Използването на изотопи в хистология - на базата на хистологията

Видео: хистология и физиология на матрицата. Sushkov AL

метод авторадиография

За разлика хистохимия който позволява да се определи само локализацията и концентрацията на химикали в структурата, авторадиография, освен това, позволява да се изследва разпределението на различни вещества в клетки, тъкани и органи на целия организъм, означава и механизми са на разположение, и подбор от него, и др. Основата авторадиография (като светло-оптичен и електронен микроскоп) лежи процес подобен фотографски, с единствената разлика, че "свети" фактор в авторадиография не е лека, и йонизиращо лъчение, и хвърля разпад на радиоактивни ядра атоми, въведени в организма под формата на различни съединения. Вместо същото фотографска плака (филм), специална емулсия, която е покрита хистологично среда (и също очерня щампи органи и т. Д) За да се постигне най-близък контакт с него структури за изпитване. След излагане достатъчно да сребърни кристали бромид (включени в емулсията), които са в непосредствена близост до изотоп локализацията радиоактивни превърнати в метални сребърни зърна проявяват секции, оцветени, дехидратирани и вградени в балсам. Когато микроскопия автограф радиоактивни атоми локализация идентифицирани като черни зърна. По броя на зърна могат да бъдат оценявани (до известна степен) количеството концентрирана в областта на радиоизотоп.
Тук е използването на метод за изследване на авторадиография ДНК биосинтеза в митоза на епителните клетки на тънките черва на плъхове.

Видео: AURORA - REJUVINATION

1. Плъх интраперитонеално Н-тимидин (един от компонентите на молекулата на ДНК) за изчисляване на Ki 1 микрон на 1 грам телесно тегло и умъртвени чрез 1-12 часа.
2. Подробности на тънките черва е фиксиран (обикновено в 10% формалин или течност Сагпоу), дехидратиран и поставени в парафин.
3. Дебели разрези бяха gistolicheskie
4. 7 микрона.
5. Deparafiniruyut два или три промени в ксилен (толуен) в продължение на 1-2 минути.
6. Сухи секции бяха покрити с емулсията при температура от 42 ° С (при fotokomnate тъмно червена светлина).
7. Поставени в светлонепроницаемо кутия и да се съхраняват в хладилник за 14-30 дни.
8. Тя показва в amidolovom разработчик.
9. Изплакват с дестилирана вода.
10. Потопени в "стоп разтвор" (1% разтвор на оцетна киселина) 0.5-1 минути.
11. Определи 30-40% натриев тиосулфат за 1 минута.
12. Измиват с течаща вода в продължение на 20-30 минути.
13. Суши на въздух.
14. Оцветени с хематоксилин и еозин (както обикновено).
15. Дехидратирани в алкохоли с нарастваща концентрация.
16. Просвети и вградени в балсам.

имунофлуоресцентен метод

метод имунофлуоресцентен - уникален морфологичен метод да се разгледа топологията на клетките и тъканите в комплексни биологични вещества (ендогенни или екзогенни произход) индивидуално разпределени със специфична структура (протеини, полизахариди, нуклеинови киселини, и т.н.). Същността на този метод е, както следва. Вещество, идентична с тази локация в изпитвания обект (тъкан) клетки искат да учат друго животно се имунизира и след определено време (достатъчен за продуциране на антитела) от своя антисерум, получен кръв. Антитела, съдържащи се в у-глобулин фракция на антисерум на химически свързани към флуорохром (специално съединение, способно за получаване на светло сияние - флуоресценция - под действието на ултравиолетови лъчи). На хистологични секции на замразени или определени органи (тъкани) конюгат прилага капка - антисерум свързан с флуорохром, и след 20-30 минути на излагане се промива с изотоничен разтвор на натриев хлорид несвързаните флуоресцентни антитела. Лекарството е затворена в буфериран глицерол или полистирол. Наблюдението се извършва чрез използване на флуоресцентен микроскоп в ултравиолетовата част на спектъра. Вещества, които специфично реагират с антителата, детектирани чрез флуоресценция, свързана с втория флуорохрома.
Индиректен имунофлуоресцентен характеризиращ обикновено по-висока специфичност за откриване на субстрата - по описания по-горе вариант на този метод, наречен директна имунофлуоресценция, друг вариант е разработен. индиректен имунофлуоресцентен метод, различен от директния метод с това, че частта, получена след първата имунизация, антитялото (А-1) се използва за имунизиране на втората животното, при което се получават антисеруми, съдържащи антитела (А-2) до А-1. А-2 комплексообразувател с флуорохром. В секции прилагат антисерум, съдържащ А-1, и след промиване на несвързаните антитела на желаната субстанция антисерум, съдържащ А-2 (флуоресцентен). А-2 реагира с а-1 и по този начин "заключени" в мястото на изпитваното вещество.
Електрон метод микроскопични вариации имунофлуоресценция има някои особености. В някои случаи, антителата са прикрепени имунната антисерум всяко електронно-микроскопски средство (например, тежък метал атом), а в други - на съединение (групата), включително радиоактивен атом. В последния случай, за идентифициране е необходимо локализацията на антиген-антитяло комплекса за провеждане на допълнителен авторадиография.
имунофлуоресцентен метод се характеризира с голяма чувствителност. и може да открие вещества, присъстващи в телесните клетки и тъкани в много ниски концентрации.

Видео: A нервните клетки // Nauchfilm

Видео: Ролята на съединителната тъкан и Flurevity, практикуващ LA Vitrik 09. 06.2015 MPS "ЕАД"