Динамика Зависимост тяло адаптивно регулиране по време на образуването на имунния отговор - общо ниво на неспецифична реактивност

5.2. динамика Зависимост тяло адаптивно регулиране по време на образуването на първоначалния имунен отговор UONRO
В по-ранни изследвания ясна връзка е установена между състоянието на адаптация и способността на организма с различни дози антиген стимулиране [Mulik AB, 1992] производство на антитяло. Освен това, в този документ (Глава 2) показва промените на ноцицептивна реактивност придружаващи развитие на реакция на стрес на UONRO. След анализ на получените резултати от изследването, предлагаме използването на мониторинг количества болка чувствителността на организма за оперативния контрол на имунния отговор в животно производство имунни серуми.
Експериментите се провеждат върху 34 зайци са рутинно имунизирани с инактивирани клетки на Pseudomonas pseudomallei. При животни, предварително избран в съответствие с общоприетите критерии за стандартизация, в допълнение, индивидуално определен фоновите стойности PBCH. Хиперимунизиране се извършва чрез конвенционалния схема, състояща се от 4 (на седмични интервали) интрадермални инжекции с нарастващи дози от антиген (10,0 1,0 2,0 5,0 микрона. Cl.) В смес с FCA. С началото на имунизацията, опитните животни се измерват PBCH дневна стойност. Кръвни проби за определяне на специфични антитела се осъществява в ден 7 след имунизация затваряне. Ниво на серумните антитела се открива в RIA.
В резултат на експеримента има определени отношения на изследваните параметри. Първо, пълен имунен отговор с минимална стойност на титъра на антитяло 1: 32 се наблюдава при 11 проби, характеризиращи се с предимно среден UONRO (38.5 + 4.28 V), което потвърждава оптимално дозиране на антигена. Второ, ноцицептивна реактивност в животно, различно от пълноценно имунен отговор в хиперимунизиране, по време на вземането на кръв се е увеличил средно с 12%. Когато тази повишена чувствителност на болка са се стабилизирали на 21-ия ден от началото на имунизацията (ден преди третата инжекция). Трябва да се отбележи, че дневните динамика ноцицептивен реактивоспособност драстично променени веднага след инжектиране (намаляване на чувствителността до 80%) с върнатите стойности на показателя на първоначалното си ниво след 15-20 часа. При зайци, различен производство ниско специфично антитяло (максимална стойност на антитяло титър 1: 16), чувствителност към болка по време на събиране на кръвта е по-ниско по отношение на средното ниво на фона е 6%. Въпреки това, сред животните с висока UONRO (13 животни) този индекс се понижава с 41% от 15.7 до 26.7 + 1.64 + 3.59 V, което показва надеждността на промените в чувствителността на болка (р < 0,02, выгавленной методом Монцевичюте-Эрингене). Такое резкое снижение ноцицептивной реактивности у индивидов, характеризующихся высоким УОНРО, указывает на развитие стресса, связанное с неадекватно высокой антигенной нагрузкой. Напротив, среди животных с низким УОНРО (7 особей) болевая чувствительность повысилась к 21-му дню на 7 %, а к окончанию опыта на 12 %. Полученные данные свидетельствуют об отсутствии стресса у индивидов с низким УОНРО, что, однако, не является достаточным условием для активной антителопродукции без соответствующего антигенного стимулирования.
Обобщавайки резултатите от експериментите, може да се заключи, че производството е стабилно активното антитяло е придружено от незабавен спад в прага на болката като същевременно се гарантира адекватност UONRO антигенен товар. Освен това, прекомерно натоварване антигенен причинява имуносупресия, придружено от рязко увеличаване на прага на болката. Липса на антигенно стимулиране води до постепенно намаляване на прага на болката, която, обаче, няма доказателства за активна immunogenesis. Тези резултати са представени графично на Фигура 21.
По този начин, ние считаме за целесъобразно ноцицептивна реактивност Препоръчваме да следите за оперативен контрол на процеса хиперимунизиране.

Фиг. 21. Динамика ноцицептивен реактивност при зайци съгласно UONRO време хиперимунизиране със средна антигенен товар
Въз основа на установените отношения, ние се опитахме да се прилага препоръчителния подход към разработването на схеми на имунизация с помощта на антигени с имуногенност неизвестен. Необходимостта да се реши този проблем се появява във връзка с началото на работа в Volgogradsky Antiplague изследователски институт за получаване на антисеруми високо titrazhnosti за легионелоза на патоген, която не е използвана преди това като антиген при зайци.
Традиционният начин за разработване на схеми за имунизация на базата на емпирични избор на дози антиген, които причиняват относително повишени синтеза на специфични антитела. От една страна, дозата на антиген трябва да бъде достатъчно, за да стимулира активни имунни клетки и органи, и от друга - не трябва да предизвиква immunogenesis потискане.
Изследванията се провеждат върху 20 зайци, предварително разпределени в три групи съгласно UONRO (7 - високи, 6-7 със средна и - ниско). имунизация започна
Предварително изпитване на предназначени минимална доза антиген имуногенен (1.0 милиарда микрона. Cl.) В три зайци с високо UONRO. Антиген (инактивиран клетъчен L. Филаделфия) се инжектира интрадермално в 10 точки в смес с FCA. Всеки ден след инжектирането при животните произвежда индивидуална идентификация и регистрация на състоянието PBCH адаптация на организма. Ние открихме, че в първите дни след имунизация на чувствителност морски свинчета болка намалява средно с 70% в сравнение с изходните стойности. Едновременно с това, стойностите на индекса за адаптиране говорител показаха липса на патологични изменения на състоянието на адаптация на организма, която се приема, че действа фактор за развитието на общи защитни реакции. Наблюдаваните явления са позволили да се установи адекватността на избрания доза на облъчване антиген до необходимия минимум, може да се пусне на механизми за хомеостазата, отговорен за образуването на специфичен имунен отговор. Въз основа на тази обща започва Hyperimmunisation всички зайци, на основата на конвенционалния схемата на администриране на антигена. В този случай, интервалът между инжекциите е 7 дни, което съответства на периода на физиологично Условно адаптация. Друг доза от антиген в сравнение с предишния, се увеличава в половината (1, 2, и така нататък. D. N. Cl.). По време на експеримента продължава да се контролира индивидуално оценяване на адаптация и PBCH. Животните са били извадени от опит, когато на следващата доза на антигена, което води до развитие на хроничен стрес.
Експериментът установено, че животното с висока UONRO максимална доза от антиген е 4.0 милиарда микрона. Cl. Допълнително увеличение на антигенен товар предизвиква образуване на хроничен стрес и загубата на всеки от втория заек. Освен това, кратко време на деня, намаляване на чувствителността на болка съвпада с развитието на остър стрес, и доведе до леко увеличение на ноцицептивна последващо реактивност (10%) в сравнение с изходните стойности и адаптивно състояние промяна в посоката на активиране. Устойчиви след ваксинацията чувствителност намаляване болка винаги е придружен от развитието на хроничен стрес (фиг. 22).

Фиг. 22. Динамика на индекс адаптация и ноцицептивна реактивност при зайци с висока UONRO хиперимунизиране с инактивирани клетки
Тези отношения са били проследени в други експериментални групи. С намаляване лабилност UONRO понижено динамика като PBCH на ценности и адаптивни стойности на параметрите. Така животни със средно UONRO успешно поддържат антиген доза 8,0 милиарда микрона. Cl. Зайци ниски UONRO са били в състояние да се адаптират към увеличаването на единично антигенно натоварване до 16,0 млрд микрона. Cl.
За стандартна специфична счетоводна immunogenesis като период контрол определяне на титрите на антителата, избрани осмия ден след четвъртото инжектиране (8,0 милиарда микрона. Cl.), Тъй като това съответства на конвенционалните хиперимунизиране цикъл бактериални антигени. Определяне на серумните антитела се провежда в RIA. Средноаритметична стойност на титрите на антителата (М + М), изработени в групи с високо UONRO 4.0 + 2.32, със средно - 12.40 и 42.7 + ниска - 13.3 + 3.10. Статистически анализ на способността на животните, направени от Montsevichyute-Eringene антитяло-продуциращи разкрива значително предимство количества антитяло титрите, получени в групата със средна относителна UONRO лица с високо UONRO (р < 0,05), и аналогичную тенденцию относительно особей, характеризующихся низким УОНРО (р < 0,1). Учитывая численное популяционное преимущество индивидов, обладающих средним УОНРО, логичным будет заключение о целесообразности определения оптимальной антигенной нагрузки именно к данной группе животных.
По този начин, са обобщени резултатите от изследването показват следната последователност на определяне на оптималната доза на антигенен материал на схемите за хиперимунизиране развитие:

1. диференциация на опитните животни UONRO;
2. определяне на минималната доза от антиген причинява краткосрочен план (до ден) намаляване PBCH, в животни с високо UONRO;
3. идентифициране антигенен максимално натоварване, без да причинява хронична (до седмици) редуциране ноцицептивен реактивност при индивиди, имащи среден UONRO, чрез последователно (в седмични интервали) двукратно увеличение на минималната доза от антиген на максимално допустимата стойност.

В допълнение, за да се потвърди общите биологични закономерности разкрити взаимоотношения проведени изследвания, използващи еукариотни антигени произход. В този случай, както biomodel зайци използва (20
животни), с предварително подбрани критерии за обща стандартизация и случайно разпределени поравно в две групи на лечение. Имунизацията се извършва една група качулка острици Passalurus ambiguus на, и друг - BSA. Дозите съответства на антигени достатъчна единична максимално натоварване предварително изчислени емпирично за дадена популация на животни. Оптималната доза на имуногенен екстракт от острици е 36 мкг протеин и BSA - 8 мг протеин на 1 кг телесно тегло на заек. Антигени прилагат веднъж подкожно. На ден 10, и вземане на кръвни проби се извършва чрез ELISA открити нива на серумните специфични антитела. Ежедневно по време на експеримента, животните бяха определени стойности на показателите за адаптивно състояние и ноцицептивна реактивност.
В резултат на изследването ние създадохме еднородността на динамиката на изследваните параметри на имунизацията с различни антигени еукариотен произход (фиг. 23).
Когато това животно беше образуването на висококачествена първичен хуморален имунен отговор, както в острици въздействието (титър при - 1100,0 + 208.2) и ефекта на BSA (титър при - 1133,3 + 261.5).
Получените данни позволяват да се направи заключение, че липсата на характеристики хомеостаза адаптивни когато са изложени на организъм антигенен материал от различно естество, което показва възможността за наблюдение на ноцицептивна реактивност като универсална оценка на изпитването на имунен отговор.

PBCH - праг на болка AP - индекс адаптация (% лимфоцити: неутрофили segmengoyadernyh%)

Времето за прилагане на изготвяне antigenovVozdeystvie острици въздействието на BSA

Фиг. 23. Приспособимост параметри при зайци, когато се прилагат на организма различни антигени еукариотен произход