Изследване на функцията на щитовидната жлеза

Щитовидната жлеза дисфункция е един от най-често срещаните форми на патология, срещани в клиничната практика. Поради износването на клиничните прояви на някои заболявания на щитовидната жлеза, компетентен клиницист трябва да бъде в състояние да изберете точно диагностичен кабинет (или изследвания) е най-подходящ за потвърждение, потвърждаване на диагнозата или изключването на заболяването. В днешно време, в епохата на съвременни диагностични и лечебни средства, лекарят може да бъде в някои трудности при провеждане на рационалния избор сред арсенала на наличните тестове. Целта - описание на наличните в момента диагностични тестове на функцията на щитовидната жлеза (виж Таблица 1 ..) и обсъждане на тяхното използване в клиничната практика.

Определяне на нива на хормони на щитовидната жлеза и други йодирани съединения кръв и оценка на техния транспорт

Определяне на общата концентрация на Т4 и Т3 в серум и оценка на техните свободни фракции стомана дълго време е най-често срещаните диагностичните методи в thyroidology, които обикновено се използват за оценка на щитовидната жлеза-зависим (т.е., поради влиянието на хормони на щитовидната жлеза), ниво на активност на метаболитни процеси. Този подход е разработен чрез използването на прости, чувствителни и специфични методи за измерване на концентрацията на йодотиронини, както и поради липса на специфични методи за определяне ин виво директни метаболитни ефекти на хормони на щитовидната жлеза. Предимствата му са необходими, само малък брой кръвни проби за теста и голям брой измервани параметри, както и по отношение на наличието и лекота на изпълнението, която ви позволява да учи в лабораторията на нормален работен ден.
щитовидната жлеза е основен източник на йод-съдържащи биологично активни съединения или техните прекурсори. Нормални серумни концентрации са показани в таблица. 2. Трябва да се отбележи, че концентрацията на всяко вещество зависи не само от синтезира и секретира от щитовидната жлеза на системната размера на движение, но и на специфичен афинитет на съединенията към протеинови носители, тъканно разпределение и скорост на разграждане на окончателно освобождаване.

Таблица. 1. Най-често се използва в клинични диагностични изследвания на щитовидната жлеза.

1 в клиничната практика се използва рядко
2 е почти никога не се използва в съвременната клиника, въпреки че на разположение

Основните продукти, секретирани от щитовидната жлеза в системното кръвообращение, - тироксин (Т4), и след това в низходящ количество - трийодтиронин (Т3) и обратен трийодотиронин (Pt3). Тироксин и трийодтиронин най-голяма проявяват биологична активност ин виво, включително, когато се прилага екзогенно. Те са синтезирани и депозирани в колоидна фоликуларен щитовидната тиреоглобулин като част от молекула, протеин, който след това се хидролизира с йодотиронини освобождаване (в която Т4 е 10-20 пъти по-голяма от Т3). При нормални условия, само малки количества от тиреоглобулин попадат в tsirkulyatsiyu- в моларно съотношение те правят най-малко количество йод-съдържащи компоненти на кръвен серум. Премахването на Т4, тироглобулин, дийодтирозин, и малко количество (ДИ) и monoiodotyrosine (MIT), по-голямата част от всички други компоненти на йодирани серум произвеждат предимно extrathyroidal тъкани по време на последващо дейодиране на Т4. Алтернативен начин на Т4 метаболизъм, съдържащ дезаминиране и / или декарбоксилиране при поддържане на фениловия пръстен на йодни атоми води до образуване tetrayodtirouksusnoy киселина на (Tetrakom или T4K) и 3,5,3`- triiodothyroacetic киселина (Triac или T3K). Циркулиращата кръв йодиран албумин, образуван от неензимно йодиране на плазма албумин в щитовидната жлеза.
Таблица. 2. йод-съдържащи компоненти на здрави човешки серум.

Забележки:
концентрация Serum йодотиронини когато еутиреоидно статут имат значителна вариабилност. Следователно, за да се стандартизира изчисляването на показателите, използвани доверителната граница на нормата при 95% доверителен Гаусово разпределение.
Фигура характеризира със значително намаляване в напреднала възраст.
Възможни грешки при определяне на концентрацията (обикновено надценява истинските стойности) поради кръстосана реакция с сродни съединения.
Малки количества от йод-съдържащи протеини могат да бъдат произведени в периферните тъкани, или серум чрез ковалентно свързване на Т4 или Т3 с разтворими протеини. Въпреки че физиологичната функция на циркулиращите йодирани съединения vnetireoidnogo произход (различни от хормони на щитовидната жлеза), остава неизвестна, откриване на промени в техните концентрации може понякога да има някои диагностична стойност.

Измерването на общата концентрация на хормони на щитовидната жлеза в серума.

йодометрията

Атомите на йод молекули са неразделна част от хормоните на щитовидната жлеза, което ги прави до 65% от общото тегло, и не е изненадващо, че определянето на съдържанието на йод в кръвния серум е първият метод, използван за почти преди 50 години за идентифициране и количествено определяне на хормони на щитовидната жлеза.
Измерване на протеин-свързан йод е най-ранния метод, използван за оценка на концентрацията на тироидните хормони в серума. С помощта на този тест се определя от общото количество йод свързва с плазмените протеини фракция, които представляват 90% от Т4. Опитите за определяне на нивото на хормони на щитовидната жлеза с голяма точност и с по-малко влияние на nonhormonal йодирани агенти са довели до развитието на метода на екстракция и пречистване бутанол йод Т4 чрез колонна хроматография. При извличането на йод бутанол последователно екстракция с подкислен бутанол, и промиване на алкален разтвор води до изолиране на йодотиронини. метод с колонна Т4 измерване позволява да се определи съдържанието на йод в йодотиронин след екстракцията им от серум чрез йонообменна колона хроматография. Въпреки това, в следното всички химически методи за измерване на концентрацията на хормони на щитовидната жлеза в плазмата от проучвания радиоимунологични са заменени, използването на която елиминира влиянието от дори малки количества йод-съдържащи нехормонални вещества.
Йодометрично използва за измерване на съдържанието на йод тиреоглобулин в отделни клинични състояния като вродени дефекти на хормон, когато се приема процес патология йодид органификацията и следователно производството и секрецията на хормони йод.

Методи радиоимуноанализ

Присъстват в нормален серум йод-съдържащи компоненти са лесно определено чрез радиоимуноанализ (RIA). Неговата принцип се състои в оценяване измерената лиганд (S) скорост на реакцията конкурентно взаимодействие и етикетирани (обикновено I131) изотоп аналог (S *), която действа като антигени със специфични антитела - имуноглобулини от клас G, присъстващи в антисеруми (антитела - AT) , Антисерум може да бъде поликлонално или моноклонално съдържа IgG.
Балансът на реакционна маса е предмет на закона. По този начин, при равновесие, концентрацията на S *, свързана с терминала за достъп във формата на комплекс AT-S *, обратно пропорционална на концентрацията на S, образуващи комплекс от най-S при условие, че концентрацията на АТ и S * са постоянни.
AT-S * + (S) = AT-S + S *
Определяне на нивото на радиоактивността на пробите AT-S * или свободен (несвързан антитяло) S * провежда след отделянето им чрез утаяване на антитяло-антиген или адсорбция на свободната лиганда към неутрална среда. Понякога RIA извършва с антитела, прикрепени към твърд носител реагират с S и S * в разтвор. Добавянето на известно количество S се извършва за конструиране на стандартна крива, описваща стехиометрично връзката между концентрациите на AT-S * и S. Тази крива могат да бъдат превърнати в права линия в резултат на математически операции. Отрицателни проби съдържат свободен S *, но не съдържат специфични антитела срещу S * или излишък от S. Чувствителността на метода зависи от афинитета на антитела и специфични свойства на S *. При оптимални условия, чувствителността на метода за определяне на концентрацията на лиганда около 1 стр.
Ефективно производство на антитела, изисква представянето на антигени - йодирани аминокиселини, чрез свързване към албумин или други протеинови молекули или частици. По време на определянето на концентрацията на йодирани аминокиселини трябва да бъде освободен от връзката с свързващ протеин серум, предимно тироксин свързващ глобулин (TSGl), тъй като константи на афинитет на транспортни протеини често еквивалентни константи на свързване с имуноглобулини. изследователски метод включва екстракция чрез конкурентно изместване определя от аминокиселини и инактивиране TSGl. В идеалния случай, се конкурират за свързване до кръстовището трябва да замени йодирана аминокиселина в TSGl, но само малко или въобще да не се намесва в хода на специфичен имунен отговор.
радиоимуноанализ метод позволява измерването на целия серум на нетретираните проби. Въпреки въздействието на нехормонални компоненти на йод практически не се наблюдава, известна кръстосана реакция между свързани, присъстващи в серума на нормални други йодирани аминокиселини, все още съществува. По този начин, притежаващи валидни изследвания изисква избора на антитела, които имат малко или никакво кръстосана реактивност не са. Това е особено важно, когато концентрацията на индикаторния вещество е по-ниска от концентрацията на кръстосано-реактивен синергист. Свързването на имуноглобулини рядко позволява да се диференцира L- и D-изомери на йодотиронини, но това не е от значение в клиничната оценка. Понякога, някои пациенти също йодотиронин антитела присъстват в системната циркулация, което се отразява на RIA провежда в неекстрахираните серумни проби. В зависимост от метода, използван за разделяне на свързаните и свободните лиганди метод, получените резултати могат да бъдат или занижени или завишени в присъствието на такива антитела.
Широка гама от търговски прибори за извършване на такива изследвания, достъпни за повечето методи на АПИ, което го прави подходящ за всички медицински центрове. Модификации RIA техники позволяват измерване на съдържанието на Т4 в сухи проби от малки капки кръв върху филтърна хартия, която е била използвана в скрининг неонатална хипотиреоидизъм.
Първите методите, разработени за измерване на йодирани аминокиселини, като се използва принципа описаната не е включено използването на антитела. Роден суроватъчен протеин TSGl се използва вместо антитела за измерване на нивото на Т4 в серума се екстрахира. Този метод за оценка на конкурентно свързване протеини постепенно се измества чрез RIA.

други методи

Друга група от методи се основават на принципа на анализ radiokonkurentnogo, но не предвижда използването на радиоактивни съединения. Тези методи се основават на използването на лиганд, свързан с ензим, методите RIA са предназначени да заменят. Лиганд конюгиран с ензим в конкуренция с разпознаваеми съединение за сайтове за свързване на антитялото. Количествено спектрофотометрично се извършва чрез оценка на оптичната плътност на разтворите, които се променят след прибавяне на субстрата за ензимната реакция. Проектиран като хомогенни (ензимно амплифицирана имуноанализ технология, EMIT) и хетерогенна (ензимен анализ при използване immunosorbents, ELISA) методи за определяне на концентрацията на Т4. В хомогенен анализ методи не изискват разделяне на свързаните и свободните лиганди фракция, тъй като се осигурява автоматично. Един такъв метод използва ензим, малат дехидрогеназа, която не е активна в свързана форма с Т4. Ензимът се активира при свързване на комплекса ензим с Т4-Т4-специфично антитяло. Има и други модификации, в които активният Т4 комуникира с други ензими като пероксидаза или алкална фосфатаза. Други методи имунни neradioizotopnye използват флуоресценция за определяне на белязан лиганд и радиална дифузия в агарозен гел за разделяне на антитяло и лиганд върху твърда подложка.
Няколко други методи от йодометрично, radiokonkurentnogo анализ и ензимен имуноанализ, предназначени за измерване на Т4 и Т3 в серума и други биологични материали. Те включват газово-течна хроматография, неутронно активиране и двойна идентификационни производни изотоп на хормони на щитовидната жлеза. Въпреки това, в момента тази група от методи се използва изключително за изследователски цели. Модифицирана версия на HPLC дава възможност за разграничаване на D- и L-изомери на йодотиронини.

Общо серум тироксин

Тъй като първото въвеждане в началото на 70-те, Чопра и сътр. високо специфични и чувствителни радиоимунологични циркулиращите нива на радиоимуноанализ оценка тироксин остава стандартния метод за измерване на общия серумен ниво Т4, въпреки че са също често се използва неизотопни методи за анализ. Описаните по-горе методи, никой от които не са в употреба днес включват някои протеин-свързан йод, йод метод екстракция бутанол и измерване на метод Т4-колона или конкурентно свързване метод на протеин. Определяне на нивото на общия серумен Т4 е един от най-честите тестове и често се използва за скрининг на метаболитно състояние, в зависимост от функцията на хормони на щитовидната жлеза. Обикновено, концентрацията на общия тироксин (OT4) при възрастни е в диапазона 5-12 г / 100 мл (64-154 нмол / л). Въпреки че измерването OT4 отразява функционалното състояние на щитовидната жлеза, на голям брой фактори могат да повлияят нивото OT4 без да се променя нивото на базалната метаболизма. Най-честите от тях - тази промяна в концентрацията на тироксин свързващ глобулин (TSGl). Високи или ниски концентрации TSGl със съответно увеличаване или намаляване на концентрацията OT4 не влияят върху степента на базалната метаболизма.
повишена концентрация на естроген по време на бременност или употребата на естрогенни продукти - най-често срещаните причини за значително повишение на серумния като същевременно се запазва eutireoidizma OT4. Серумните нива OT4 почти неоткриваеми в плода, докато през втория триместър на бременността. След неговата концентрация нараства бързо, достигайки високи стойности на възрастни норма през последното тримесечие. Друг остър, но преходно повишаване настъпва в рамките на няколко часа след раждането. ниво OT4 остава по-висока, отколкото при възрастни на възраст от 6 и следващите, свързани с възрастта промени са минимални и двусмислени. В клиничната практика същите нормални нива OT4 приложими за лица от двата пола и всички възрасти над 6 години.
Описани малки сезонни колебания и промени, свързани с географското местоположение на промени пребиваване (голяма височина над морското равнище), ефектът от студ и топлина. Разграничаване ритмични колебания на серумните OT4 2 вида: осцилации, свързани с промените в положението на тялото и истински циркадните трептения. Постурална трептения концентрация тироксин свързващ протеини не се променя концентрацията на свободния Т4
Въпреки, че ниски нива на серум OT4 обикновено се свързва с хипотироидизъм, и високо - с тиреотоксикоза, трябва да се помни, че нивото OT4 не винаги съответства на концентрацията на свободния Т4, който е метаболитно активна фракция (виж по-долу.). концентрация OT4 в серума може да варира от няколко независими механизми: (1) увеличаване или намаляване на получаване Т4, която се наблюдава в повечето случаи на хипертиреоидизъм и хипотироидизъм, sootvetstvenno- (2) промени, дължащи се на нарушения изолира Т4 свързване със серумните belkami- и (3) компенсиращи промени OT4 серум концентрация, причинени от високи или ниски нива на Т3. Условия, свързани с промени в серумната OT4 и тяхното влияние върху метаболитния статус на пациента, са изброени в таблицата. 3.
Таблица. 3. Състояния, свързани с промените в серумните концентрации на общия Т4 и връзката им с метаболитен статус.

Повишени нива на серум OT4 eutireoidizme когато наблюдавани при фамилна disalbuminemicheskoy hyperthyroxinemia - автозомно доминантно заболяване, което се характеризира чрез свързване Т4 предпочитана форма на патологично серумен албумин. Серумните нива на OT 3, обаче, остава в нормални граници и лицето с болестта остане тиреоиден състояние, както се вижда от нормални серумни нива на свободен Т4 и нива на TSH.
Повишени нива на общия тироксин в серума може да се наблюдава в развитието на антитела към тироксин, което е типично за пациенти с тиреоидит на Хашимото или други автоимунни заболявания, а понякога и за пациенти с макроглобулинемия на Waldenstrom, свързани с доброкачествени моноклонални гамопати.
Повишено ниво общия серумен тироксин се случва в присъствието на устойчивост периферна тъкан на действието на хормони на щитовидната жлеза, първо описан Refetoff и сътр. през 1967. Тези пациенти могат да бъдат увеличени щитовидната жлеза (гуша) и редица неврологични смущения, те могат също така да се характеризира с известно увеличение на мобилност поведенчески реакции (хиперактивност). Освен това, в тази патология, за разлика от други състояния или hyperthyroxinemia с нормална метаболитен статус, свободна от серум тироксин също се увеличава. Въпреки това, пациенти с тиреоиден нарушение. Лечението на пациенти с това генетично заболяване, въпреки че рядко води до неподходящо gipertireodizma лечение.
Дисфункция на други органи и системи (netireoidnye нарушения) също могат да бъдат придружени от повишени серумни нива на общия серумен тироксин. Например, бременна anacatharsis също често е свързана с повишени нива на общия серумен тироксин. Когато netireoidnyh заболявания придружени от високи серумни концентрации на общия тироксин, ниво тироксин обикновено се връща към нормалното в рамките на няколко дни или седмици при подходяща обработка на основното заболяване.
Netireoidnye разстройства могат също да бъдат свързани с ниски нива на общия серумен тироксин, особено при пациенти с тежко заболяване и тежки заболявания на вътрешните органи. Въпреки подобряването на общото състояние и последващото възстановяване обикновено общия серумен тироксин се връща към нормалното.
Таблица. 4 показва основните причини hyperthyroxinemia еутиреоидни. Важно е да се своевременно и точно диагностициране на тези условия, за да се избегне излишно и неподходящо лечение.
По този начин, трябва да се подчертае, че нивото на общия серумен тироксин не винаги отразяват тиреоидния статус на организма.
Таблица. 4. основни причини еутиреоидно hyperthyroxinemia (hyperthyroxinemia без хипертиреоидизъм).

Обикновено преходно и се срещат в лека форма.
Вижте. Таблица. 6.
Обикновено в тиреоидит на Хашимото.
Легенда: [Т4] - концентрация на тироксин SvT4I - индекс на свободен тироксин, SvT4 - концентрацията на свободен тироксин, [Ts] - концентрация на трийодотиронин SvT3I - индекс на свободен трийодтиронин, [TSH] - концентрация на тироид-стимулиращ хормон, TSGl - тироксин свързващ глобулин, LSPA - тироксин преалбумин, - повишено ниво -ponizhenny ниво на N - нормално или непроменен ниво

Общо серум трийодтиронин

Серум обща концентрация трийодтиронин се определя чрез използване на метод, радиоимуноанализ. нормален серум концентрация от общия трийодтиронин при възрастни е 80-190 нг / 100 мл (1.2-2.9 нмол / л). Секс разликите са малки, но разлики, свързани с възрастта, са по-изразени. За разлика от нивото на общата концентрация на тироксин в общия серумен T3 неонатална ниска и е около 50% от нормалните нива възрастни. През следващите 24 часа общото увеличение на концентрацията на трийодтиронин, достигайки нива два пъти възрастни и след това бързо намалява през следващите дни до горната граница на правилата за възрастни, който се съхраняват в първата година от живота равнище. Впоследствие, според някои изследователи, децата от ранното детство до късна старост, има постоянен спад в нивото на общия серумен T3.
Може би това е свързано с намаляване на разпространението на повечето netireoidnyh нарушения, отколкото с преки, свързани с възрастта промени в щитовидната функция на системата. При тълкуването на индивидуалното изпълнение относителна srednestaticheskogo граници стандарти трябва да вземат предвид възрастта на пациента. Въпреки че няколко проучвания показват положителна корелация между нивото на общия серумен Т3 и тегло, то също може да бъде свързано с прекомерна сила. Бързо и значително намаляване на общия серумен Т3 може да се наблюдава в рамките на 24-48 часа при пълно гладуване или само при лишаване глюкоза.
Както Т4 в серум T3 свързани с TSGl, макар и с по-малко ненаситеност. Въпреки това, TSGl промени ниво водят до промени в нивата на общия Т3 (но не и свободен Т3). Следователно, както със серум Т4, свободен индекс Т3 може да се определи като се използва същата формула както че при изчисляване свободен индекса на тироксин.
Повечето от страни води до повишени серумни нива на общия Т4 обикновено също се характеризира с високи нива на общия Т3. Така, серумните нива на общия Т3 в тиреотоксикоза обикновено увеличаване и намаляване на хипотироидизъм. Когато общото съотношение на двете държави T3 / T4 увеличава цялостната по отношение на нормалното ниво еутиреоидно. Това увеличение, причинено несъразмерно увеличение на концентрацията на серумния общ Т3 в тиреотоксикоза и по-малък спад в хипотиреоидизъм на общата концентрация на Т4. Следователно, измерването на общия серумен Т3 е по-чувствителен тест за диагностициране на хипертиреоидизъм, и общо измерване на нивото Т4 е по-полезен при диагностицирането на хипотироидизъм.
В някои случаи разликата между нивата на общия серумен Т3 и общия Т4 или непропорционални обратно или насочено (вж. Таблица. 5). При такива обстоятелства, определяне на общата концентрация на T3-предпочитани. Той също така помага да се обясни синдрома на хипертиреоидизъм с нормални нива на общия серумен Т4 и свободен Т3 (Т3 тиреотоксикоза), в която може да се наблюдава увеличаване на концентрацията на свободния Т3 само в някои случаи. При някои пациенти с болест на Грейвс лечение "на хипертиреоидизъм с антитироидни лекарства могат да нормализира общия серумен Т4, но не и на нивото на общия Т3, което води до общо увеличение на съотношението на Т3 обща / Т4. Такива пациенти с предимно тип Т3 predominiruyuschim
базедова болест и общото съотношение Т / общо Т4-голяма от 20 нг / г са по-малко податливи на ремисии. В райони с намалено съдържание на йод, и храна и при пациенти с намалена способност за абсорбиране на щитовидната жлеза йод eutireoidizm може да се поддържа на ниско ниво на серумния общ Т4 и свободния Т4 поради повишена секреция на Т3. Въпреки, че тези промени са рационално обяснение физиологична, няма значима разлика в серума на общия Т4 и Т3 общо при други обстоятелства не е толкова ясна.
Таблица. 5. Условия, които могат да бъдат свързани с разлики в серумните концентрации на общия Т3 (ОТ3) и общия Т4 (OT4).

Забележки:
Артефакти, в зависимост от метода на определяне на хормона в кръвния серум.
Чернодробна или бъбречна недостатъчност, диабетна кетоацидоза, инфаркт на миокарда, инфекция и заболяване с треска, рак.
Глюкокортикоиди, контрастна материя, пропранолол, пропилтиоурацил,
4- - индекс стойности редукция, т - увеличаване на стойностите на индекса, N - немодифициран или нормалното ниво.
Най-честата причина за несъответствие на серумните нива на общия Т3 и общия Т4 - селективна редукция на серумните нива на общия Т3 поради понижено превръщане на T4 в T3 в периферните тъкани. Това намаление е неразделна част от патофизиологични промени в целия netireoidnyh брой на остри и хронични заболявания и пълно или частично гладуване (калории лишаване). В тези условия, нивото на серумния общ Т3 често е по-ниска от тази на пациенти с изявена първичен хипотиреоидизъм. В допълнение, тези лица все още нямат явни клинични признаци на хипометаболизъм. Някои хора имат понижено превръщане на T4 в T3 в хипофизата или периферните тъкани е вродена.
Тъй като основната количество Т3 е образувана от периферно дейодиране на Т4, клиничното състояние или използването на редица лекарства, които нарушават нормалната метаболизма на Т4, T3-ниско ниво (вж. Таблица. 6).
Основната употреба на получените серумните нива на Т3 данни е да се определи тежестта на хипертиреоидизъм и при потвърждаване на диагнозата хипертиреоидизъм предназначен, при която нормален серум Т4 или неговите промени са съмнителни. Освен това, нивата на серумния Т3 могат да бъдат определени за оценка на пациенти с автономно функциониране тиреоидни аденоми, може да възникне, когато т.нар доминантно-T3 токсикоза. Такива пациенти могат да имат нормално или слабо повишена серумна тироид стимулиращ хормон.

Таблица. 8, 6. Ефект на някои лекарства на функцията на щитовидната жлеза

Съкращения: T - 4- uroven- увеличи - намаляват uroven- п - немодифициран uroven- Т4 - tiroksin SvT4 - без tiroksin Te - triyodtironin- TSH - тироид стимулиращ хормон.

В съответствие със съвременните концепции, серумните нива на Т3 не играят роля като индикатор на функцията на щитовидната жлеза или хипотиреоидизъм като индекс на степента на сериозност.
Промени в серумните концентрации TSGl влияят на концентрацията на общия серумен T3, както и от концентрацията на общия Т4. Наличието на ендогенните антитела Т3 може да увеличи общия серумен T3, но в случай на високо TSGl, концентрацията на свободен Т3 остава нормално развитие и хипертиреоидизъм наблюдава.
Цел широко използван заместителни дози Т3 обикновено около 75 мкг / ден или 1 мг / кг телесно тегло води до тиротоксично стойности на общия серумен Т3. Освен това, поради бърза абсорбция в стомашно-чревния тракт и относително бързи скорости на разграждане, серумните нива значително варира в зависимост от времето на вземане на кръв по отношение на приемащия хормон.

Определяне на концентрацията на свободните хормони на щитовидната жлеза

Малко количество хормони на щитовидната жлеза циркулира в кръвта в свободна форма, не е свързан със серумните протеини-носители. Налице е термодинамично равновесие между дифузия, свързани с хормон и хормон фракция в състояние да прониква клетъчните мембрани и да повлияе на функцията на периферните тъкани клетки. Въпреки промените в серумните нива на протеини gormonsvyazyvayuschih влияние както на общата концентрация на хормон и съответната свободна фракция на циркулиращите хормони в eutireoidizme абсолютна концентрация на свободен хормон остава постоянна. Тези данни са в съответствие с теоретичната концепция на прехвърлянето на хормони от кръвта в тъканите. свободен концентрация хормон в серум корелира с нивата тъкан хормон и метаболитен статус. Тази концентрация е може би най-важният параметър при оценката на функцията на щитовидната жлеза, тъй като тя е пряко свързана с метаболитния статус на пациента.
С няколко изключения, висока концентрация на свободни хормони в тиреотоксикоза е нисък при хипотиреоидизъм и при нормално eutireoidizme TSGl дори когато концентрацията при условие, че пациентът е в компенсирано състояние. Трябва също да се отбележи, че концентрацията на свободния Т4 може да е нормално или дори по-ниска при пациенти с пациенти T3-доминиращи и токсемия, като фармакологични дози от Т3. Понякога концентрация на свободен Т4 може да е извън нормата при липсата на явни нарушения на щитовидната жлеза зависи метаболитен статус. Това често се наблюдава при тежки netireoidnyh заболявания, при които може да има високи и ниски нива на свободен Т4. Когато тиреоиден състояние се поддържа T3 назначаване или преобладаващо секреция T3, нивата на свободния Т4 е също намалява. Пациентите с много netireoidnymi заболявания имат ниски нива на свободен Т3. Това намаление е характерно за всички състояния, свързани с ниски серумни концентрации на общия Т3, причинени от намалена превръщане на T4 в T3 в периферните тъкани. Тъй като нивото на свободните Т4 и Т3 може да излиза извън граница на нормата при пациенти, приемащи множество лекарства. Значително нарастване на концентрациите както на свободните Т4 и Т3 в отсъствието на типичен за хиперметаболитно пациенти с генерализирано устойчивост на хормони на щитовидната жлеза действие. Концентрацията на свободен Т3 обикновено е нормален или дори повишени в хипо хората, живеещи в ендемични за недостиг на йод. Те имат свободни нивата на Т4, но е нормално или ниско.

Директно измерване на свободния Т4 и Т3 концентрации

Точно измерване на абсолютна концентрация на свободните Т4 и Т3 е технически трудно и доскоро е бил ограничен период от време проучване. За да се сведе до минимум смущения връзка между нивото на свободните и свързаните фракции от тези хормони трябва да бъдат разделени чрез ултрафилтрация или диализа с минимално разреждане и малка промяна в рН или електролит състав на средата. след това със запетая свободни хормони се измерва директно с методи RIA. Този метод е може би най-точно разположение, но малки количества от слабо свързани диализира вещества или лекарствени средства могат да бъдат отстранени от връзка с транспортни протеини и се измерва концентрация на свободни хормони в тяхното присъствие може да не съответстват на свободната концентрация ин виво. Границите са различни стандарти в зависимост от специфичните техники, използвани в различни лаборатории и са в диапазона между 0.8 и 2.7 нг / дл (10-35 пикомола / L).

диализа изотопен равновесие (IPD)

IRD метод за един от най-добрите, за да направи оценка на концентрациите на свободния Т4 или свободен Т3 повече от 30 години. Тя се основава на определяне на съдържанието на T3 или T4, които не са свързани и са в състояние да дифундира през диализна мембрана (диализира фракция - DF). За провеждане на този тест серумна проба се инкубира с следи от белязан (обикновено I) от Т4 или Т3. Означени следи бързо балансиран с подходящ размер на свързан и свободен от ендогенни хормони. Пробата след това се диализира с буфер при постоянна температура, докато концентрацията на свободен хормон от двете страни на диализната мембрана не е балансиран. Df се изчислява от съдържанието на белязан хормон в диализата. Ефектът на радиоактивен йод, присъства като замърсител в количества следите от белязаното хормон трябва да се елиминира чрез цялостно почистване, както и различни методи за утаяване диализира хормон. Нивата на свободните Т4 и Т3 могат да бъдат измерени едновременно чрез добавяне на проби 4 и 3, белязани с 2 различни йодни изотопи. Ултрафилтрация е модификация на диализа. Резултатите са изразени като фракция (или DFT4 DFT3) или процент (свободна%% свободен Т4 или Т3) на съответните диализира хормони и абсолютната концентрация на свободните Т4 и Т3 се изчисляват от общата концентрация на хормон в серума и неговата съответна DF. Типични нормални нива на свободен Т4 при възрастни 1-3 нг / дл (13-39 пикомола / л) и свободен Т3 - 0.25-0.65 нг / дл (3,8-10 нмол / л).
Получените с помощта на тези методи резултатите са сравними с резултатите от определяне чрез директни методи, но този метод е приемливо за ясно разграничаване е много ниска или много високи концентрации TSGl и се прилага в присъствието на циркулиращ свързващ протеин инхибитори. Измерените Fs могат да повлияят на температурата, при която се оценява степента на разреждане, периодът от време за началото на равновесие и състава на течност за разреждане. Изчислено обем зависи от точността на измерване на общия Т4 или Т3 може да бъде досадно и при пациенти с антитела към Т4 или Т3.

двустепенен имуноанализ

В тази оценка свободен хормон екстрахира чрез първата връзка със специфични антитела (първи етап) - антитела често фиксиран върху полимерна подложка. След промиване, белязаните следи от хормони, които се свързват към незаети области. Концентрацията на свободното хормон е обратно пропорционална на сумите следите от хормони, свързани с антитела и неговите нива се определят чрез сравняване със стандартна крива. Стойностите, получени по този метод, са сравними със стойностите, получени при използване на директни методи. Този метод е най-значимите в присъствието на циркулиращ инхибитори и свързващи протеини в серуми на пациенти с болести netireoidnymi.

Измерване и оценка на свободния Т4

Най-добрият начин за измерване на щитовидната зависим метаболитен статус - измерване на свободния Т4 в серум от равновесна диализа. С този метод за свободен ниво Т4 не се влияе от промените в концентрацията на свързващи протеини или netireoidnye разстройство. За съжаление, методът на равновесна диализа е доста скъпо и обемисти и следователно не се използват като рутинна. Търговски комплекти за определяне на нивото на свободния Т4 често използвани имунологични методи, но тяхната надеждност е по-малко от оптималното, тъй като те могат да се променят в заболявания или значителни промени в концентрацията на свързващи протеини. По този начин, клиничното използване на свободните измервания Т4 чрез всички методи могат да бъдат ограничени.
Въпреки, че щитовидната зависими метаболитен статус е най-добре отразява в нивото на свободния Т4, от клинична гледна точка е адекватна оценка (или индекс), свободен Т4 (IST4). свободен индекс Т4 се получава чрез екстраполиране на серумните нива на общия Т4 до определено ниво TSGl индиректен метод. Серумните нива TSGl определени от един от двата метода, един от които се нарича свързващия тест на хормони на щитовидната жлеза (ТС), и от друга - свързване тест t3 (T3TS). свободен индекс Т4 (IST4) се изчислява от съотношението на общия Т4 и Т4 или TS и изчисляване T3TS. Стойността на TS е право пропорционално на нивото на TSGl серум, докато стойност обратно пропорционална на нивото T3TS TSGl. Получените с помощта на тези методи резултатите са ценни с това, че различията в нивата на серумния TSGl елиминирани и IST4 изчислени точно отразява действителното ниво на свободен Т4. Например, ако се T3TS след IST4 може да бъде изчислена както следва: IST4 = Т4 (измерени T3TS / T3TS средна нормална).
T3TS нормален обхват може да варира в нивото на 25-35% - със средно 30%. Трябва да се отбележи, че значителни промени нива TSGl или наличие на тежки нарушения netireoidnyh могат да доведат до несъответствие между изчислените и измерените нива на свободния Т4.

Измерване на общ и ненаситен тиреоиден хормон свързващ капацитет - общ капацитет на свързване на серум транспорт протеин

Тъй като концентрацията на тироиден хормон в серума зависи от тяхното допускане в същата степен като съдържанието на свързващи серумния хормон протеини, оценката на последното полезни при тълкуването на нива, получени чрез измерване на общата концентрация хормон. Тези резултати могат да се използват за оценка на концентрацията на свободния хормон, което е съществено за диференциация на промените в общия серумните концентрации на хормоните, причинени от промени в концентрацията на свързващи протеини в еутиреоидни пациенти от промени, причинени от нарушения в дейността на щитовидната жлеза, водещи до хиперметаболизъм или хипометаболизъм.

Измерване на нивото TSGl

концентрация TSGl в серума може да се измери чрез оценка на общата им способност да се свързват по време на Т4 насищане, или измерва директно чрез имунологични методи. Въпреки техники насищане предоставят точна информация за общия капацитет на свързване на отделните протеини, те са много тромави и досадно да ги използвате. Същността на метода се състои в отделяне на радиоактивен йод-белязан Т4 транспорт между серумните протеини (TSGl, transtirein и албумин), след това електрофоретично разделени и идентифицирани от конкурентно изместване немаркиран тироксин. Количествата могат да варират в зависимост от условията на електрофореза, по-специално, от вида на използвания буфер и рН. Приетите норми TSGl съдържание за възрастни е 14-27 г / 100 мл серум (180 350 ммол / л). прост метод насищане с помощта на обмен на медиите йон, в сравнение с електрофореза, е на разположение за рутинни клинични изследователски лаборатории.
Имунологични методи за измерване на съдържанието на протеини също са на разположение. TSGl серумна концентрация се определя чрез RIA и по метода на "ракета" имуноелектрофореза от Lowry радиална имунодифузия или ензимен имуноанализ. Друг метод комбинира свързване на хормона с TSGl и имунологични техники. Методи, използвани в търговски комплекти са на разположение за количествено определяне на серум и TSGl използва с различни модификации технически принципи, описани по-горе. Някои използват конкурентни разделяне на радиоактивен белязан хормон йод TSGl между ендогенен и се прибавя към антисерума gormonu- други използват TSGl специфичен серум и Т4 или свързани TSGl белязан хормон като етикет. Абсолютната концентрация при възрастни човешки серум при нормална варира в зависимост от чистотата на стандартите. Истинската Средната TSGl - 1,8 мг / 100 мл (260 ммол / л) от извън 1.1-2.2 мг / 100 мл (180-350 нмол / л) от серум.
концентрация TSGl в серума варира в зависимост от възраст, пол, бременност, както и положението на тялото статус. Определяне на концентрацията на тези протеини в серума на частично подпомага при оценката на значителни отклонения от нормата, както и в вродени заболявания TSGl. В повечето случаи в ин витро тест за свързване тироидни хормони заедно с определянето на серумната концентрация позволява да се оцени OT4 TSGl. Данните могат да бъдат получени от тестови T3TS коефициент, изразен като процент от нормален серум контрол и OT4 образуване индекс TSGl.