Форми на инфекциозни заболявания - микробиология с техниката на микробиологични изследвания

Видео: Белодробни опасни simbioses AcineMRSA_ Белодробна инфекция симбиоза на YouTube през 2014 г.

Символи разпространението на инфекциозни или инфекциозни заболявания може да бъде различен. Най-честите инфекциозни заболявания се срещат като разпръснати отделни случаи, епидемиологично несвързани един с друг. Такива заболявания се наричат ​​спорадични.
Ако инфекцията се в огромен мащаб и има кратък период от време, да речем епидемия. Когато възникнат епидемични инфекциозни заболявания от общ източник или общи свързани пътища. Pandemic епидемия са тези, които достигнат големи размери обхващат няколко страни и цели континенти. Пример за това е случай на грипна пандемия в двугодишния период 1918- 1919., От които 20 млн. Души са били убити по целия свят. Когато инфекциозни заболявания ендемични дълго остават във всяка област, се характеризира с определени характеристики на измиване или природен огнища.                         

Експериментални методи в микробиологията

Видео: Намажете върху флората

Често в разследването на материала да се прибегне до за заразяване на опитни животни. Инфекция на животните е добър метод за изолиране на чисти култури от патогенни микроби, бавно или много слабо расте на хранителна среда на материал, силно заразени с бактерии (например, пневмококи и туберкулозен микобактерии от слюнка). Въвеждане на такова патологично материал води до факта, че тялото податливи животното отглеждане предимно патогенни микроорганизми. След смъртта на животното, можете да получите чиста култура на причинителя.
Експерименталният метод използва за възпроизвеждане на патогена на болестта не е известен, за изследване на патогенни и имуногенните свойства на различни микроорганизми, както и да се определи ефикасността на химиотерапевтично ефект на микроби (антибиотици, сулфонамиди) и други лекарства.
животни прибягват до експериментална инфекция и в случаите, когато патогена, като вирус, могат да бъдат намерени играе типично заболяване при животните.
Съдържанието на лабораторни животни и да ги спазва. Най-често, тъй като тези животни са зайци, морски свинчета, бели плъхове, бели мишки, най-малко - гълъби, котки, кучета, и дори по-рядко - маймуната. За запазване и размножаване на лабораторни животни, има детски ясли. От развъдник здрави животни да влизат в лабораторията и за известно време поставя в частта за карантина, а след това се съхраняват в специална стая - вивариум, а през лятото - в кошарите. Лабораторни животни, държани в клетки (мишки в стъклени буркани), монтирани на специални рафтове - рафтове.
За работа с храна за животни моркови, цвекло, ряпа и зърно смес (овес, ечемик, пшеница и т.н.). През лятото и есента, се препоръчва да се получи разнообразие от билки (живовляк, глухарче, люцерна, спанак, моркови върхове и т.н.).
Плъхове и мишки трябва да получат допълнително пастьоризирано мляко, месно и костно брашно и кръв (дневни стандарти фуражни за лабораторни животни, описани в специфичната употреба).
В вивариума на всяко животно, включени в експеримента, регистрационната карта фабрика, където има всички са показатели: от датата на получаване, номерът на животните, броя на клетките, тегло, температура, естеството на експерименталната процедура, броя и местоположението на въвеждане на материала, датата на клането или смърт.
Тегло на животните в опити често от голямо значение, така че преди пристигането на животните от отглеждането им вивариум претегля. Много често животните по опит, телесна температура се измерва чрез специални малки термометри живак. При измерване на температурата на живак резервоар лабораторни животни термометъра се въвежда в лумена на ректума до предварително определена дълбочина (морски свинчета и зайци, на дълбочина от 3.5 cm). Продължителност на измерването на температурата трябва да бъде постоянна (5 минути), след термометъра се изважда и се записва температурата на животното и след това изтриване термометър и дезинфекцират.
В някои случаи, животните бяха упоени преди началото на експеримента (болка). Анестезия може да бъде обща или местна. Обща анестезия в малки лабораторни животни се постига с етер. Локално анестезия се постига чрез подкожно приложение на лекарства като кокаин или прокаин. Дозите наркотично вещества са различни в зависимост от вида.

В процеса на експериментални изследвания в лабораторията трябва да вземе от кръвта на опитни животни. Зайци и морски свинчета са като кръв от сърцето или от маргиналната ушна вена. Мишки и плъхове се нарязват на върха на опашката и получената кръв се събира в епруветка или в nasasyvayut Pasteur пипета. Козината в лабораторни животни при събирането на кръв сайт изрязани кратко или обръсната, кожа втрива с алкохол и след това с етер. Зайци и морски свинчета при вземането на кръв от вената на ушна първо трябва да се прилага с няколко кликвания на ушната мида. Този прилив на кръв към ушната вена. След това иглата на спринцовката прободен вена и придобиване на необходимото количество кръв.
Техниката инфекция. Лабораторни животни инокулирани с нативния материал или суспензия от бактерии, получени съгласно оптичен стандарт. Инфекция на животни, произведени или естествено - през храносмилателния тракт или респираторно инхалиране, или при подаване пулверизиран материал или, по-често, изкуствено чрез инжектиране.
Има следните методи за изкуствено заразяване на животни:

1. подкожно - тест спринцовка материал се прилага директно под кожата на морски свинчета и зайци в областта на бедрото, мишки - кръста в основата на опашката (Фигура 49);
2. интрадермално - тестов материал се прилага директно в кожата (. Фигура 50);
3. интрамускулно, - материалът се въвежда във вътрешността на мускулите;
4. интраперитонеално, - материалът се въвежда в коремната кухина;
5. интравенозно - материал се инжектира в кръвния поток чрез инжекция във вената (Фигура 51);
6. субдурален - материалът се инжектира под твърдата мозъчна обвивка.

Път на инфекция, както и изборът на животното играе важна роля. Аеробни микроорганизми действат на възприемчивите животни е най-слабото когато заразен през устата и под кожата, е много по-ефективен, когато се прилага в областта на корема, както и когато се прилага директно в кръвния поток или под мозъчните обвивки.

Фиг. 49. Подкожно инфекция на мишката.

Фиг. 50. Интрадермално заразени прасета.

Фиг. 51. Интравенозна заек заразяване.

Видео: Как ще бактериологична посявка на урина?

Напротив, интравенозно приложение на анаероби не винаги е ефектът, и от същия материал се инжектира подкожно или дълбоко в мускула, което допринася най-ясно изразен ефект.
Място на въвеждане в тялото на материала за обработка: изрязани вълна, почистете кожата с алкохол и смазване йод. При инфекция на опитните животни е необходимо да се гарантира правилното им е удобно. Това се постига с помощта на специални устройства - различни видове табла, притежатели или животно държи асистент. Асистентът е на заек дясната ръка върху кожата на гърба, повдига и определя задните си крака под мишницата си лява ръка. При това положение, заекът е твърдо фиксирана. Можете да улови заек и по друг начин: седнал на стол, за да вземе задните си крака, повдигнати, а главата и предните крака притиснати между краката.
С хранени морски свинчета, както следва. В една ръка закрепва задните крака, а другият - предните крака и главата. Мишки за фиксиране на една страна да вземе опашката, а другата хватка на кожата в горната част на врата се вдигна и се задържа в това положение в момента на инфекция. Когато се работи с малки животни (мишки), могат да бъдат освободени без специални инструменти и без асистента.
Instrumentation необходимо за инжектиране (спринцовка, игла), стерилизира чрез кипене, и времето, необходимо за инфекцията материал, се поставя в стерилен контейнер.
Когато пишете в материал спринцовката замърсяващото трябва да се страхуват от спрей си. За тази цел, след като материалът в малко по-голям, отколкото е необходимо за инфекцията, броят се набира в резервоара на спринцовката, като последният е включен вертикално нагоре и иглата, върха на иглата облечени в памук, налягане на буталото внимателно я да въздушни мехурчета и излишната течност. Вата изхвърля форцепс в разтвор на дезинфектант.
Най-простият и най-често срещаният начин zarazheniya- подкожно. Тя е по-трудно да се осъществява на инфекцията във вената. Зайците бяха инокулирани в ухото вена странично, морски свинчета - в югуларната вена, мишки и плъхове - опашната вена.
След инфекция, зайците и морските свинчета се поставят в клетките и мишките - в стъклени буркани, изолирани от здрави животни. На клетки или буркани залепен етикет, на който е показана датата на инфекция, естеството на експерименталната процедура, материалът, който се произвежда от инфекцията, името на експериментатора.
При опит животни трябва редовно да получават достатъчно количество храна и вода или мляко и престой в благоприятните условия на температура (не по-ниска от 10-15 °). Мониторинг на общото здравословно състояние на животните, се почистват ежедневно 1 път, или по-добре, 2 пъти на ден.

Аутопсията и бактериологично изследване на органите на експериментални животни. Аутопсия на животни трябва да се направи възможно най-скоро след смъртта, в противен случай тялото трябва да бъде запазен на лед.
В първите часове след смъртта на неговите животински тъкани и органи съдържат само бактерии, които е инфектирани.
След известно време, тези бактерии са свързани сапрофити - чревни бактерии, които проникват в чревната стена.
Аутопсията трябва да се направи в отделна стая, или най-малко на отделен, специално предназначени за тази таблица. Преди отваряне за дезинфекция на животински трупове външната обвивка на насекоми и унищожаване потопени в разтвор на дезинфектант (2% разтвор лизол). След това телата на животните, свързани с дървена дъска специални щифтове или ноктите. Труп непременно оправя стомаха. Фиксираната тялото, заедно с борда се поставя в емайлиран чугун, желязо или дълбока тава. След дезинфекция на повърхността на кожата на животното, за което вълната се промива тампон напоен изобилно 5% разтвор на карбоксилна киселина или на 2% разтвор на лизол.
Инструменти (форцепс, ножици, скалпели) трябва да се варят в 3% разтвор на натриев бикарбонат за 20 минути, и им позволяват да се охлади. След това преминете към аутопсията. На първо място, с помощта на скалпел и форцепс животинска кожа се реже по средната линия на врата на пубиса и otseparovyvayut с един или от другата страна, за да открият цялата предна повърхност на тялото. В същото време се обърне внимание на състоянието на възлите на подкожната тъкан и лимфни. Използвани инструменти, поставени в стъклена чаша с разтвор на дезинфектант. Otseparovannuyu повърхност се втрива с тампон, напоен с алкохол, стерилни инструменти и отвори гръдния кош. Нарежете диафрагма страна първо от едната страна, се въвежда в разреза и тъп челюстта на ножиците режат rebra- това се прави с другата ръка. Тогава форцепс захващане на долния ръб на гръдната кост се нарязва с ножица по краищата на ръба на отвора, клапата се повдига и отделя ребро медиастинума, като се внимава да не се намали сърцето риза. Огледайте гръдния кош и ако има течност, тя се посява и го направи петна върху пързалки. След това основата се отрязва риза, посещение му кухина, с метална шпатула срязване повърхност на дясното предсърдие или камера и чрез prizhzhennoe място се инжектира стерилна пастьорова пипета. Възстановеният кръвта се посява върху хранителни среди и превръщането петна върху пързалки.
След стерилни инструменти произвеждат коремен разрез от долния ръб на гръдната кост да пубиса и правят две съкращения напречно. Проверка на перитонеалната кухина, и, ако има излив, посяват му контур или Pasteur пипета към хранителната среда. Избор на хранителна среда, зависи от вида на микроорганизъм, който причини смъртта на животното. Задължително изследване подлежат на далака, черния дроб и мезентериални възли. Първо далак отстранен с пинсети, обърнете внимание на външния си вид, на рязане нея посредством стерилни ножици, да вземе една линия материал с разрязаната повърхност и да направи културата. По същия начин те правят засяването на черния дроб и други органи. Ексудат от коремната кухина (ако има такива), черен дроб и далак направи петна за микроскопско изследване. За да направите това, вземете парче на пинсета тяло, неговата повърхност се нанася слайда и да направи серия от отпечатъци. трупове остатъци унищожаване чрез изгаряне или чрез автоклавиране.
Определение Дим микроб. Летална доза патоген култура варира в зависимост от метода на инжектиране и мястото на въвеждане на микроорганизмите, но основната стойност в това отношение е степента на податливост на даден вид, както и индивидуално съпротивлението на всеки.
DIM определя, както следва. Епруветката, съдържаща агар култура на тест микроба се излива 5 мл стерилен физиологичен разтвор и се върти между дланите на ръцете, докато с агаровата повърхност покритието не се измие цялата микробния растеж. Част от тази суспензия се пипетира в друга стерилна епруветка, дебелина на стената и диаметър от които са същите, както в епруветки с бактериален стандартно състояние.
Бактериалните стандарти, изготвени държавен институт за контрол на биологичното медицинско име LA Tarasevich в Москва, и съответстват на съдържанието на 500 Mill. И 1 млрд. Микробни тела в 1 мл суспензия.
Чрез сравняване на получената суспензия микробен (степен на помътняване) с бактериална стандарт получава суспензия (разпръскване това физиологичен разтвор), съдържащ 1 мл от 1 млрд. Микробните органи. Експерименталните животни се прилагат 100, 200 Mill. И микробни органи т. D., за което получената суспензия се разрежда с физиологичен разтвор, така че всяка доза от микроби, съдържащи се в същия размер (например, 0.5 мл). Това спиране на минималната доза от микроби, които причиняват смъртта на животното, и е слабо.