Агент причинител на туберкулоза - микробиология с техниката на микробиологични изследвания

Mycobacterium туберкулоза е открит от Koch през 1882 г.
Морфология и багрилни свойства. Тънки, често извити пръчки с дължина от 1.5 до 4 микрона и дебелина от 0.3 до 0.4 микрона. Податливи на полиморфизъм. Оцветените препарати са представени под формата на тънки, прави или леко извити пръчки, на гранули или под формата на вериги, съставени от зърна (фиг. 87 вложка).

Фиг. 87. ТБ бактерии в храчки оцветяване Ziehl - Neelsen.
Фиг. 89. Mycobacterium туберкулоза. Растежът на картофи среда.

Видео: Слюнка колекция

1. 250 г желатин се смила в стерилна мелница и се прибавя към 212 мл дестилирана вода и 37,5 мл глицерол. Сместа се поставя в ледник една нощ и след това се филтрува през стерилен тензух.
2. Пресни яйца (15-20 бр.) Беше старателно измити с вода, четка и се поставят за 15 минути в 70 ° алкохол за дезинфекция. След това асептично се смесва с яйчен жълтък протеин.
3. Алкохолът 1% разтвор тинтява виолетово.

При подготовката на среда съставки се смесват в следните пропорции: първите 200 мл, втори и трети 400 мл 0,5-1 мл. Средата се излива в епруветки или чаши и 3 последователни дни

Koch ролка в апарата за 30 минути: 1 ден и 85 °, в 2-та и 3-та до 75 °. Сряда лилави колонии от бактерии TB жълтеникави. Ако искате да се съхрани културата ин витро, средно е готова без добавяне на оцветители.
Сряда Petranyani. Към 150 мл мляко се прибавя 6 г картофено нишесте и 1 г пептон и се нагрява, като през цялото време се разбърква на водна баня, докато се разтвори, след това се добавя един нарязан картоф (размера на яйце пиле) и се нагрява, за да образуват паста и след това още един час се загрява на слаб огън. След охлаждане до 50 ° се прибавя смес на 2 цели яйца, един яйчен жълтък, 12 мл глицерин и 10 мл 2% воден разтвор на зелен малахит, разклаща се добре и се филтрува през марля, дозира в епруветки, косене и фракционна стерилизира Ден 1 20 минути при 80 °, 2 минути и 3 минути на ден или 15 минути при 75 °. Подготвената среда има еднакво зеленикав цвят с достатъчно количество на кондензация на вода. Колонии на туберкулозата бацили са ясно разграничени на зелен фон среда. Бактериален растеж се случва в 10-30 дни.

Глицеринов картофи Павловски. Картофите се промива с вода, се пречиства и се поставя в 1% разтвор на живачен хлорид в продължение на 30 минути, промиват се с 12 часа под течаща вода. Нож или удар на тръби, изработени от картофени бутилки, те се отделят по диагонал. Косо нарязани картофи се поставят в широка тръба с свиване на дъното или убождане мач така че картофите не са докосвани на дъното на епруветките. На дъното на епруветката се излива 5 мл 1% разтвор на глицерол. Възможно най-бързо стерилизира.
Resistance. Туберкулозен микобактерии са по-устойчиви от други бактерии спорогенните. Те са добре издържат на изсушаване. Директна слънчева светлина ги убива след 45-50 минути, пръснати - в 8-10 дни. При нагряване, те са убити в течности при 60 ° за 15 минути и при 70 ° - 3 минути.
От дезинфектанти за дезинфекция секрети на пациенти с туберкулоза може да се използва хлорид на вар и хлорамин. Белина в суха форма се използва за дезинфекция течни субстрати (слюнка, урина, изпражнения). Хлор-вар мляко се използва под формата на 10 и 20% суспензия във вода, белина, белина изяснени разтвор - във формата на 1 и 3% разтвор на хлорамин използване на 3 и 5% разтвори. Обекти съдържащи нарастък бацил се потапят в продължение на 2-3 часа в 3% разтвор на хлорамин.
Видове Туберкулозната бацили. Има три вида Mycobacterium туберкулоза: човешкия тип (typus humanus), тип говедата (typus bovinus) и инфлуенца тип (typus авиум). Тези видове са близо един до друг, но се различават един от друг набор от функции.
В човешката патология главната роля принадлежи на туберкулозни микобактерии човешки и говежди тип.
Има редица функции, които позволяват да се разграничат причинител на туберкулоза човешки патоген от туберкулоза. Mycobacterium туберкулоза тип човешки е по-дълъг и по-тънки пръчки туберкулоза. На изкуствена медии причинител на туберкулоза по говедата расте много по-бавно и дава по-икономична растеж, не се нуждае от глицерин. Човешки тип нарастък бацил инфлуенца главно на морско свинче, вида податливи говеда много бозайници (едър рогат добитък, морски свинчета, зайци, кози, кучета и т.н.).
Патогенезата и клинично туберкулоза. Източникът на инфекцията са болни хора, животни (едър рогат добитък и малки животни), както и птици. Mycobacterium туберкулоза отличава от пациенти с храчки (на белодробен форма на заболяването), с фекалиите (в чревна форма) и урина (в лезии на пикочните пътища). Туберкулоза инфекция най-често се осъществява чрез въздуха капчици. Mycobacterium туберкулоза може да се инхалира в белите дробове с праха в червата на мляко от болни крави. Инфекция на директен и индиректен контакт, през кожата и лигавиците.
Когато туберкулозна инфекция в разработването характеристика патологично образуване организъм, така наречените подутини (tuberculum- нарастък). Следователно, името на процес - TB, или туберкулоза. Образуването на туберкули е проява на фагоцитната реакцията фосфатиди, съдържащи се в тялото на туберкулоза микобактерии. В центъра на туберкулоза на нарастък бацил често се съдържат в рамките на гигантски клетки. В благоприятно третиране нарастък запечатан, импрегнирани със соли на вар, и той идва вкаменяване (вкаменяване). Mycobacterium туберкулоза остане жизнеспособна в продължение на много години в рамките на туберкули, чрез която постоянно поддържа възможност за влошаване на процеса на туберкулоза с отслабването на организма.
Клиничните прояви на туберкулоза варират. Това се дължи на мястото на раната, и вирулентността на микроб резистентни микроорганизми. Хората най-често на белия дроб, туберкулоза, но туберкулозата
могат да бъдат засегнати от всяка тъкан (кост, г. бъбреците, ставите, очите, и така нататък.).
Туберкулоза обикновено е хронично заболяване, но в случай на проникване на първичната лезия в кръвта на големи количества Туберкулозните бацили отнема остра милиарна форма.
симптоми на туберкулоза (повишена температура, загуба на тегло, и така нататък. Н.) се дължат на факта, че тялото на туберкулозните поражения падне токсични продукти, произведени от Туберкулозната бактерия.
Туберкулин. ТБ микроби съдържат протеин вещество - туберкулин, което първо се получава чрез Koch. Има няколко лекарства туберкулин. Kohovsky стар туберкулин (alttuberkulin) - ясно, тъмнокафява течност - филтратът се стерилизира убит 6-8 седмици на културата за нарастък бацили глицерол бульон и се изпарява до обем от 110 на водна баня. Филтратът, съдържащ отпадъци от Екстракти и Mycobacterium туберкулоза. За разлика от микробните токсини туберкулин, че има само един токсичен ефект върху организма и туберкулозен пациент не оказва влияние върху здрави. Туберкулин широко се използва за диагностициране на туберкулоза, използвайки реакциите и Манту Pirquet (алергична реакция). Водоразтворими протеини Туберкулозните бацили са алергени и причиняват алергично състояние.
Примерен Пирке. В третираната кожа с етер или бензин ръка прилага три повърхност обезобразяване (специално borchikom или ланцет). Трябва да се избегне появата на кръв. В две от тях се прилагат на капки туберкулин, третият (контрола) - капка 0.5% разтвор на фенол. При положителна реакция, където туберкулин прилага чрез 12-24- четиредесет и осем часа се появява хиперемичната пъпка с бъркалка. Контрол обезобразяване с правилна техника не може да открие реактивни явления.
Манту тест. Тази реакция се определя, строго интрадермално инжектиране на 0,1 мл разреден 1: 1000 туберкулин. Реакцията се извършва най-добре на предмишницата. Кожата се фиксира под лявата ръка и се добавя иглата на спринцовката
успоредно на повърхността на дебелината на кожата. Счетоводен реакция продукти след 48 часа. Появата на папули на мястото на инжектиране, най-малко 10 mm в диаметър показва положителен резултат.
Наскоро получаване на пречистен протеин (PPD) се използва за тези реакции.
Имунитет. В човешкото тяло има определена степен на вродения имунитет към туберкулоза. Това се доказва от клинични наблюдения, според които инфекцията на туберкулоза в ранните години, завършващи на възстановяване сред големи маси от населението. В основата на имунитета на туберкулоза са промени в клетъчните реакции.
Mycobacterium туберкулоза за дълго време да остане жизнеспособна в фокусите (подутини), което води до така наречената "нестерилни" или "инфекция" имунитет.
Въпреки това, някои от възрастното население остава без ранна инфекция TB. Тези хора могат да бъдат основната форма на туберкулоза, особено влошаването на материал и условията на живот. Ето защо, специфична превенция на туберкулозата е важно не само за децата, но и за възрастни. Серумът на туберкулозни пациенти намерено аглутини, pretsipitiny, лизин, и допълва фиксиране антитяло.
Въпреки това, тези антитела в механизма на анти-TB имунитет не са от значение.
Микробиологична диагноза. Микробиологична диагноза е за откриване на туберкулоза заболяване при хора и животни, за установяване на туберкулоза микроби в храни (например, мляко, сирене) и околната среда (например, прах). Лабораторни изследвания подлагат храчки, гной, урина, гръбначно-мозъчна течност, изпражнения, и така нататък. D. В допълнение, за да се проучи присъствието на Mycobacterium туберкулоза при пациенти, приемащи стомашни промивки и бронхиална слуз от гърлото (слуз премахване специален тампон).
Слюнка за туберкулоза бацил се извършва от намазка, получаване на чисти култури на опитните животни и замърсяване. Слюнка лекарство получава и оцветени му Ziehl-Nielsen. В този случай, на син фон може да се види
полиморфна рубинено червен микобактерии. Nondetection туберкулоза пръчки само чрез внимателно проучване на цветен продукт не изключва наличието в тяхната слюнка разследван. В такива случаи се прибягва до метод натрупване.
Този метод е както следва. Слюнка се смесва с равен обем или двойно antiformina (смес разтвор Natrii hypochlorosi и NaOH) и енергично се разклаща, след което се оставя да престои в продължение на 15-30 минути до пълно хомогенизиране. Освен това, всички клетъчни елементи и разтворими странични микроби и бактерии туберкулоза поради тяхната алкално-устойчиви съхраняват. Хомогенизираната храчките се центрофугира, утайката се неутрализира с 30% оцетна киселина и от намазки са готови, които обикновено се оцветяват с Ziehl-Neelsen.
На практика той е влязъл метода на флотация. Слюнка се събира в продължение на 2-3 дни, и към нея се прибавя равен обем от 0,5% NaOH и се разклаща в продължение на 5 минути. Тази смес се нагрява в продължение на половин час при 58 ° във водна баня и се изсмуква от дъното на необработените примеси чрез пипета, последвано от добавяне на 0,5 г 1-мл ксилол и се разрежда до 200 мл с дестилирана вода. Цялата тази смес се разклаща, постоянната 15- 30 минути, и образуваната горния пръстеновиден белезникава пяна слой, който постепенно се аспирира с пипета на Пастьор и се прехвърля в стъклен слайд. От този материал подготвен цитонамазка. Последно се суши при 60-65 °, обезмаслена с етер, се фиксира на пламъка и се оцветяват с карболфуксин фуксин последващо избелване алкохол 3% солна киселина и пикринова киселина или оцветяват с метиленово синьо.
В случай на отрицателен намазка прибягва до бактериологично метод, който сега се е превърнало осъществимо.
Преди сеитба на третирани храчките следва. Слюнка се смесва с двойно обем на 6% разтвор на сярна киселина, убива всички бактерии с изключение на киселина, след това утайката се събира чрез центрофугиране и се промива 3 пъти чрез центрофугиране сярна киселина със стерилен физиологичен разтвор. Промитата пелета се пипетира в 5-8 тръби със средата и добре втрива в среда повърхност линия. сеитба съхраняват
в термостат 6-8 седмици. За да се предпази от изсъхване тръба се запечатва чрез парафин: памук щепсел предварително нарязани отвън, се придвижва във вътрешността на тръбата и с Pasteur пипета с гумена колба се пълни с разтопен парафин.
Той предложи няколко методи за ускоряване на бактериологичен диагнозата на туберкулоза. Според Цена, Mycobacterium туберкулоза отглежда в препаратите за намазка. На слайдове получава тест тампони материал се потапя препарати стерилни пинсети в продължение на 5 минути в 10% разтвор на сярна киселина, след това се промива чрез потапяне в стерилен физиологичен разтвор и се потапя във флакони с хранителна среда (1 част кръвта със стерилни + 3 части дестилирана вода). След 7-10 дни, образци се оцветяват по метода на Ziehl-Nielsen и под микроскоп откриване microcolonies - групи от тумор бацили (Фиг 89) във формата на пакети..
EA Shkol'nikova разработи метод за посев дълбоко в кръвния серум. Същността му е, както следва. Патологична материал (слюнка, гной вискозна) се обработва с 08/10/12% разтвор на сярна киселина и се центрофугира. Утайката се промива два пъти (с центрофугиране) със стерилна дестилирана вода и се инокулира с контур на 3 епруветки, съдържащи 5 мл специална среда (цитратна човешка кръв, заек или овце, преди сеитба разрежда с дестилирана вода на 1 2, 1 3). Засяването направи дълбок кръв среда. Parafiniruyut тръби и се поставят в термостат при температура 37-38 ° в продължение на 7-10, и в случай на забавяне на растежа при 15-20 дни. Съдържанието на епруветките (всеки път тръба тестван отделно), центрофугират и утайката се промива един път с дестилирана вода. Седименти да намазки оцветяват с Ziehl-Nielsen и се изследват под микроскоп.
Ако материалът трябва да се тества, не съдържа чужди микрофлора (цереброспинална течност, серозни ексудати и други подобни. Г.), това веднага без предварителна обработка със сярна киселина, средата се инокулира върху кръв.
В допълнение към тези методи, да се използва и биологично изследване на храчка. За тази цел около 1 мл от храчки прилага морско свинче, за предпочитане под кожата в ингвиналната гънка. Животните могат да умрат преждевременно, ако храчките са вирулентни стрептококи и пневмококи. Следователно слюнка се обработва, както следва. Основно това се разклаща в стерилна буркан с мъниста чрез добавяне на 2-5 мл физиологичен разтвор и се нагрява във водна баня при 58 ° (не по-висока от 60 °) за 5-8 минути. Преработката се извършва със сярна киселина, както и за засаждане, с тройна промиване с стерилен физиологичен разтвор. След тази обработка, утайката се разбърква в малък обем на физиологичен разтвор и се прилага на морски свинчета подкожно в ингвиналната гънка или феморалните задните крака. В рамките на 3 седмици, след като регионалната ракът се увеличи значително. По това време, един от възможните vyluschit жлези и се подлагат на изследване за наличие на туберкулоза бактерии в намазки и раздели. Възможно е също така чрез пробиване тези жлези и микроскопия за откриване точковидна нарастък бацил.
Морските свинчета трябва да бъдат наблюдавани в продължение на поне 3 месеца, след което те биват убити за следкланичен преглед. В положителни случаи открива милиарна туберкулоза.
При изследване на урината за туберкулоза бактерии избегне контакт пръти взети смегма стерилна урина (катетър) след обилно промиване на проход. За микроскопско изследване се изисква ежедневно проба от урина за бактериологично - Добро утро. Получената утайка чрез центрофугиране беше разгледано по конвенционален начин. За да се различава от външни киселина бацили да произвеждат култура и доставят биологична проба.
Изследване на цереброспинална течност се извършва както следва: тръбата с прясно приготвен бистър и безцветен разтвор се оставя при ледник около 24 часа. В случай на образуване на това време, тънък и деликатен филм (т.нар платна), течността се излива бавно и внимателно върху предметно стъкло, косо в стъклена чаша. "Госамър" е необходимо да се забави платинена игла и не я даде плъзга стъклото с ток от течност.
Plenochku разпределени върху стъклото се суши в пещ, е фиксиран (за предпочитане алкохол-етер), оцветени с Ziehl-Neelsen и mikroskopiruyut. Ако Mycobacterium туберкулоза петно ​​няма да бъдат открити, трябва да настроите експеримент с инфекция на морски свинчета.
Специфична предотвратяване на туберкулоза се извършва чрез имунизация на детски групи с BCG ваксина (BCG съкращение Bacille Calmette Guerin). Тази ваксина получи Calmette и Guerin, които в продължение на 13 години култивирани причинител на туберкулоза на картофи глицерол с добавянето на жлъчката. В резултат на тази култура е толкова загуби своята вирулентност, изглежда безвредно за животни, дори и в големи дози. Prizhivayas в организма като създаване Mycobacterium туберкулоза огнища безвреден и поради това не е стерилен имунитет при туберкулоза.
Общи мерки за борба с туберкулозата. Туберкулоза и сифилис са инфекциозни заболявания, които са ясно обозначени социален характер. В капиталистическото общество, в което клас принадлежност определя сигурност живот, за пролетариата, за да създадат благоприятни условия за туберкулоза.
Основни дейности в борбата срещу туберкулозата у нас намаляват до подобряване на условията на труд и живот и превенция, базирани на ранно откриване на туберкулоза, откриване на бактериологично, общ медицински преглед, балнеолечение и активна имунизация.
Лечение на туберкулоза се произвежда успешно използване стрептомицин, Pask, ftivazida, tibona и туберколостатичния средства, действащи на микобактериите, които са устойчиви на тези основни лекарства - циклосерин, канамицин, рифампицин и други.