Липидния метаболизъм проучване - практически умения педиатър

Физиологичната роля на липид многостранен. Те образуват липидна матрица на структурните елементи на клетки и техните органели, участващи в енергийния метаболизъм, служи като изходен материал за синтез на стероидни хормони, съединения, имащи свойства на витамин D, играят важна роля в кръвосъсирването, имунологични процеси храносмилането. Производни липиди (полиенови киселини) са простагландини - съединения, които имат висока биологична активност в тялото и действащи на различни функции.
Основните липидни компоненти на кръвта: фосфолипидите и свободен efirosvyazanny (холестеролови естери) холестерини, триглицеридите (неутрални липиди), не-естерифицирани мастни киселини, редица междинни продукти на метаболизма.
Плазмените липиди са първоначално неразтворими във вода. Те се транспортират в кръвта, за да се образува липопротеини. Тези единици са съставени от представители на специфични апопротеини и липидни класове: триглицериди, холестерол, холестерил естер и фосфолипиди.
За да се оцени състоянието на липидния метаболизъм в клиниката определи общите липиди и индивидуални липидни фракции на кръв, серум липопротеини (плазма) кетонни тела в кръвта и урината и дейността на панкреаса postgeparinovoy (липопротеин) липаза и letsetin- холестерол ацилтрансфераза извършва стрес-тестове мазнини , въглехидрати пробата с lipoidolom, учебни липидни изпражнения използват изотопни методи.
За да се определи общо серумните липиди често използван метод, разработен Tselnerom и Kirsch (1962). Този метод се основава на реакцията на липиди с т.нар сулфо-fosfovanilinovym реагент. Методът е много чувствителен, технически прост, дава доста възпроизводими резултати. Най-удобният изпълнение на съществуващите методи, основаващи се на реакция на сулфо-fosfovanilinovoy е модификация проектиран Baryshnikov A. Yu, Y. Veltischevym Е. и сътр. (1966).
Определяне на общите липиди в серум, използвайки реакция sulfofo-sfovanilinovoy. Методът се основава на цветна реакция на ненаситени липиди продуктите от разпада с сулфо-fosfovanilinovym реагент.
Към 0.01 мл серум се прибавя 0,4 мл концентрирана сярна киселина и се поставя във водна баня при 100 ° С в продължение на 20 минути. След охлаждане, към сместа се прибавя 1,6 мл фосфорен-ванилил реагент (0.6% разтвор на ванилин в концентрирана фосфорна киселина в съотношение 1: 4) и се разклаща. Един час по-късно, проба за фотометрично FEKe със зелен филтър 3 mm клетка срещу контрола (0.01 мл дестилирана вода, обработва по същия начин, както серум).

Таблица. 50. липидни фракции на кръвен серум при деца.

Съдържанието на общите липиди се изчислява от стандартната крива, получена със стандартни разтвори на триолеин или определя по формулата

където С - концентрацията на стандартен разтвор, г / л.
Ако реакцията с триолеин приема като 100%, след това равни количества от други липиди са: холестерол - 91% изчезване, линолова киселина - 77,5, фосфолипиди - стеаринова киселина и 53.7 - 19%.
Нивото на общите липиди в кръвта от пъпната връв е най-ниската. По време на първите седмици от живота на серумния липидно съдържание нараства бързо и варира от 5,99 до 6,82 гр / л (таблица. 50).
Увеличение на серумните липиди (хиперлипидемия), наблюдавани при диабет, панкреатит, остър и хроничен хепатит, затлъстяване, остър и хроничен нефрит с оток, ексудативна диатеза, toksikozah- намаление (gipolipemiya) - с недохранване, хипертиреоидизъм, диария, остра чернодробна некроза.

Определяне на общия холестерол.

Общият холестерол е сумата на свободен и естерифициран холестерол. Като единна одобрен директен метод Илка, на базата на реакцията на Либерман - Burchard и прекия метод, на базата на реакцията на Zlatkis - Зак. Най-широко използваният метод на Илка. Методът се основава на следния принцип: холестерол в присъствието на оцетен анхидрид, и смес от оцетна киселина и сярна дава зелено оцветяване.
Техника като определянето. Към 2.1 мл Libermana- Burchard реагент (1 част ледена оцетна киселина, 5 части оцетен анхидрид и 1 част от концентрирана сярна киселина) беше бавно по стените на тръбите, 0.1 мл серум. Флаконът се разклаща енергично 10-12 пъти, след това се инкубират за 20 минути при 37 ° С и kolorimetriruyut срещу реагент на Либерман - Burh Арда на FEKe на червена светлина филтър в 5 mm кювета. общо съдържание на холестерол се изчислява от стандартната крива, построена от разреждания на стандартен разтвор на холестерол. Нормалните стойности на холестерол при деца, вариращи от 2.67 до 4.61 ммол / л (виж. Таблица. 50).
Хиперхолестеролемия често се наблюдава в нефротичен синдром, микседем, диабет, гликогенни, атеросклероза, ксантоматоза, черния дроб и жлъчните пътища, особено при заболявания на жлъчния поток.
Важно за диференциалната диагноза на конгестивна и паренхимни жълтеница е изследване на холестерол фракции. Когато обструктивна жълтеница или повишени нива на свободен холестерол или свободни и естерифицирани. За хепатит характеризира с намалени холестеролови естери, пропорционална на степента на чернодробна дисфункция. Увеличаването на холестеролови естери в динамиката на заболяването разказва за процеса на подобряване, намаляване - на влошаване. При нормална скорост холестерол естерификация (съотношение на общия холестерол на холестеролов естер) при деца е 0.6-0.8. В паренхим лезии на черния дроб може да се редуцира до 0,4-0,2 или дори 0.15.
Хипохолестеролемия наблюдава при тежки поражения на паренхимни на черния дроб, чернодробна кома, болест на Адисон, остър панкреатит, хранителни разстройства, вродени хемолитични анемии и др ..
Определяне на общия фосфолипиди в кръвния серум. Съдържанието на фосфолипиди се определя от липидни концентрации фосфор, което представлява 4% относителна молекулна маса (метод размазване).
Както е предложено единен метод за определяне на общия серумен фосфолипиди от общото съдържание на фосфор в липопротеини утаяват с трихлороцетна киселина (VG Kolb, VS Kamyshnikov, 1976). Методът се основава на следния принцип: трихлороцетна киселина се утаява фосфолипиди (заедно с кръвни протеини), в резултат утайка се определя от съдържание на фосфор.
Нормалните стойности на фосфолипиди в кръвния серум на деца варират от 0.79 ммол / л при новородени до 2.21 ммол / л по-големи деца (вж. Таблица. 50).
Повишени нива на фосфолипиди в кръвния серум може да се наблюдава в началния период на хепатит, застойна жълтеница, хроничен нефрит, тежка форма на диабет, портал цироза, етерично хиперлипемия, хеморагичен анемия, от вида на хиперлипидемия. Намаляването на концентрацията на фосфолипиди се наблюдава в чернодробни лезии - вирусен и токсичен хепатит височина на заболяването, особено postnecrotic цироза и мастни чернодробно заболяване, атеросклероза, различни форми на анемия, остри фебрилни състояния, недохранване, хипотиреоидизъм и др.
Тънкослойната хроматография на липиди. Се извършва върху тънък слой от силикагел - най-ефективният метод е много чувствителен, използването на която позволява едновременно да се разгледа липидния профил в много малки количества кръв. се използват два метода за количествено липид хроматограма: 1) за откриване на липидни фракции на плочата, тяхното идентифициране, заедно с премахването на течен сорбент и елуиране. Количествено определяне на екстрахираните фракции може да се извърши с помощта на специфични и неспецифични химични реакции е 2) върху плоча линия денситометрия липидни фракции оцветяват фосфомолибденова киселина (L. A. Akhrem, A. Kuznetsov, 1965). Метод за определяне на кръвните липиди (VS Danilchik, 1977). За определяне на липидни фракции 10-11 достатъчно 0.02 мл проба (плазма или червени кръвни клетки), които могат да бъдат взети от пръст.
Лабораторни методи за определяне на липопротеин. Най-прост и достъпен турбидиметрично метод за определяне (3-липопротеин Brushteyn по себе си. Принципът се основава на способността на р-липопротеин серум утаява под влиянието на калций в присъствието на хепарин в различна реакционна среда (Kolb VG, VS Kamyshnikov , 1976).