Методи за изследване на метаболизма - практически умения педиатър

Видео: Училище ветеринарен ендоскопия Karl Storz

безопасност на кислород при работа с кислород: видео

ИЗСЛЕДВАНЕ НА ВОДА ЗА ОБМЕН

обмен на вода е тясно свързана с обмен на други вещества, и преди всичко минерални и протеин. Вода - на базата на всички телесни течности, там се разтварят соли, вещества от органичен и неорганичен характер. Чрез този обмен се осъществява между активните клетките и междуклетъчната течност. метаболизъм вода изследване е важно за много състояния и заболявания на детето.
За обмен на вода нарушения доказва чрез появата на оток, суха кожа и лигавици, жажда и други симптоми. Естеството на нарушенията обмен превръща klinikolaboratornymi изследвания.
Воден баланс. В рамките на разследването на водния баланс се взема предвид количеството на водата пиян или приета с течната храна и се извлича с урина, изпражнения, в издишания въздух с течение на времето.

На изпуска течността се съди по размера на дневното производство на урина.
Претеглете детето, ако се прави всеки ден или през ден, той помага да се наблюдава задържане или загуба на течности.
Интрадермално тест McClure - Aldrich. Това дава възможност да се разкрие скрит оток или оточни готовността тъкан.
В стерилна спринцовка туберкулин получаване физиологичен разтвор (0.9% разтвор на натриев хлорид) и 0,2 мл се прилага интрадермално във вътрешната повърхност на горната половина на предмишницата. Най-добрият резултат се получава, ако разтвора за инжектиране води до образуването на "лимонова кора" на папули сайта. Нормалната решение се абсорбира и изчезва пъпка при деца до 5 години за 20-30 мин, 6-13 години - за 40-60 минути. По-бързата абсорбция на разтвора се наблюдава оток на сърдечна, бъбречна или инфекциозен и токсичен произход, пневмония, ексудативна диатеза и други заболявания. Бавно резорбция се случва с обезводняване на организма на детето.

Обемът на екстрацелуларната течност.

Той е на стойност за откриване на скрити отоци, определяне на тежестта на очевидна подуване или определяне степента на обезводняване на организма на детето с чревна токсикоза и други условия, както за метод рехидратация контрол терапия. За определяне на общия обем течност и нейното разпределение сектор предложи редица проби, въз основа на отглеждане на различни вещества. Антипирин, урея, тежка вода, натриев тиосулфат, инулин и т.н. Повечето от тях не са били широко използвани поради сложността на изпълнението, необходимостта от множество огради сравнително големи обеми от кръв или специално оборудване. Най-разпространеният метод е разреждане на натриев тиосулфат.
натриев тиосулфат метод разреждане от J. Е. Veltischevu. Morning гладно дете получи лека закуска и обезкървяват чрез венепункция за определяне на серумната концентрация на калий, натрий, общ протеин и редуциращи вещества. След вземане на проби кръв във вената бавно (при скорост 10 мл / мин) се въвежда 10% разтвор на натриев тиосулфат в размер на 1 до 1,5 мл на 1 кг телесно тегло. Важно е да се отбележи, времето за край на въвеждането на решението, тъй като се приема като нула. След това, за един час на всеки 10 минути от пръст вземат проби 5-6, във всеки от които концентрацията на йодометрично титруване с натриев тиосулфат. Данните се прилага към полулогаритмичната мрежа, която осигурява графично екстраполиране и определя концентрацията на натриев тиосулфат нула време.

Сушене.

Това е най-прост метод за определяне на процентното съдържание на вода в цяла кръв или серум.
Парче от филтърна хартия се поставя в стъклен буркан и се суши при 100 ° С за един час. След това съда се охлажда до хартия, претеглят на аналитична везна и хартията се прилага малко количество кръв или серум. Хартия кръв петно ​​на една и съща банка за пореден път поставя в пещ, където се изсушават за един час, а след това отново се претеглят. Разликата между първия и втория претегляния отразява количеството на сух остатък. Въз основа на изчисленото съдържание на вода в кръвта или серума. Обикновено, в цяла кръв, е 80% в серума - 92%.

Определянето на серумния вода.

Вероятно в предшестващото общия протеин чрез емпиричната формула: вода = серум 98,5-0,0745 В, където В - съдържание на протеин в серум, г / л.
Rapid определяне на кръвни заболявания на хидратация на Dutz. На концентрацията на хемоглобин в еритроцитите варира в зависимост от състоянието на осмотичното налягане на екстрацелуларната течност. Чрез повишаване на осмотичното налягане на средната концентрация на хемоглобина се увеличава с намаляване - намалява.

Изследване на минералната обмяна

Минерални метаболизъм е тясно свързано с вода. За клинична употреба е от голямо значение за наблюдение на обмен на натрий, калий, хлор, калций, магнезий и фосфор.
Натриев. Това е основният извънклетъчен катион: тя представлява над 90% от плазмените катиони. Около 85% от натриеви йони е представена в свободна форма и около 15% от протеина се запазва. Като един от катионите се състоеше в поддържането на алкално-киселинното състояние, нормалната водния баланс и разпределение в тялото на вода, осигурява постоянство на осмотичното налягане на екстрацелуларната течност. Активното транспортирането на Na + йони в клетките от извънклетъчната течност с помощта на "натриев помпа" клетката създава насочено навътре концентрация градиент на натриеви йони, който служи като движеща сила за активен транспорт на калиеви йони, глюкоза и аминокиселини в клетката. Заедно с калиеви йони, натриев стимулира ATPase активност на клетъчно мембранните фракции се стабилизира на симпатиковата нервна система отделя, участва в регулирането на съдовия тонус. Изразено хипо- и хипернатремия предизвика значителни промени в тялото на детето.

Калият.

За разлика от вътреклетъчното катион е натрий. В плазмата и интерстициална течност е 2-5% калиев. Най-богати на калиев мускулна тъкан. червени кръвни клетки калий е 15-20 пъти по-висока, отколкото в плазмата.
Калиев активно участва в редица важни физиологични процеси за поддържане на нормален воден баланс в организма и нормалната осмотичното налягане в zhidkosti- на тъкан в разпределението на вода в тъканите и депозит в регулацията на алкално-киселинното състояние и осигурява нормалното функциониране на невромускулна apparata- в реакции на енергийния метаболизъм и много ензимни reaktsiyah- в биосинтезата на ацетилхолин. Калиев абсорбира през анаболни реакции и се освобождава от разпад на тъкан. Определяне на калий в кръвта (серум и еритроцити) и урината, както и натрий, е важно в exsicosis, сърдечна, бъбречна недостатъчност и други патологични състояния при деца.
За да се установи количеството на натрий и калий се използват химически методи за х-спектроскопия, анализ неутронно-активиране, потенциометрично определяне, пламък спектрофотометрия съдържащи атомна спектрофотометрия емисии, атомна абсорбционна фотометрия и пламък.
Химичните методи за определяне на натриев и калиев труден и по-ниско в точността на физически (пламъчна фотометрия, атомна абсорбционна спектрофотометрия и т.н.). Поради това, те могат да бъдат използвани в тези лаборатории, където никой Пламъчен фотометър.
Определяне на натриев и калиев чрез пламъчна фотометрия. Натриев и калиев се изследва основно чрез пламъчна фотометрия. Методът се основава на измерване на физическата количеството на излъчване на светлина, което се случва под въздействието на високата температура на пламъка в елементите, които отиват в състояние на възбуждане с характеристиката на всеки спектър на емисиите. Като резултат от измерването на това количество се получава стойности отразяват концентрацията на елементи в разтворите.
В плазмата калиев разглежда не по-късно от един час след вземането на кръв. За тази цел могат да се използват водни разтвори на натриев към плазмената разреждане на 1 кръв: 100, за калиев 1:10 1:20 1: 100. Основни и стандартни разтвори се приготвят от двойно прекристализират химически чисти натриеви и калиеви соли на хлорид. Работни стандартни разтвори се получават от средното ниво на калий и натрий в плазмата и разреждането на плазмата се използва (VG Kolb, VS Kamyshnikov, 1976).
калий и натрий в еритроцитите може да се определи по два начина - индиректно и директно. В индиректен метод, изчисляване на разликата между съдържанието на електролити в цяла кръв и плазма, за директно - определяне се извършва директно в еритроцитите. Последният метод е за предпочитане. Хепаринизирана кръв се центрофугира в продължение на 15 минути при 3000 об / мин, горната плазмен слой се аспирира и еритроцити вторичен центрофугиране се провежда за 30 минути при 3000 об / мин. Хемолизирани еритроцити в дестилирана вода и се разрежда 1:20 за определяне на натрий, калий 1: 200
За да се изследва електролитите в урината на дневно количество от него се смесва 15-20 мл. Урината се центрофугира и се разрежда 200 пъти. Работни стандартни разтвори се приготвят на базата на разреждане и междинното ниво него и калий.
За да се конструира дневните калибровъчни криви за различни биологични течности, като се използва опростена версия на фотометър за калибриране пламък предложен VT Barinov (1973). За всяка от биологични течности (плазма, еритроцити, урина) и подготвят основни работен стандартни разтвори. Машината е настроен на стандартен режим на работа последователно преминава работни разтвори за определяне на натрий и калий в плазмата, еритроцитите и урината. Моментно изход криви. Получените криви взаимно следят всеки друг. В достатъчно изпълнява допълнително апарат подравняване само стандартен разтвор на плазмата.
Обикновено, съдържанието на натрий в плазмата е: при новородени 135-155 ммол / л при деца на възраст от един месец до една година - 133-142, от една година до три години - 125. 143, възрастни - 137-147 мг / дл. Съдържанието на натриев на еритроцитите: при деца под една година - 26,5-34,8 ммол / л, от една година до 14 години-15,6-25,6, възрастни - 17,4- 21,7 ммола / L.
Съдържанието на калий в кръвния серум на новороденото е 4,55-6,5 ммол / л, в първата година от живота - 3,8-5,4, по-големи деца - 3.69 - 5.12 ммола / L. Недоносени новородени нива на калий в плазмата варира от 3.8 до 6 ммол / л. Съдържанието на калий в еритроцитите на здрави деца под една година 74,5- 87,1 ммол / л при възрастни - 79,4-112,6 ммол / л. При кърмачета дневно диурезата на 0,009-0,310 г калиев от 1.5-3.5 г възрастни-

Хлор.

Този основен анион екстрацелуларната течност в тялото е предимно в йонизирана състояние под формата на аниони, натрий, калий, калций, магнезий и други подобни. Г. кръвни хлориди се намират предимно под формата на натриев хлорид. Следователно, съдържанието на хлор в кръвта е тясно свързана с натриев, но при патологични състояния могат да Многопосочни отмествания (хипохлоремична алкалоза когато устойчиви повръщане). Хлориди играят важна роля в поддържането kislotnoosnovnogo състояние (между плазмата и червените кръвни клетки), осмотичното налягане (между кръвта и тъканите), водния баланс в организма. Те също са инициатори на амилаза.
Определяне на хлор в утаечни (Аргентометрично) методи, основаващи се на способността на сребърни йони за образуване на хлор с неразтворими соли. Компоненти методи седиментни отлагания са протеин утаяване хлор и неговото взаимодействие с индикатора. Обещаващи колориметрични методи, основаващи се на образуването на оцветени съединения на хлор с тиоцианат живак и живак hloranilatom. Получава се, използвайки методи разпределение потенциометрични йон-селективна електроди за хлор.
Определяне на метод хлор merkurimetricheskim. Този метод за определяне на хлор в серум, урина, гръбначно-мозъчна течност, проведено като се използва като индикатор difenilkarbazona. Методът се основава на следния принцип: в излишък на еквивалент точка живачен нитрат форми комплекс с индикатор, който е оцветен в синьо-лилав цвят. Чрез нитрат разтвор консумира количество живак се определи концентрацията на хлор.
Техника определяне хлор по този метод, е както следва. Към 1.8 мл дестилирана вода се прибавя 0,2 мл от изследваната биологична течност, индикатор 4 капки (100 мг difenilkarbazona в 100 мл 96% етанол) и сместа се титруват с живак нитрат (2 г живачен нитрат, 200 мл дестилирана вода, 20 мл 2N . HNO3, до 1 л вода) в 2 мл пипета или микробюрета до цвят синьо-виолетов. За да се стандартизират разтвор живак нитрат в 2 мл стандартен разтвор се прибавят 4 капки индикатор и се титрува с живак нитрат, като в експеримента. Изчисленията се правят по формулата
0.02 * A * 5 • 1000 A * 100
ммол / л

0.02 където - количеството на хлор в 2 мл стандартен разтвор на натриев хлорид, mmol- 5 • 1000 - коефициент на базата на 1 литър биологичната zhidkosti- А - количеството живак, нитрат, консумирана за титруване в opyte- В - количеството живак, нитрат, консумирана за титруване стандартен разтвор на натриев хлорид, мл.
Съдържанието на хлор в кръвния серум на деца от всички възрасти е същата като при възрастни - 97-107 мг / дл. хлор еритроцитите, съдържаща почти 2 пъти по-ниска, отколкото в плазмата, - 50-58 ммол / л. Съотношението на плазма на еритроцитите хлор хлор при деца е 0,48-0,52, 0,42-0,50 възрастни, съответно. Когато тази цифра се увеличава ацидоза, алкалоза, когато намалява.
Количеството на отделянето на урина от хлор варира с възрастта. Новородени (1-2 седмици) той е 0,68-1,71 ммола / ден при деца на възраст от 2 седмици до 2 месеца до 2-6 месеца до 3.42 1,73-3,42- -8,55- 6-12 месеца, за да 8,55-17,1- от година на 2 години - 17,1-85,5- от 2 до 10 години - 10-14 години-65-171- 137 210 е в възрастни- 170- 210 ммола / ден.

Калций.

В различни тъкани, съдържащи вътреклетъчно и почти изключително под формата на разтворими протеинови комплекси. Само в костната тъкан, състояща се от до 97% от калциеви запаси в тялото, това е най-вече под формата на неразтворими включвания извънклетъчната хидроксиапатит. Калций в кръвта, съдържаща се в образуваните елементи и плазмата. Между плазмата и оформени елементи се разпределя неравномерно. Червените кръвни клетки съдържат около 0.249 ммола / L, около 1 leykotsity- -1.25 ммол / л. В нивото на серум (плазма) на калций е значително по-висока.
Като цяло, калций, съдържащи се в серума (плазма) кръв, има следните фракции: 1) nediffundiruyuschy (nedializiruyuschiysya, колоиден) калций, протеин-свързан (предимно албумин);

1. дифузия (диализира, ултрафилтриран) калций, който от своя страна се състои от йонизиран и свързани хидрогенкарбонат, калциев цитрат и други аниони. Физиологична активност е йонизиран само калций, приблизително 50% от общото количество на калций в кръвната плазма.

Спектър калциеви различни физиологични действия: калциев намалява способността на тъкан колоиди свързва вода, променя пропускливостта на мембраните (особено натрий и калий) - участва в процесите на образуване на кости и съсирването на кръвта, за поддържане на баланс и osnovaniy- киселини засяга невромускулната възбудимост (повишена симпатикова тон нервна система) за синтеза и разграждането на АТР и ATPase активност в митохондрии на клетки и миозин, скоростта на освобождаване на хормони задната хипофизата и мозък nadpochechnikov- измеримо nyaet размер на синтеза и разграждането на гликоген в мускулите, стимулира сърцето.
Показан калция в урината, жлъчката и фекалиите. В изпражненията съдържат главно калциеви съединения, не абсорбираната червата. Калциев екскреция при деца варира от 0.5 до 4 ммола / ден (10% калциев прилага с храна), 99% от калциев настоящето в гломерулна филтратът се реабсорбира в бъбречните тубули.
определяне калций в пламък фотометър не е широко разпространена, като калиев или натриев, тъй като изисква по-високи температури и е до голяма степен зависи от присъствието на други електролити в серума.
За определяне на калций в кръвния серум се използват Комплексометричните методи. Както се използва комплексон динатриева сол на етилендиаминтетраоцетна киселина (Трилон В, комплексон III, helaton III, Versene), и като индикатор - murexide, калцеин и други.
Определяне на метод серумния калций титриметрия използване murexide. Методът се основава на следния принцип: murexide форми с калциеви йони в алкална среда комплексно съединение оцветени в червено-лилав или розов цвят (в зависимост от концентрацията). Когато титруване силна комплексен агент, този комплекс се унищожава, както и свързаната с murexide наскоро освободена придобиване на пълен цвят (лилаво или бледо лилаво).
конична колба се въвежда 50 мл дестилирана вода, 0.4 мл 9N. разтвор на NaOH и се прибавя няколко зърна murexide. Се появява бледо лилаво оцветяване. Пробата се разделя на две: стандарта и експериментално. За изследвана проба се прибавя 1 мл серум се появява бледо розово оцветяване поради образуването на калций mureksidnogo комплекс. Разтворът веднага се титрува комплексон III (0665 грама комплексон III в 1 л дестилирана вода) за връщане на цвета на индикатор бивш (сравни със стандарта). Изчисляване на кривата на калибриране са съгласно формулата или C (мг%) = = 7,2X мл количество, необходимо за титрува комплексообразуващ агент. За експресия в милимола за литър на получената стойност се разделя на четири.
Обикновено, колебанията на общия серумен калций са малки: Преждевременно деца с (2,06 ± 0,025) ммол / л, новородени и кърмачета, 1,87-3,46, по-големи деца - 2,49-2,86, възрастен - 2,04-2,89 ммол / л.
При патологични състояния, хиперкалцемия среща в хиперпаратироидизъм, хипервитаминоза D, болест на Адисън, синдром на Кушинг -. Синдром на Кушинг, акромегалия, сърдечна недостатъчност, жълтеница и др наблюдава, когато spazmofilii хипокалцемия, рахит, бъбречно заболяване, хипопаратироидизъм, целиакия заболяване, панкреатит, и др.

Видео: 1MSN Корекция на хемостаза Галстян GM

Фосфор.

Това е основният вътреклетъчен анион. Гръбнакът съдържа 70-85% от общото количество на фосфор в кръвта - 0.2%. Пълна кръв фосфор представлява киселина и киселинни неразтворими фракции. Структурата на киселина неразтворим фосфор включват фосфорни фосфолипиди и протеини или нуклеинови фосфор. Съдържанието на богатите fosfatesterami клетките krovi- на това съединение в плазмата е ниско. В плазмата (серум), разтворим в киселина фосфор фракция представена главно неорганични фосфор, която има предимно в йонизирана форма.
Фосфор-съдържащи вещества се екскретират в урината. фосфор екскреция в урината се увеличава с възрастта: в новородени - 0.064 ммола / ден, в една или две години - 6,4-16, до 14 години - 32-48 мг / ден. За анализ, е необходимо да се вземат пресни, добре смесена урина, при престояване от своя страна фосфор се утаява като фосфати.
За определяне на неорганично фосфорно предложен спектрофотометричен, колориметричен, plamennofotometricheskie, Комплексометричните методи.
Определяне на фосфор молибденова киселина. Въз основа на взаимодействие с фосфорен молибденова киселина, при което се образува фосфомолибденова киселина, която в присъствие на излишък от молибдат, фосфомолибденова възстановено на комплекс (молибден синьо). Интензитетът на цвета е право пропорционална на концентрацията на неорганичен фосфор.
Кръв за изследванията на неорганичен фосфор трябва да се приема на празен стомах и веднага се отдели серума (плазма) от еритроцитите. Изследването трябва да се извърши не по-късно от два часа след приема на материала. Серумът не трябва да се хемолизи.
За определяне на 1 мл серум се смесва с 4 мл дестилирана вода и 5 мл трифлуороцетна киселина. След 10 минути пробата се центрофугира. Към 5 мл от центрофугирането се прибавя 1 мл амониев молибдат (5% разтвор на 5N. Сярна киселина), 0,2 мл eykonogena разтвор и 1,8 мл дестилирана вода. Количеството на серум може да се намали до 0.5 мл, съответно, намаляване на обема на всички реагенти.
А eykonogena разтвор: I) киселина 6 Натриев сулфит се разтваря в 20-25 мл вода се прибавя 0,1 гр eykonogena- 2) 1,2 г безводен натриев сулфит се разтваря в малко количество вода. Двата разтвора се смесват и обемът се довежда с вода до 50 мл.
След 20 минути на пробата спрямо контрол kolorimetriruyut
10 мм клетка на червена светлина филтър. Контрол даде като опит, но вместо вземе центрофугиране 2.5 мл трихлороцетна киселина и 2.5 мл дестилирана вода. Изчислението е направено на крива.
Обикновено серум неорганична съдържанието на фосфор в новороденото е 1.94 ммол / л (1,13-2,78 ммол / л) при деца - 1.61 (1,29- 2,26), преждевременно 1 , 94-2,91 ммол / л. С възрастта, нивото на неорганичен фосфор се намалява, достигайки до 14 години 1.4 ммол / л (1,13-1,78 ммол / л) - възрастни - 1.29 ммол / л (0,97-1,61 ммол / л ).
Хиперфосфатемията среща в бъбречна недостатъчност, хипопаратироидизъм, диабет, левкемия, големи дози витамин) spazmofilii и сътр. Хипофосфатемия наблюдаван с рахит, продължително лечение с инсулин, калциев хлорид и други.
Важно за диагностика има съотношение на калция и неорганично фосфорно в кръвта. Обикновено децата Ca / съотношение Р е 1.9-2. В рахит го увеличи до 3 или повече.
Привеждане изпълнение на SI единици. Доскоро повечето метаболизъм показатели електролит изразено в процента милиграма (мг%). Във връзка с преход към едно измерване на Международната система единици (SI) сега концентрацията на електролити се изразява в милимола за литър (ммол / л).
Даваме формула превръщане концентрация електролити на милиграм процента в милимола за литър с обща формула:

За моновалентни йони, 1 ммол / л = 1 милиеквивалента / L натриев (атомно тегло 23):

обща формула мг / 100 х 0,435.
Калиев (атомно тегло 39):

обща формула мг / 100 х 0,256.
Калций (атомно тегло 40):

обща формула мг / 100 х 0.249.
Магнезий (относителна атомна маса 24, валентност 2):
обща формула мг / 100 H0,411.
Хлор (35.5 атомно тегло):

обща формула мг / 100 X 0282.
* 4.
Неорганичен фосфор (емпирична формула): ммол / L = мг / 100 X 0323.
Неорганична сяра (емпирична формула): ммол / L = мг / 100 X 0312
Протеин (като аниони) ммол / л = г / 100 X2,46.

Методи за строителни монограми.

 Ionograms отразява съотношението на аниони и катиони в биологични течности, което позволява бързо и надеждно навигация нарушенията на електролитния и алкално-киселинното състояние (CBS). Това създава мост между баланс електролит и CBS. Плазмените (серум) съдържа нормален 153 милиеквивалента / л катиони и 153 милиеквивалента / л на аниони (или в милимола за литър), както е показано на фиг. 54. Поради факта, че сумата от положителни и отрицателни йони са равни, плазмата е електрически неутрален. Както се вижда от фигурата, ако остатъчните анионите в нормални граници, на Na + - C1 = BB (база буфер). Остатъчни аниони се определя чрез изваждане (S1_ + BB) от сумата на катиони.
Метаболитна ацидоза Na + -С <  — 42 ммоль/л, при метаболическом алкалозе Na+ — — Cl >42 ммоль/л.
От ionograms види дали хиперхлоремична ацидоза присъства (синдром дисталните тубули) или хипокалиемичния алкалоза (причинена тежко повръщане или назначаване твърде големи дози натриев лактат или карбонат и с декомпенсирана цироза с ацидоза), хиперкалемични ацидоза (бъбречна недостатъчност) или хипер или хипо elektrolitemiya. В същото време, можете да се съди за наличие plazmonormotonii, plazmogipotonii или plazmogipertonii.

Fig.54. Ionograms плазма от Gamble.