Дизентерия бактерии - микробиология с техниката на микробиологични изследвания

БАКТЕРИИ дизентерия (Shigella)
Дизентерия - инфекциозно заболяване, характеризиращо се с лезии на дебелото черво и явленията на интоксикация. Причинителят на болестта е група от бактерии, обединени от една обща родово име - Shigella в чест на японския микробиолог Шига, който доказа, ролята на тези бактерии в етиологията на дизентерия.
Има два вида дизентерия заболявания: 1) амебна дизентерия причинени дизентерия амеба и се среща предимно в топлите страни, и 2) бацилна дизентерия, причинени дизентерийни бактерии и разпространяват широко.
Wand дизентерия първи изолиран в чиста култура AV Григориев през 1891 г. Само по-късно се разделят видове и видове дизентерия пръчки.
През 1962 г. Съветският класирането на бактериална дизентерия (Shigella) е приет въз основа на антигенни и биохимични характеристики, присъщи основните представители на тази група от микроорганизми са били пуснати.
Според тази класификация. (Таблица 16), Shigella разделени в две групи:
1) nonfermentative манитол (mannitotritsatelnye) и 2) ферментиране манитол (mannitpolozhitelnye).
Първата група включва три вида бактерии: Григориев-Shiga-монтаж и Schmitz Lardzh-Sachs, че антигенната структура разделена на 8 вида, а вторият - два вида: бактерии и Flexner sonnei. Вижте Flexner в техните ензимни и серологични имоти, разделена на три подвида: действителното Flexner, Nyukestl и Бойд.
Антигенни структура подвид Flexner разделени в 5 серологични варианти и подвида Boyd - 15. Бактерии Nyukestl без серологични видове от биохимични свойства са разделени на три подтипа (виж таблица 18 ..). Бактерии Sonne серологични варианти нямат, но имат склонност да дисоциация на твърдо хранителни среди. В процеса на дисоциация формира гладки и грапави колонии.

Вътрешен класификация дизентерийни бактерии (род Shigella)

1. Не е ясно какво принадлежи видове,
2. Лишени от типични антигени.
3. Три ензимна тип.

Фиг. 80.

Гладка колония (S-форма) са малки, прозрачен, безцветен с гладки ръбове (Фигура 80). - колония груб (R-форма) - по-голям, плосък, груб с назъбени ръбове, по-малко прозрачни от гладки колонии.                                                   
Морфология и багрилни свойства. Дизентерия бацил по размер, форма и оцветяване подобен на цялата група на коремен. За разлика от последните, те все още.
Културни и биохимични свойства. Дизентерия бацил растат по обикновен хранителни среди, като коремен тиф бактерии. На медии с въглехидрати имат по-ниска ензимна активност, в сравнение с другите членове на ентерично коремен група с бульон растеж не образуват сероводород.
Дизентерийни бактерии не ферментират лактоза, други въглехидрати разграждат само до киселината. Пръчици Sonne причини бавно и слабо образуване на киселина в среда с лактоза (втория ден).
За да се различава дизентерия пръчки от коремен тиф, паратиф и един от друг са използвани: 1) съотношение на въглехидрати, 2) за проучване на мобилността, 3) реакцията на аглутинация. Сходството и разлика знаци дизентерийни бактерии показани в таблица. 17 и 18.
Таблица 17: Биохимични свойства на бактериална дизентерия (Shigella)

Биохимични опции подвид Nyukestl1
Легенда: + ферментира да образуват киселинно ± не ферментира always-- не ферментира.
Таблица 18

Легенда: К - ферментира да образуват киселини, CG - киселина ферментирало за образуване на газ и наименования в скоби показват забавено реакция, наблюдение се извършва в продължение на 15 дни при 37 °.

Resistance. Устойчивост в различни дизентерия пръчки не е същото. Например, Shiga бацил Grigoreva- директна слънчева светлина убити в рамките на 30 минути, и бактериите и Flexner sonnei - 3 за час. В почвата Григориев-Шига бацил спасени средно по 45 дни, а Flexner и Sonne - 65 дни. В лед дизентерия бацил съхранява в продължение на седмици или месеци. Подгряване на 60 ° ги убива за 10 минути. Фенол и белина в обичайните концентрации дизентерийни бактерии убиват в рамките на 30 минути.
Патогенност при животни и образуване токсин. При естествени условия животни, които не са податливи на болести и бактериална дизентерия. Изкуствен инфекция през устата остава неопределена. Дизентерия бактерии Григориев-Shiga продукция екзотоксин. Екзотоксин доста устойчив по отношение на висока температура и издържа на загряване до 70 °. Други видове дизентерия пръти са по-малко токсични и излъчват само ендотоксин.
Патогенеза и клиника. Източникът на инфекцията с дизентерия е болен човек, които оздравяват и bacillicarriers. Инфекция дизентерия се осъществява чрез контакт домакинствата или чрез заразена храна и вода. Дизентерия микроби навлизат в организма през устата и локализирани в лигавицата на дебелото черво и да предизвикат тук първи остър катарален, а след това дифтериен възпаление. Впоследствие некротична процес се развива, в резултат на образуване на язви. Инкубационният период е кратък с дизентерия - от 2 до 5 дни. Характерни симптоми: умора, повръщане, повишена температура, летаргия, течност, лигавицата първоначално и след това зацапване стол, честото стол, до 40 пъти на ден, е придружен от силна болка. Много характерни болезнено тенезъм - провеждане на желанието да се пречиствам.
Токсични и тежки форми на дизентерия, причинени от Shiga-пръчки Григориева, както и някои видове бактерии прилепнали Schmitz. В момента най-често срещаната форма на дизентерия, причинена от пръчки Flexner и Sonne.
Имунитет. В дизентерия имунитет слабо изразена, въпреки че в кръвта на пациенти проявяват различни антитела (аглутинини, bactericidin, opsonins, допълни-антитела и антитокини - дизентерия, причинени от Шига-стик Григориев и токсични форми на дизентерия монтаж - Schmitz).
Това, очевидно, обяснява възможността за преход от остри форми на хронична дизентерия. Липсата на напречното имунитет (един срещу бактериални видове антитела специфични образувани само) дава възможност да се повтаря дизентерия заболяване, ако настъпи инфекция други изгледи.
Микробиологична диагноза. За изследването на дизентерия, трябва да се използват пресни изпражнения, вероятно просто, получена от пациента, в противен случай процентът на положителните резултати, се намалява значително.
За събиране на изпражнения се препоръчва да се използват стерилни чинии и салфетки, които се поставят в съд, промива се с гореща вода (обработка не е разрешено съд или тигел дезинфекционен разтвор, като малки количества от последната убиване дизентерия бацил). По време на транспортирането на дълги разстояния изпражнения събраните изпражнения се поставя в широка тръба на течност съхранение (30% неутрален глицерол и 70% физиологичен разтвор) в количество от 13 до 23 изпражнения (10.5 мл) към тази смес. Тръбите трябва да се съхраняват на тъмно място при ниска температура. Засяване изпражнения трябва да се правят не по-късно от 12-24 часа след приема.
Тя може да служи като консервант 1.5-3% хипертоничен физиологичен разтвор и получи скорошно разпространена сред Leyfsona натрупване. Съставът на тази среда е включен selenistokisly натриев който стимулира растежа на бактериална дизентерия, докато потискане едновременното развитието на микрофлора (Е.коли, стафилококи, ентерококи и други микроби).
Получаване selenitovoy Leyfsona среда. В 1 литър дестилирана вода се разтваря 7 г безводен динатриев хидроген фосфат, три грама от едноосновен натриев фосфат (NaHP04), 5 г пептон (Чехословакия фирма "Spofa" или унгарски "Рихтер"), 4 г лактоза, пълни в ампули от 50 мл и се стерилизира течаща пара в продължение на два дни до 30 m при температура от 112 ° в продължение на 30 минути.
Отделно получени в стерилна вода, разтвор на киселина 10% натриев selenitokislogo (NaHSeCb). Преди употреба, всеки флакон, съдържащ 50 мл основен разтвор се прибавя 2 мл разтвор на натриев selenistokislogo и приготвена среда се разпределя в стерилни епруветки в 5-7 мл п плътно затворен,
Преди да се приготви среда за използване, е необходимо да се определи точното съотношение на фосфат, който с пептон тестовата проба и кисел натриев selenistokislogo дава рН не по-високо от 6,9-7,1, която се контролира чрез промяна на количествено съотношение фосфати.
Такива podtitrovka направени когато променя една серия от средни съставки (пептон, selenistokisly киселинни натриеви фосфати).
Материалът на улавяне може да се извърши с помощта на стъклени тръби с opayannymi края или с памучен тампон.
Platinum линия хванат лигавицата или мукопурулентна бучка, която се промива отново в стерилен физиологичен разтвор и се инокулират в три чаши последователно със среда Bacto агар или Levine J.
След 24 часа култивиране в инкубатор посев изследват нежни кръгови прозрачни безцветни колонии. Подозрителни колонии се проверяват на наклон на манитол и кратко колоритен номер с лактоза и глюкоза, и 24 часа по-късно да се вземат предвид получените резултати.
Едновременно с материала на безцветни колонии поставя приблизително аглутинация с вида и ако е необходимо monoretseptornymi типичен серуми. Положителна реакция с един от серумите потвърждава микроби, принадлежащ към групата на дизентерия. Резултатът от изследването (предварително) може да бъде издаден след 24 часа.
Вместо кратко серия от толстолоб може да използва среда на Ръсел. Тази среда е удобно, тъй като замества трите тръби. Вместо това, наклонът е скосена среда повърхност на Ръсел (с правите си наркотици, показателен за аглутинация). Когато ферментацията на лактоза и колона на средата и скосената повърхност оцветени indikatoru- съответно по време на ферментацията на глюкоза среда колона само оцветени съответно намалена цвета на индикатора, и газът се натрупва на дъното и под формата на мехурчета разгражда агар. Глюкоза в Сплит средносрочен Ръсел само в анаеробни условия. Културата, ферментират лактозата върху околната среда на Ръсел през първия ден, се счита за не-патогенни и ще даде отрицателен тест. Същият култура, която ферментира глюкоза само киселина, са за по-нататъшно проучване. Подгответе лекарство за оцветяване по Грам, и да определи движението и да даде тест за аглутинация на предметно стъкло. Препоръчително е да се използва смес от серуми срещу преобладаващите в областта и видове Shigella видове (например, Flexner, Sonne, Nyukestla). С положителен резултат, културата тестван отделно поливалентен анти-Flexner серум, серум и серум Nyukestla Sonne,
За определяне на типа и подтип избран flexneri културата, беше тестван в реакцията на аглутинация на стъклото първо с стандартни серуми (I, II, III, IV и V), и след това с група (3, 4, 6, 7 и 8). За окончателното идентифициране на изолиран културална среда се посяват в Хис манитол, малтоза и захароза в епруветка с бульон Hottinger за определяне на сероводород и индол.
В основата на следните симптоми служи за разпределяне на положителен анализ: отрицателна селекция грама, типичните фиксирани коли от културата и антигенни свойства, характерни за Shigella.
Някои пациенти с атипични стойка пръчки, които не са тип-специфични серум аглутинират. В такива случаи, микроба, принадлежащ към групата на дизентерия набор проба на избрания фаг лизис култура dezinteriynym поливалентен бактериофаг.
Откриване на бактерии от дизентерия чрез увеличаване на фагов титър. В изпражненията без консервант се претеглят и надмина него месо-пептон бульон (рН 6,8-7,0) скорост 10 мл на 1 г изпражнения, се разклаща с гранулите, оставени за 5-10 минути. Получената суспензия се излива в 2 широки тръби 9 мл във всяка. Индикаторът мл фаг на първия 1 (за откриване на бактерии от дизентерия), разредено 1: 100 в 2-ра - 1 мл бульон. Третата тръба 9 се излива мл бульон и 1 мл следящият индикатор в работните разреждания на фага. От трите епруветки 1-I е опитен, втората служи като контрола за наличието на свободен фаг, третият - за контрол на индикатора за фагов титър. Епруветките се поставят в термостат при 37 ° в продължение на 4,5-5 часа, за да се увеличи фаг. Съдържанието на всяка епруветка се разреждат в бульон 500-1000 пъти или повече, така че 1 мл от трета тръба (контрола фаги) за получаване на такъв размер на отрицателни фагови колонии, които могат да бъдат считани (10-20 телца). Епруветките се загрява до инактивиране на микробите във водна баня при 56-58 ° в продължение на 30 минути. След това методът се прилага агар слоеве, което позволява да се определи количеството на телца дизентерия бактериофаг. Този метод е както следва. Три чаши Geidenreich - Петри се налива 1.5% месо-пептон агар и се изсушава и след това се излива във втория слой,
който се състои от 2.5 мл разтопен агар 0,7%, 0,1 мл промиване модели култура дизентерийни бактерии и се нагрява смес от 1 мл на тръбите 1, 2, 3-д (във всяка чаша смес). След 20-30 минути, чашата се поставя в термостат при 47Ж 5 часа и след това се вземат предвид резултатите от реакционни места в стерилен съд с изпитваното вещество (I-1 чаша) и контрола (2 и 3).
Повишен титър бактериофаг (фаг телца) повече от 5 пъти в първата чашка в сравнение с контролата което показва наличието в материала се придържа дизентерия.
При хронична дизентерия за диагностициране на серум на пациента заболяване могат да бъдат поставени: 1) опсоно-фагоцитната reaktsiyu- 2) допълват реакция на свързване, и 3) реакция на аглутинация.
Методи за формулиране на аглутиниране реакции, аналогични на Widal реакцията на формулировка, с единствената разлика, че епруветките се инкубират 18-20 часа.
В момента на диагнозата на дизентерия използва широко взаимодействие на пасивна хемаглутинация с еритроцитни diagnosticums Sonne.
Собствен култура дизентерия бактерии също изследвани за чувствителност към антибиотици.
Специфична превенция и терапия.
В непосредствена близост предназначени дизентерия носител или пациент с хронична дизентерия при използване като профилактично средство. бактериофаг.
сулфа лекарства (sulgin, ftalazol и др.), антибиотици (sintomitsina, biomycin, хлорамфеникол, стрептомицин) се използва за лечение на дизентерия. В случай на тежки токсични форми на заболяването са администрирани антитоксично protivodizenteriynoe серум. При лечението на хронична дизентерия са алкохол ваксина VA Chernohvostova.