките на няколко години, могат да остават жизнеспособни в жлъчния мехур, както и такива хора са потенциални източници на инфекция.
Инкубационният период е 10-21 дни. Началото на заболяването се характеризира с постепенно повишаване на температурата по време на нарастващите явленията на ендотоксин отравяне. Това се изразява в появата на главоболие, обща слабост, безсъние, виене на свят и делириум. Такова състояние се определя от typhosus терминът Статус (гръцки typhos - мъгла). Температурата постепенно се издига всеки ден на 1-ви седмицата до 40 °, се държи при тази височина в продължение на 10-14 дни, а на 4-ти седмица постепенно започва да намалява. До края на първата седмица на заболяване осезаем увеличен далак и черен дроб, 8-10 дни се появяват петна обрив (розеола), изчезва на налягане.
Характерен процес pathomorphologic на коремен тиф се играе в червата. През първата седмица на заболяването тифоид бактерии причинят остро възпаление на чревната лимфната система, в резултат на Пайеровите плаки и единични фоликули увеличаване на обема и набъбват. Коремен бактерии, алергени са едновременно сенсибилизират тези структури. На третата и четвъртата седмица на коремен тиф бактерии заболяване в жлъчката отново достигне червата, проникне в сенсибилизирани Пайерови плаки и единични фоликулите и ги предизвика алергична реакция, която се изразява в некроза на тези образувания. Тази фаза се нарича отделителната алергични. Некротичните маса Пайерови плаки и единични фоликули са елиминирани, което води до образуването на язви в стомашно-чревния коремен стената. С благоприятен курс на заболяването е налице лечебен тези язви, без усложнения. При тежки случаи, има стомашно-чревно кървене, и по-дълбоко язва може да се появи по време на перфорация на червата (перфорация), последвано от перитонит.
Завършва възстановяването заболяване фаза и възстановяване на физиологичен равновесие на организма.
Паратиф заболявания се срещат по-малко трудни и по-малко дълги (особено в паратиф) и не дават сериозни усложнения, които се случват в коремен тиф.
Имунитет. Прехвърлени коремен тиф и паратиф остави след себе си имунитет, въпреки че има случаи на рецидивиращо заболяване. В кръвта на възстановени антитела са: аглутинин, утаечна bactericidin и др.
Микробиологична диагноза. За диагнозата на коремен тиф и паратиф използвани бактериологични и серологични изследователски метод. Bacterioscopic метод е спомагателни, индикативна от всички бактерии коремен, паратиф групи имат общи морфологични и багрилни свойства.

1. Бактериологични метод. За изследването, се взема кръв, точковидна костен мозък, изпражнения, урина, съдържа розеола.

В началото на заболяването (и през целия период на заболяване) на пациента е изложен за изследване на кръвта за откриване него патогена, така
Като първи етап на заболяването, както е посочено по-горе, се характеризира с бактериемия.
Този метод за ранна диагностика на коремен тиф е известен като метода на кръвни култури. метод кръвни култури за първи път е въведена в микробиологична практика руски лекар Vilchur през 1887
Кръв, взета от посяването на вена, и големи количества кръв инокулират с - поне 8-10 мл, тъй като броят на агенти, циркулиращи в кръвта, може да бъде много малък. Кръв директно от леглото на болния се инокулира в колба, съдържаща 100 мл бульон жлъчния (10-20% жлъчна). При липса на жлъчката, кръвни култури може да се направи при 75-100 мл стерилна дестилирана вода.
причинители на на коремен тиф и паратиф в кръвта по време на фебрилно период, но броят им през цялото време се намалява. Ето защо, от 2-ра седмица на заболяване трябва да посее 15 20 мл кръв.
Култури се поставят в инкубатор при 24-48-72 часа за обогатяване, при което в субкултурата на чашата и върху средата Ендо агар наклонени (2-ри ден от изследването). Засяване на чаша позволява изолиране на чиста култура на патогена в натрупване замърсяване сапрофитни флора. След 18-24 часа инкубация в инкубатор изучаване култура на наклонени и в околната среда Endo. Ако наклон културната среда чиста култура - деликатен, полупрозрачни покритие - да започне да го идентифицира. За изследването на заразяване на чашата прибягва до ако наклонът се увеличава замърсяването. След това, от безцветни колонии се презасяване на наклона.
Изолираният култура (3-ия ден на изследването, докато субкултивиране с чаши с Ендо агар - четвърти ден) идентифицирани сеитба среда фа Ръсел съдържащи месо-пептон агар, глюкоза (0.1%), лактоза (1 ° / о) индикатор Andred или пъстър ред на въглехидрати и аглутинация с поливалентна Salmonella адсорбирания и monoretseptornymi серуми. Ако не настъпи аглутинация с О-серуми, е необходимо да се създаде експерименти с Vi-серуми или унищожи Vi-антиген. Това се постига чрез загряване на културата при 60 ° в продължение на 30 минути, или при 100 ° в продължение на 5 минути. На следващия ден, да направи промени по сметките в околната среда
Забелязали редица въглехидрати, крайният отчитане на реакцията на аглутинация и производство на резултата от изследването.
метод кръвна култура може да се прилага по време на периода фебрилна ( "всеки път, когато температурата на пациент увеличи" - AF Bilibin), но коремен процент бактериалната инокулация варира. Така че, през първата седмица на заболяване на кръвта култура е положителен в 90-100% от случаите, от 8-ми до 15-ия ден - 70-80%, а в следващите дни - в 40-60% от случаите.
Повечето от диагностичната стойност на реколтата от костен мозък пункция - метод mielokultury.
С Raskin направи игла пункция и гръдната кост се отстранява 0,5-0,75 мл пункция на костния мозък и се поставят в 3 мл бульон флакон жлъчката или жлъчката. По-нататъшните изследвания провежда подобно изследване на кръвни култури.
От края на 2-ри и през третата седмица на проучването произвежда изпражнения и урина на пациента - метод за стол култура и urinokultury.
пациенти с движения на червата са събрани в подлога, които трябва да бъдат внимателно се промива с гореща вода. Фекални в количество от 10 г стерилна дървена пръчка прехвърлят в стерилна буркан с стъкло или корк. Тест стол емулгира в 15 обема физиологичен разтвор (течни изпражнения се разреждат по-малко) и се подлага на стои в продължение на половин час за утаяване на тежките частици. След изпражнения се посяват върху плочи с Ендо среда, Левин и др. Едновременно посяват 1-2 грама на твърди или течни екскрети 1-2 мл на 10 мл течна среда обогатяване. В по-нататъшния ход на урина и изпражнения, е същият като разпределянето на кръв култура.
Както се използва за обогатяване на медийна среда Muller Kaufman и сътр.
Сряда Мюлер. За стерилна бутилка 200 мл излива 4,5 грама на химически чиста креда и се стерилизира с суха топлина. След това се излива в 90 мл флакон месо-пептон бульон и се стерилизира за 20 минути при 120 °. Отделно се получават: а) разтвор Hyposulfite (50 д в 100 мл дестилирана вода стерилизирани с течаща пара за 30 минути) - б) йод, разтворен в калиев йодид (кристален йод 25 грам, калиев йодид двадесетгр и дестилирана вода 100 мл). Непосредствено преди употреба в 90 мл колба с разтвор на 10 мл бульон Hyposulfite и 2 мл йоден разтвор на калиев йодид, се смесват и се въвежда 3,2 г изпражненията.

Плътни изпражнения предварително dvoynym- стрива с троен обем от физиологичен разтвор и се оставя да престои в продължение на 5 минути. За засяване вземат горният течен слой. Прясно приготвен среда може да се излива в 10 мл епруветки, към които се инокулират няколко капки стол.
Сряда Кауфман. Към 100 мл Mueller прибавя 5 мл стерилен жлъчката и 1 мл разтвор багрило brilliantgryun 1: 1000.
Стол култура тестове положителен само 30-40% от случаите, а в по-късните периоди (3-4 седмици на заболяването) и следователно, този метод се използва рядко за диагностични цели.
Урината се събира за посяване в стерилна епруветка (10-15 мл) или стерилен катетър през естествен уриниране след цялостно почистване и дезинфекция на външната периферия на меатуса на уретрата. Първо посяват няколко капки урина в агар Ploskireva, и след това отново се центрофугира утайка урина засети върху плоча с агар и Ploskireva носител (жлъчна бульон).
Може да се изследва за наличието на бактерии коремен-паратиф група на лимфен от розеола. Ако подозирате, че bacteriocarrier проучване изложени изпражнения, урина и дванадесетопръстника. Когато изпражнения изпитван се проучване на гладно 30 г натриев сулфат или магнезиев сулфат разтваря в 100-250 мл топла вода. Материал за изследване събира в стерилен буркан.
Серологично. Серологично диагностика на коремен тиф и паратиф се основава на твърдението за аглутинация, въведена в практиката на френския микробиолог Видал и носи неговото име. Видал реакция е поставен на втора седмица на заболяване (8-10 дни), тъй като по това време в кръвта на пациента се натрупва достатъчно количество аглутини. Към реакционната смес се 2-3 мл кръв от кубитална вена. Ако не е възможно да бъде пробита вена да вземе кръв от пръста или меката част на ухото (20-30 капки).
Widal реакция може да се поставя капка или метод обем. Методът за капково е полезно, когато серум на пациента е на разположение в ограничено количество и не изискват много от разреждане му. Обемно метод има предимството реакции настройка масови и определяне на ефекта от серум във високи разреждания, ако е необходимо. С капково
метод за получаване на основния 1:20 разреждане на серум (серум + 1 капка от физиологичен 19 капки). Експериментите бяха проведени в 5 тест за аглутинация тръби. Pasteur пипета nakapyvayut физиологичен разтвор на това изчисление: 14, 16, 17, 18 и 10 капки. След това, една и съща основна отпипетира серумно разреждане: 4, 2, 1 и 10 капки. Микробната суспензия на (диагностичен комплект) 2 капки се добавят към всички тръби с изключение на последната, и считат като течност, когато се разрежда. Widal реакционна схема е както следва (Таблица. 13).
Таблица 13
схема Widal реакция

Степента на разреждане на серум се определя, както следва. Преброяване на броя на течни капчици ин витро и разделен на броя на капки отглеждана серум получената номер. В горната схема, в първата тръба общия брой на капки 20, количеството на серумния капки - 4. Разделяне на 20 с 4, ще серумно разреждане 1: 5. Но тъй като в първия епруветката се излива не целия серум, и предварително разреден 1: 20, след умножаване на две разреждане (1:20 и 1: 5) за да се получи общо разреждане 1: 100.
Обемния метод е по-удобно и има широко приложение. При този метод, реакцията се поставя в обикновени бактериологични епруветки. Държавата определя необходимия брой епруветки. Във всички тръби с изключение на 1, дозират 1 мл физиологичен разтвор. От предварително сварени diagnosticum ОН, на втория ред - О-антиген, третият diagnosticum паратиф А и В четвърти паратиф diagnosticum. О-антигени (диагностични инструменти) се получава чрез кипене на културата или третиране с алкохол, OH антиген (диагностичен комплект) обработка на дивеч култура формалин.
Когато четене резултати реакционна тръба Vidal не трябва да се разклащат енергично, като получените люспи меки и лесно разделени. Допустим е направена от схемата за реакция представен на стр. 169.
Диагностична стойност в отговор Видал има аглутинация, като се започне с разреждане на серума 1: 200, като коремен тиф-Паратиф аглутини често намерени в здрави хора не по-рано са били болни от коремен тиф и не са ваксинирани срещу него (нормалните аглутинини), но тигърът е обикновено по-малко от 1 : 25-1: 50.
Ако има група аглутинация с две или три антигени на патогена да микроб с което аглутинация се среща в най-високо серумно разреждане. Видал положителна реакция също може да даде на хората серуми ваксинирани срещу коремен тиф и паратиф (присаждане реакция) и серум на хората, по-рано са били болни от коремен тиф - анамнестичен отговор. С цел да се разграничат инфекциозен Widal реакция от страна на "присадени" и "анамнезата" Курортът да му бъдат зададени отново след 5-6 дни. Ако тестът е болен от коремен тиф или паратиф, че през това време броят на антитела се увеличи и повторна реакция ще даде положителен резултат с по-висок серумен титър в сравнение с предходната. Под "ваксинация" или "анамнезата" антитяло титър отговор не се променя.
Освен това, за да се разграничи от инфекциозен Widal реакция "присадка" и "анамнестичен" може също така да се проведат по време на реакцията поотделно от ОН и О-антиген (който последната и се прилага), определяне, поради някаква (О- или H) е положителна, това аглутини реакция. Факт е, че по време на аглутинация натрупване с коремен инфекция има известна последователност в средата на заболяването на пациента натрупват тифоид О-аглутини че с прехода към възстановяване и скоро ще изчезнат
тяхното място се заема от Н аглутини. По подобен начин, след изкуствено имунизация (ваксинация) за коремен тиф в кръвната G-присадено антитяло открити къси и дълги съхранява само H-аглутини.
Реакциите индиректна (пасивна) хемаглути. Разглеждането на лица подозира, че са носители на коремен тиф пръчки получаване аглутинация реакционна среда със серум и Vi-антиген или по-чувствителен отговор - индиректна (пасивна) хемаглутинация. Тази реакция се основава на способността на червени кръвни клетки, третирани с танин и адсорбирани върху техните Vi-антиген тифоид пръчки, се придържат заедно, когато са изложени на серум, съдържащ аглутини за този антиген. За реакцията се използва еритроцити пилета, овце или човешки (О) група. Реакционната техника е както следва. От серум се загрява в продължение на 30 минути при 56 °, разрежда се с физиологичен разтвор 1: 50 до 1: 1600 и се излива в серия от тръби с 0,5 мл от всеки от различни разреждания от тях и 2 капки стандарт Vi-еритроцитен diagnosticum. Епруветките се оставят при стайна температура или в пещ в продължение на 24 часа и след това поддържане на реакционната продукта. Загуба на червените кръвни клетки в утайката (хемаглутинацията) показва наличието на антитела в тест серум.
В диагнозата на коремен тиф и паратиф да сложите на фаг отговор титър ръст. Това позволява силно чувствителна реакция бързо (в рамките на 10-16 часа) за идентифициране на материала, като малко количество от бактерии, които не са открити по бактериологичен метод. Методи за тази реакция е аналогичен на метода, използван за дизентерия, с изключение, че изпитваното вещество на фагов дисплей се инкубират до 16 часа, вместо на 4-5 часа при диагностицирането на дизентерия.
Фаги коремен пръчки. Изследвания на съветски и чужди автори са открили, че тифоид бактерии, съдържащи Vi-антиген, има връзка между антигенната структура и неговата способност да лизират бактериофаг. Има два вида на фагите:
първо - Vi-1 фаг лизирани почти всички Vi форма пръчки коремен (Universal) -
вторият - Vi-2 фаги лизират само тези щамове, в които преминават.
В момента има 78 видове фагови коремен. Те са стабилни и не се променят или в тялото или в околната среда. С помощта на стандартен фаг, да зададете вида на фаг на патогена, което е от голямо практическо значение, което позволява да се разкрие епидемиологичната верига. Така например, за откриване на бактерии коремен тиф и същи вид на фаг имат bacillicarriers на мандра, в млякото и при пациенти, които ядат това мляко помага в този случай да се определи източника и пътя на предаване.
Техника следните фаг типизиране. Три-четири часа бульон култура от фини платина контур на патогена или глоба Pasteur пипета посяват на добре изсушени агарни плочки под формата на сектори или кръгове в броя на видове фагови разположение. Чаши, поставени в инкубатор за 30 минути, за да изсъхнат. След това, на суха капчиците тест култура линия типични обеми прилагат идентични фаги (VI-2) в критичен тест разреждане. Обикновено разреждането тестове, т. Е. Операционна доза на етикета на ампулата с фаг. Основната фаг разреден бульон на посочения разреждане. Купа отново поставя в термостат при нощ и определяне тип фаг произведени в съответствие с диаграмата доставя с комплекта, произведен от бактериофаги.
Специфична превенция и терапия. Специфична профилактика извършва химическа ваксина TABte, който се състои от пълен пръчки антигени коремен, паратиф А и В, и тетаничен токсоид.
Специфично лечение на пациенти с коремен тиф и паратиф извършва антибиотици: хлорамфеникол, synthomycin, хлортетрациклин и сътр.