Методи за определяне на имунологична реактивност - практически умения педиатър

ОБЩИ РАЗПОРЕДБИ

В педиатричната практика широко използван алергологични кожни тестове с тестове микробни и не-микробни антигени туберкулин, изследването на протеиновите фракции, и серумните имуноглобулини, слуз на горните дихателни пътища и други egestas поставят аглутинация, утаяване, имунофлуоресценция, свързване на комплемента (РСК), Coombs реакция изследванията са неспецифични фактори защита -. с-реактивен протеин, интерферон, пропердин, допълват и др ориентация да излагат принципите на определен Отори най-често използваната имунологични изследвания.

МЕТОДИ NESPETSITSIFICHESKOY реактивност

Хемолитична активност на комплемента. Комплемента (син. Aleksin) е неспецифичен защитен фактор, който е включен в редица серумни протеини. Според СЗО номенклатура допълнение система е обозначен с С, и нейните отделни компоненти - числата от 1 до 9 (Ci, С2, С9). Системата на комплемента 8 са отделни протеини, и Sd представлява комплекс, който включва система 4 протеин пропердин един ензим и инхибитор-2 ензим. Протеините на системата на комплемента може да се активират последователно в съответствие с принципа на биологичното усилване на антиген - (. С3-proactivator, C-proaktiva-torkonvertaza, кобра фактор и др) антитяло или не-специфични фактори. Серум, загрята до 56 ° С за 30 минути, губи своята комплементарна активност. Допълване е в състояние да се присъединят към антиген - антитяло, на базата на това, което РСК. Има няколко версии на DGC. Намалена допълнение титър се наблюдава с изразена степен на чувствителност на тялото, някои автоимунни заболявания (колагеноза и др.).
На нивото на комплемента в серума се съди от неговия хемолитична активност. Най-широко използваният метод за определяне на стандартизиран хемолитична активност на комплемента, с 50% хемолиза. Методът се основава на принципа, че комплемента на серум причинява хемолиза на сенсибилизирани овчи еритроцити в присъствието на заешки серум имунизирани с овчи еритроцити (хемолитична серум). активност на комплемента се вземат предвид при конвенционалните хемолитични единици. Един хемолитична единица 50% - е количество на комплемента, което причинява хемолиза на 50% от 0.5 мл стандартно окачване на чувствителни червени кръвни клетки при 37 ° С в продължение на 45 минути. В серума на здрави лица, съдържа 20-40 хемолитична комплемента единици.
пропердин. Това се отнася до не-специфични имунни фактори. В присъствието на комплемент и магнезиеви йони пропердин проявява бактерициден ефект и е способен да инактивира някои вируси. В човешка кръв, серум обикновено съдържа 08/04/10 единици. пропердин.
За да се определи нивото на серумния пропердин използва zimozanovy метод титруване. Тя се основава на способността да се свързва с пропердин полизахарид зимосан. Полученият комплекс с пропердин - трета част от цимозан инактивира допълват (CS). Тълкуване на резултатите, получени от степента на инактивиране на ВС.
Определяне на С-реактивен протеин. В кръвния серум на здрави хора, С-реактивен протеин не е определена. Установено е при остри възпалителни процеси, заболявания, свързани с разрушаване на тъканите, и е показател за активността на тези процеси.
Размерът на стъклен капилярен 0,4 X 100 mm набира антисерум до 1/3 обем и същия обем от серум на пациента. Разклащането капилярна 12-15 пъти, реагентите, съдържащи се в него се разбърква. След това капилярата се провежда в хоризонтално положение и краят му потопена в пластелин по начин, че когато капиляра придаване вертикална позиция смес беше през колона на въздуха, без да докосва пластелина. Реакцията може да протече при стайна температура, след това предварителни резултати опис произведени след 4 часа, и ако сместа се инкубира в термостат при температура 37 ° С. - 2 часа след крайния резултат се взема предвид поддържането суроватка смес в капилярна при стайна температура в продължение на 18-20 часа , т. е. в края на деня. Наличието на С-реактивен протеин показва загуба утайка: височината на постоянната утайка в

1. mm се оценява като един напречен (+), на 2 mm - (+). в
2. мм - (+ + +) "е 4 мм или повече - (+ + +).

Тигърът на хетерофилни аглутини. Факторите на естествен имунитет са хетерофилни неспецифични аглутини, които се образуват в отговор на спонтанно ефект върху тялото на широко разпространените антигени на околната среда. Търни разнородни аглутинини в серума зависи от възрастта: през първите 5 години от живота си, тя се разраства и в напреднала възраст - пада. При здрави възрастни, титъра на хетерофилни аглутинация в разреждания в границите от 1: 8 до 1:32 (1:16 средно). Титри бяха определени, както е описано в Павел - Bunnelya.
лизозим. Това е - един от факторите, присъщи антимикробна защита, които се намират в слъзната течност, слюнка, кожата, кръв, серум, мляко, бъбреците, черния дроб, сърцето и други тъкани на човешкото тяло. Особено богата това вещество левкоцити и слъзния флуид. За първи път се лизозим открит от Флеминг А. (1922). Изследвания Yermolyeva 3 V. и др. (1968) показват, че лизозим е ензим мурамидаза, peptidopolisaharidy унищожаване на клетъчните стени на бактерии.
Съществуват няколко метода за определяне на биологичната активност на лизозим, пътя на серийни разреждания на микроб тестове, турбидиметрично метод и дифузия в агар.
Според литературата (3 Михайлова, предаде АП А MIKHEEV, 1966), деца от първите години на живота и неонатална титър лизозим значително по-висока от тази на възрастните.
Фагоцитарната активност на левкоцитите. Феноменът на фагоцитозата като основен фактор на естествен имунитет беше отворена IM Мечников. Способността за смилане и усвояване на микроорганизми и други чужди частици са неутрофили в кръвта (макрофаги), моноцити и клетки на ретикулоендотелната система (мобилни и фиксирани макрофаги).
Ин витро vidalevskoy получаване на смес, състояща се от 0.1 мл натриев цитрат в 2% разтвор, 0.2 мл от изследвана кръвта и 0.1 мл тестов организъм суспензия (Staphylococcus № 209 или други подобни). Получава се от агар култура и ежедневно разрежда до 400 милиона микробни органи в 1 мл. След разбъркване на сместа от тези компоненти се поставя в термостат при 37 ° С в продължение на 30 минути. След това сместа се центрофугира, горния слой на утайката подготви намазки, фиксирана Никифоров смес от тях и оцветени с Giemsa Romanovskomu-. Mikroskopiruyut лекарство, тежестта на фагоцитоза се оценява по броя на неутрофили абсорбира микроби (фагоцитната брой) и броя на левкоцитите са показали фагоцитната активност. За тази цел, разглеждащи 100 неутрофили. Обикновено при здрави хора фагоцитарно бели кръвни клетки, които съставляват 50-70%, и номер на фагоцитите - 2-4.
Реакцията на бластна трансформация (RBT) лимфоцити. Тази способност за трансформиране на лимфоцити в недиференцирани бластни клетки чрез култивиране на левкоцити ин витро на изкуствена среда. Такъв метод може да се индуцира от специфични и неспецифични агенти. Неспецифичното стимулатор е растителен протеин фитохемаглутинин, под въздействието на което след 72 часа има трансформация на лимфоцити в големи зародишни клетки, и много от тях са в състояние на мейоза.
В произведенията на много изследователи той е показал, че броят на тежки заболявания RBT лимфоцити, получени при тези пациенти, много подтискан. Докато подобряване на състоянието на пациенти, възстановяващи способността на лимфоцити трансформирани чрез действието на стимуланта в доменните клетки.