Характеристики на разработването на специфични реакции в някои токсични и фармакологични ефекти - нивото на общия неспецифична реактивност на организма

ГЛАВА 4
ХАРАКТЕРИСТИКИ НА СПЕЦИФИЧНИ реакции при някои токсични и фармакологични ефекти ЗАВИСИМОСТ ОТ UONRO
Basic, задължително и по-голямата част от обема на токсикологични и фармакологични проучвания, свързани с изучаването на взаимодействието на материята и живите организми, е да провежда експерименти върху животни [Batrak GE, А. Кудрин, 1979]. Фармакологичната активност на изпитваните вещества обикновено се характеризира с количествени и качествени категории реакции на тялото към тяхното въвеждане. Следователно, като правило, се вземат предвид вида, възрастта и пола характеристики на животните, използвани за токсикологични и фармакологични изследвания [Berezovskaja IV, ZF Loskutova 1993- 1980]. Някои автори предполагат, допълнително се вземат под внимание, когато физиологичното състояние на опитните животни (етапа на сексуална цикъл, хранене режими), тяхната микробиологична и генетичен статус, сезонност, времето на деня извършване на експерименти, като се предполага, че само наличието на тази информация може да се види на възпроизводимост и сравнимост на резултатите [Berezkin M .В., 1989].
Въпреки безспорното значение на обсъжданите условия за предоставяне на токсикологични и фармакологични експерименти, от редица фактори, които биха могли да имат значително въздействие върху резултатите от експерименти, остава в неизвестност. На различни чувствителността на отделните хора и животни със същата доза се прилага вещества и на единна ефекти в различни индивиди при дози, които се различават по няколко пъти, Отдавна е известно [настинки LE, LILIN Ye, 1980]. Въпреки това, дори днес регулиране на тези проучвания не предоставят допълнителна диференциация на експерименталните животни в нивото на общото реактивност [Berezovskaja IV, 1993]. Без да обръща внимание на този факт позволява правилното избор на адекватно взаимодействие групи животни, референтните идентификация дози от изпитваните вещества, обективна оценка на отговорите и следователно надеждни крайните изводи експериментална работа.

1. Проявлението на остри и подостри токсичност в зависимост от UONRO

Токсикологичните изследвания се извършват, за да се идентифицират вредните въздействия на химикали и биологични агенти върху живите организми. Ваксина и серум производство изисква специфични биологични контрол използват бактериални токсини, които имат предварително определена дейност. Обикновено се приема определение на остри и подостри токсичност, идентифициране летална и поносимост активни дози. За да се осигури съответствие със стандарт токсикологичен ефект е от първостепенно значение максимален избор същия тип реактивни образци в експерименталните и контролните групи. С оглед на определени интегративен UONRO и възможността да влияе върху този показател от тежестта на токсикологичните отговорите сме извършени съответните научни изследвания.
Първият опит се провежда върху 30 златни хамстери, симулирани остри химични токсични ефекти, използвайки йод (Iodum). Животните бяха предварително диференцирани за UONRO, образувайки три експериментални групи от по 10 животни всяка. Йодът се прилага едновременно към всички опитни животни подкожно веднъж при доза от 720 мг / кг (DCL) в 10% разтвор на алкохол. След това на всеки час през деня за провеждане на отделни записи от умрели животни.
Експериментът създадена определена зависимост на живот на животните UONRO. Средната продължителност на живота на хората с високо UONRO е 7.8 ± 2.6 часа, със средно - 10.5 + 2.96 и ниска - 12.4 + 2.84.
Статистическият анализ на резултатите, образувани от Montsevichyute-Eringene разкрива тенденция към значимост на разликите между живота на хамстери в групи от животни с високо и ниско UONRO (р < 0,25).
Вторият експеримент се провежда върху 18 бели плъхове предварително равномерно разпределени в три групи на лечение по отношение UONRO. Остри токсични ефекти бяха симулирани от интраперитонеално приложение на всички опитни животни Salmonella ендотоксин (Salmonella Typhimurium) в единична доза от 15 мг / кг (LD95). След това на всеки час през деня за провеждане на отделни записи от умрели животни.
Като резултат от експеримента е зависимостта на живот на експерименталните плъхове от UONRO. Време за смъртта на животните с висока UONRO, е 13.3 + 2.37 часа. За бели плъхове, различаващи Средната UONRO, че е 16.3 + 2.74 часа. смъртни случаи животински Терминът ниско UONRO равняваше 19.2 + 2.24 часа, с две лица в тази група са все още живи (фиг. 12).

Фиг. 12. Динамика на унищожаване на бели плъхове под действието на ендотоксин LD95 Salmonella зависимост UONRO
Статистическият анализ на резултатите се извършва с помощта на тест Wilcoxon - Mann - Whitney разкрива значимост на разликите времеви смърт на експериментални животни, принадлежащи към групите на крайна UONRO (р < 0,05).
Третият Експериментът се провежда върху 48 морски свинчета, предварително равномерно разпределени в три групи на лечение по отношение UONRO. За симулиране на остри токсични ефекти на ендотоксин също използва S. Typhimurium, че въвеждане в същото време всички опитни животни интраперитонеално в DCL. През следващите един почасово проведе отделни записи от умрели животни.
Изследването установи зависимостта на опитните животни, устойчиви на токсичните ефекти, подадени от отделните UONRO. Така дълголетие на морски свинчета след прилагане на токсина направени в групи с високо UONRO - 13.8 + 1.79 часа, със средно - 14.6 + 1.51 часа и ниско UONRO - 17.6 + 1.73 часа ( Фиг. 13).

Фиг. 13. Динамика на смъртта на морски свинчета са изложени на салмонела ендотоксин DCL зависимост UONRO
Статистическа обработка на данни, извършена от Montsevichyute-Eringene, разкри тенденция към значимост на разликите в продължителността на живота между групи от животни с висока и ниска UONRO (р < 0,25). Таким образом, обобщив экспериментальные данные, можно сделать заключение о влиянии УОНРО на индивидуальную устойчивость к острому токсическому воздействию, независимо от природы токсина. Причем наибольшей устойчивостью отличаются особи с низким УОНРО, а наименьшей — с высоким УОНРО. Индивиды, обладающие средним УОНРО, характеризуются промежуточным положением в устойчивости к токсинам между крайними группами животных, фактически отражая среднепопуляционный токсикологический эффект.
В допълнение към контрола на остра токсичност, в практиката на токсикологични изследвания се използват широко за оценка на субакутна токсичност. Степента на токсичност се определя чрез реакция на тежестта организма на въвеждането на веществото с отрицателна стойност за него [Batrak GE, Кудрин AN, 1979].
Оценка на субакутна токсичност на микробни токсини често най извършва от резултатите от "тест за пиене". Метод на изследване се основава на проява на действието на бактериални токсини, което води до намаляване на телесното тегло bioprobnyh животни. Както се използва biomodel мишки. Непосредствено преди прилагане на лекарството се определя телесното тегло на експериментални и контролни групи животни. Изследваното лекарство се прилага интраперитонеално и се наблюдава в продължение на седмица за динамични промени в масата на експерименталната група мишки. Колкото по-висока забавяне на живо тегло на мишките на експерименталната група на животните от контролната група, на по-изразен изследване за токсичност лекарството.
Предвид въздействието UONRO резистентност на организма към остри токсични ефекти, ние хипотеза, че реакцията да подостри токсични ефекти един или друг начин ще зависи от отделния UONRO.
За да се изследва зависимостта на промяната в телесното тегло на животните bioprobnyh UONRO в подостри токсични ефекти на завършили съответните проучвания.
Работата се провежда върху 60 бели мишки съвпадащи за възраст (55-65 дни) и телесно тегло (17,0-19,0 ​​г). В допълнение, животните са обособени на базата UONRO и равномерно разпределени в три групи. В група I включва лица с високо, в II група - със средно, и в групата III - Ниска UONRO. Всяка група мишки се разделя на две групи, експериментални и контрол, 10 животни. Получаване на подгрупи се провежда в продължение на 6 дни преди експеримента (препоръчително период адаптация). През този период, средното тегло на групата I животни намалява с 0.1 грама, масата на група II мишки остава непроменена и в групата III увеличава с 1,5 грама на ден 7 всички животни получават подгрупи DMD едновременно интраперитонеално прилагат (10 мг / кг) стафилококова екзотоксин (S. Aureus). Едновременно с това, всички контролни мишки бяха инжектирани подобно подгрупи подходящ обем от физиологичен разтвор. След това всеки ден в продължение на следващите 7 дни се претеглят всяка подгрупа животни.
Експериментите са идентифицирани някои характеристики на динамиката на живо тегло на мишките от експерименталните и контролните подгрупи в зависимост от UONRO.
Тъй като животните от опитните инжекциите масови подгрупи I към втората група са намалели дни средно по 1,5 грама, а след това се съхраняват на същото ниво, на четвъртия ден започна да се увеличава, а до края на седмицата, че дефицитът на средно 0,5 грама на първоначалното ниво. Телесна маса мишки получават подгрупи II група по време на експеримента се увеличава средно с 1.2 грама, и Група III - 1.5 гр. (Фигура 14).
Във всички подгрупи от контрола показват постоянно нарастване на масата на животни. Масата на групата мишки I превишени първоначалното ниво от 0.5 г, и групи II и III практически съвпада със съответните стойности на експериментални подгрупи.
По този начин се определя, че животните се характеризират с висока UONRO различават повишена чувствителност към подостри токсични ефекти, определени от "пиенето на пробата."

Фиг. 14. Динамика на промени бели мишки живо тегло разпределени UONRO преди и след излагане на стафилококова екзотоксин DMD допълнение към използването на "тест за пиене", за да се оцени субакутна токсичност често се използва анализ на морфологичните промени, характерни патологични процеси, предизвикани от токсични ефекти.
За да се изследва ефекта на промяна UONRO вътрешните органи тегло в субакутен токсични ефекти завършени следните проучвания.
Както biomodel използва 36 морски свинчета. Животните с индивидуален UONRO равномерно разпределени в три групи. Всяка от групите допълнително, рандомизирано, разпределени в експериментални и контролни подгрупи на 6 проби. Подостра токсични ефекти моделирани от три пъти, часови интервали, интраперитонеална инжекция MTD (0.5 мг / кг) ендотоксин Salmonella (S. Typhimurium) животни от експериментални подгрупи. Едновременно с контролни морски свинчета се инжектират подгрупи съответни обем от физиологичен разтвор от същата схема. След 10 часовник е едновременно евтаназия всички опитни животни чрез обезглавяване. Извършване аутопсия, отстранява черния дроб, белите дробове, сърцето, далака, бъбреците и nadpochech-
убождания. Освен това, възстановени тела се претеглят и се изчисляват тяхната маса фракция поотделно.
Експериментите са установили определена тенденция за промяна на относителните маси на някои от вътрешните органи в подостри токсични ефекти (Таблица 17)..
Таблица 17
Промяна в относителното тегло на вътрешните органи в морски свинчета съгласно UONRO под влиянието на салмонела ендотоксин на IPOA

* Статистически значителна промяна (р < 0,05) по критерию Вилкоксона — Манна — Уитни.
В същото време поради високите стойности на статистическите грешки изчисляват средния индекс на значителни промени в относителната тежест на вътрешни органи, с изключение на надбъбречните жлези, той не се разкрива. Въпреки това, получените резултати ни позволяват да се констатира, че по-големи морфологични изменения на вътрешните органи, характерни за интоксикация, са особено ниски UONRO.
Тези резултати до голяма степен оптимизирани оценка субакутна токсичност поради целенасочен избор biomodels предварително определено UONRO. Въпреки това, определянето на прагови дози от токсични вещества, е проблематично поради липсата на методи качествена оценка на показателя.
Ако приемем, че жените с висок UONRO репродуктивна система ще бъде относително по-чувствителни към прага на интоксикация, ние предприехме изследвания, за да се разчита на идентификацията на качествени показатели за измерване на токсичните ефекти на ДМД. Работата се извършва върху бял mytah - форма на животни, които имат сексуален цикъл тип poliestralny с спонтанна овулация. Общо 198 използвани в експеримента мишките (162 + 36), предварително диференцирани въз UONRO и равномерно разпределени в три групи. Група I включва видове с високо UONRO, II - средно и III - ниска. Всяка група се състои от три равни подгрупи, два теста (А и В) и един контрол. Всяка подгрупа от своя страна е назначен от две семейства (6 + 2) и двата пола (6) minigroup. Всички експериментални семейство подгрупи A-образувана директно след подкожно инжектиране в женски Salmonella ендотоксин изчислява DMD (0.4 мг / кг в 0,2 мл 0,9% -ен разтвор на натриев хлорид). Всички семейства с опит в подгрупите са се образували на 7-ия ден след подобни токсични ефекти.
Животните са били изложени на еднополовите minigroup токсични ефекти в същото време с женските от подгрупите, за да се вземе предвид възможното въздействие върху времето за инжектиране, чувствителност на организма да ендотоксин. Всички жени контролират подгрупи като в семейства, и мини-групи се подлагат на въздействието на плацебо (0.9% NaCl разтвор ия). Получаване на семейства опит (А и В) и контрол под-групи от всички групи се осъществява в същото време, чрез вариране на времето на приложение на токсина. На 14-ия ден от датата на образуване на семействата на всички женски първи контрол и експериментални подгрупи А и упоен с етер и отбелязан от пречупване на шийните прешлени. След направена аутопсия, премахване на матката и след отваряне на роговете му са идентифицирани ембрионални смъртност. Всички жени на втората контрола и експериментални подгрупи А и Б от 20-те години на 30-ия ден след формирането на семейства ежедневно записани поява на потомството.
По време на експеримента всички жени еднополовите minigroup произвежда ежедневни данни за сексуалния цикъл.
В резултат на изследвания, извършени след основен набор точки.
В 70% от жените в групата, което преживях мини-групи в подгрупи А и Б за 4-6 дни, след като токсичните ефекти разработени anafrodiziya (прекратяване на половите цикли). В 50% от животните от група III опит мини-групи в подгрупи А и В в същия период има активиране на репродуктивната сфера (овулация при липса на мъжки).
В първия тест-подгрупа I група при жени в отвора на матката показва пълното отсъствие на ембриони. В други подгрупи на групи II и III се види пълното развитие на бременност (таблица. 18).

Индикатори на смърт на плода при женски бели мишки, в зависимост от UONRO когато са изложени DMD салмонела ендотоксин

В сравнение с контролните животни първите подгрупи на групите ембрионална смъртност в експерименталните А-подгрупите, с изключение на група I, имаше значителни промени в стойностите на изследваните параметри. Освен това в животните от експерименталната група III-A подгрупа оцеляване на имплантирани ембриони превишена че в подгрупите на контролните животни.
Стойностите на цени смърт на плода при животни в първите експериментални подгрупите на групи почти напълно съвпадат със съответните стойности в подгрупите контрол.
Стойностите на репродуктивните параметри във всяка група не са имали значителни разлики в животните на втория пилот и вторият в-опитни подгрупи.
Външният вид на поколението във втория A-подгрупа на група I в целевите дати са записани. Стойностите на възпроизвеждащи параметри в вторите експериментални подгрупи A-II и III съответстват на същите групи на стойностите, получени в същия вид контрол подгрупи.
По този начин, влиянието на DMD микробен ендотоксин, оказва инхибиращ ефект върху функционалната активност на репродуктивната система на женски бели мишки, характеризиращ се с висока UONRO едновременно активира сексуална система на лицата с ниска UONRO. Преходен връх инхибиране на репродуктивната функция на животни с висока UONRO пада на 5-ия ден, след като един-единствен на токсичността, и пълно възстановяване настъпва към 8-ия ден.
Идентифицирани отношения ни позволяват да предлагаме нови качествени показатели за измерване на токсични вещества DMD бактериален произход.

Експерименталните данни на изследването, е възможно да се счита, че ясно въздействие върху UONRO конкретни прояви на остра и подостра токсичност при лабораторни животни. Освен това, извършването на оценка на субакутна токсичност на различни вещества, е необходимо да се вземат предвид специфичните аспекти на развитие на различни патологични реакции в зависимост от индивидуалната UONRO.