Сифилис спирохета - микробиология с техниката на микробиологични изследвания

Патогенните спирохети
Спирохетите разлика от бактерии съставляват по-малко разпространена група от микроорганизми.
Всички Спирохетите не формират спори и капсули. Грам не са боядисани (Грам-отрицателни). Трудно е да се отглеждат върху хранителна среда. Spirochetes - сапрофити намерени в органите на вода, богати на органични отпадъци, в шлама в устата и червата на човек. Според неговите морфологични характеристики патогенни спирохети са разделени в три групи.

1. Treponema, имащи формата на редовен спирала. Те включват сифилис спирохета.
2. Borrelia, оформени гофрирана прежда с обрати и къдри широки. Тази група включва спирохети пристъпно треска и спирохета Винсънт.
3. Leptospira, като множество малки къдри и характеристика затваряне под формата на куки (Leptospira инфекциозна жълтеница).

сифилис спирохета
Причинителят на сифилис е Treponema Pallidum Spirochaeta Pallida, описан за първи път Schaudinn F. Hoffmann и Е. през 1905 г., 2 години преди това, експериментиране на маймуни, сифилис спирохета открити DK Zabolotny.
Морфология и багрилни свойства. Treponema Pallidum е много мека, тънка, слабо светлина пречупващи резба с малък, единен, редовни криви (Фиг. 104 и 105 вмъкване).

Фиг. 104. Treponema Pallidum в тъмно поле.
Като цяло, това е от дълги 6 до 14 микрона и 0,25 микрона дебелина. Наименование бледо тя получава поради лоша оцветителната способност анилинови бои и лошата видимост в хола държавата. Тези свойства се дължат на ниско съдържание на липиди нуклеопротеина и богатство в спирохети на тялото. За да го боя, се използва методът Романовски (фиг. 105), или боята чрез подлагане на предварително действието на някои петна. Най-добрият метод за откриване на Treponema Pallidum е проучване в тъмното зрителното поле. В чист материал при изследване с ultramicroscope затъмнена поле на изглед Treponema Pallidum проявява активни движения около надлъжната ос, както и транслационна и ротационни движения.
Отглеждане. На обща хранителна среда, сифилис спирохета не се размножават. VM Aristovskaya и АА Geltser успешно се прилага течна среда, състояща се от заешки серум, като към това парче от мозъчна тъкан. Повърхността на средата след засяването излива вазелин. В култури от спирохети-грубо, по-кратък и различни полиморфизми. Културите лишени от патогенни свойства и се наричат ​​"от култура" за разлика от "тъкан", които запазват патогените
свойства и поддържа в лабораторията чрез пренасяне в зайци.
Resistance. Treponema Pallidum малко устойчиви на сушене и висока температура. Отопление до 45-48 ° го убива за един час, до 55 ° -това 15 минути. Чрез ниска температура е по-малко чувствителни. При 10 ° е жизнеспособен до няколко дни. Дезинфектанти имат разрушителен ефект. От химикали най-драматичния ефект има 1-2% разтвор на фенол.
Патогенност при животните. Мечников и Zabolotny е първият, който получи експериментални сифилис с маймуни. Зайци могат да бъдат заразени от въвеждането им патологични материал в роговицата, предната камера на окото, на кожата, лигавицата и т. Г. Животните с първична лезия развива под формата на типичен склероза (шанкър) на мястото на инокулация.
Патогенеза и клинични сифилис. Единственият източник на инфекция е човек със сифилис. Заболяването може да се предава чрез пряк контакт (често сексуално), или чрез обекти, заразени с сифилитичен секрети. Готвене от общ, използването на общата лъжица и м. P. (индиректен контакт) може да улесни разпространението на домакински сифилис.
Treponema Pallidum влиза в тялото през наранена кожа и лигавицата. След 3-4 седмици в мястото на входната врата има първична склероза-а шанкър (язва, като плътни ръбове и по този начин име dno- шанкър), което е характерно за първичен период от сифилис.
В бъдеще, че бактерията навлиза в тялото чрез механизмите на лимфната и кръв и се разпространява по цялото тяло - идва втория период. Този период се характеризира с лезии на кожата и лигавиците, които се появяват розеола, папули, пустули везикули и - syphilides. Вторият период трае от 2-3 месеца до няколко години. Ако се лекува сифилиса недостатъчно, идва третият период - подут. Gummi (гранулом) представляват клетъчни клъстери, състояща се от лимфоцити, плазмени клетки и епителоидна. Те могат да бъдат в кожата, лигавиците, вътрешен
органи, и така нататък. д. Гунма понякога растат големи, малки плавателни съдове около тях постепенно намаляване на лумена и в крайна сметка затвори. В тази връзка, силата gummas клетки се разрушават и се появява дълбоко тяхното унищожаване с образуването на язви и белези във всички тъкани и органи.
В някои случаи, сифилис влиза четвъртия период, който се характеризира с лезии на централната нервна система под формата на прогресивна парализа и измършавяване дорзалис. Клиничните прояви на сифилис се характеризира с факта, че в повечето случаи се появяват кожни лезии и слизестите са безболезнено, дори и да изчезне без лекарска намеса, рецидив и най-накрая даде сериозни щети на трети и четвърти период.
Имунитет. не се наблюдава вродения имунитет на сифилис при хората. Отложено заболяване също не оставя този вид придобит имунитет, което се характеризира с най-iifektsionnyh заболявания. В вторичен сифилис спирохета инфекция на пациента не се умъртвяват и се съхранява и разпределя в целия организъм, заразяване на органи и тъкани, заедно с консервирани спирохети първична инфекция. Въпреки това, когато вторична инфекция на първичния сифилис отсъства форма реакцията - шанкър. Това имунологично състояние, наречено "shankernym имунитет."
Терминът "имунитет" в сифилис разбере имунологично преструктуриране на тялото и затова променящия се характер на патологични промени и самата клинична картина. Що се отнася до механизъм на тази "имунитет", не е причинена от хуморални фактори, въпреки серума на пациенти показват антитела (лизин, аглутини).
Лабораторна диагностика. В първия етап на сифилис са диагностицирани с помощта на микроскопско изследване в тъмно поле или материал от петна оцветени шанкър.
За проучване на необходимостта за извличане на течност тъкан от по-дълбоките части на мястото на раната, съдържащи по-голям брой на спирохети. За тази цел, на първо повърхността внимателно изтри шанкър стерилен тампон навлажнена с физиологичен разтвор, след това леко пресоване на язвата се екструдира от малкото количество от тъканна течност. Ако това не стане, на дъното на язвата дразни леко poskablivaya скалпел или остър лъжица. Получената течност се аспирира с пипета на Пастьор.
Спад на течност е най-добре да се проучи тъмно поле, където морфологията е ясно видими ярки спирохети и техните характерни движения.
Възникне в генитални и орални сапрофитни спирохети (генитално-Sp REFRINGENS, орално - .. Sp microdentium) се различават от бледо спирохети в тяхната морфология и природата на движението. Sp. Refringens има брутен тяло с големи къдрици, тя няма транслационно движение, Sp. microdentium различен от Treponema Pallidum характер на тяхното движение.
Може също да се получат с петна мастило на Burri (вж. Стр 51), където върху черен фон са ясно видими под формата на сиво-бели спирохети и техните къдри.
За приготвяне на изследваното лекарство цветни тънки намазки: поставяне на капка течност върху предметно стъкло, разпространение го върху повърхността на втория ръб на прозореца (както и получаване на намазка от кръвен капка). Инсулти се суши на въздух, фиксирани в метанол и се оцветяват за 12-15 часа Романовски (страница 52.): Treponema Pallidum се боядисани в розов цвят, което позволява да се разграничи от други сапрофитни спирохети, боядисан в син цвят (виж фиг .. 105).

Фиг. 105. Treponema Pallidum при изпълнение на първичния сифилис. Оцветяване Романовски.

Поради факта, че антигените могат да имат различни свойства антикомплементни преди насочване Wasserman допълнение титрува не само в чист вид, но също и в присъствието на антигени. Тъй Wasserman постави с 3 антигени, е необходимо да се титрува комплемента с всеки антиген отделно.
Модификация реакции Vassermana- реакция Григориев-Rapoport (таблица. 25). Тази реакция се основава на комплементарна активност на тест серум. Реакцията се използва (не по-късно от 36 часа след бране) активност (ненагрят) серум на пациента. За провеждане на реакцията необходимите антигени и дефибринирана серум хемолитична неизмити, филтрува се през два слоя марля овча кръв.

Реакционна схема Григориев - Rapoport

При липса на хемолиза в контролен серум отговор произведени многократно, и 0,2 мл серум с 0.2 мл dabavlyaet известни активни отрицателен серум, и следователно количеството на физиологичен разтвор, добавен е съответно намалява.
Резултатите от теста са взети предвид веднага след завършване на реакцията на базата на показанията на първите две епруветки, съдържащи антиген. Положителният резултат се характеризира с общо забавяне хемолиза отрицателен - пълна хемолиза. серума за управление (трета тръба без антиген) трябва да бъде пълен хемолиза.

Освен това тези реакции, за serodiagnosis на сифилис широко използван реакция утаечни, същността на което се състои в реакция на инактивиран серум на пациента с антигена, при което се получава утайка в тръбата. От тези реакции и Кана-Sachs Витебск имат най-голямо приложение.
Реакция канал. За определяне на реакцията Kahn следните съставки са необходими: 1) инактивиран човешки серум кръв на пациента, 2) специален антиген Kahn и 3) физиологичен разтвор.
Kahn антиген е екстракт липиди от мускулите на сърцето на овче, към който се добавя холестерол. Преди експеримента, в зависимост от титър, белязан антиген, разреден както следва. В чиста, суха флакон излива антиген, а другият - с физиологичен разтвор в количество, посочено на етикета (1 1,1 1,2). След това с физиологичен разтвор от втората тръба бързо се излива в първата съдържащ антигена (а не обратното). Получената смес се разбърква чрез изливане на тръбата в тръбата 6-8 пъти, и се оставя да престои в продължение на 10 минути при стайна температура в продължение на съзряване.
опит на скеле. Състоянието определя шест тест за аглутинация тръби. Първите три епруветки (1-во, 2-ро и 3-ти) имат опит, следващата три (4-ти, 5-ти и 6-ти) -kontrolnymi (контролен антиген). Единична антиген след узряване допринесе микропипета 3 експериментални и три контролни тръби. Микропипета антиген трябва да се понижава до дъното на сух тръба, без да докосва си stenok- измерване точност постига чрез този антиген. В първия епруветката се излива 0.5 мл, 2-ри и 3-ти - 0.025 - 0.0125 мл antigena- същото количество антиген се разпределят съответно в три контролни тръби. По време на всички епруветки съставени от 0,15 мл серум в kontrolnye- същото количество физиологичен разтвор. Триножник тръби за 3 минути енергично се разклаща, за да разбъркване настъпили серум с антигена, и се поставят в термостат при 37 ° в продължение на 10 минути. След изваждане от пещта, се добавя към първия опит и първата контрол тръба, 1 мл физиологичен разтвор, вторият и третият пилот, за контрол на флакона 0,5 мл физиологичен разтвор. Епруветките се отново разклащат и отчитат резултатите от реакциите (реакционна схема Kahn е показано в таблица. 26).
Забележка. С произволен брой изследвани контролен серум антиген постави един. В положителни случаи, реакцията се поставя контролен серум. За тази цел, тя се излива в епруветка в количество от 0,1 мл, се прибавя 0,3 мл физиологичен разтвор и се разклаща в продължение на три минути.
Отчитане на производство невъоръжено око реакцията или с лупа seroscopy.
Таблица 26
Реакционна схема Kana

Когато се вземат предвид реакцията с невъоръжено око, като всяка тръба се отстранява от статива и леко свити, държейки малко над нивото на очите в предната част на светлинния източник. Флокулация (утайка) в епруветки с посочване на серум положителна реакция е обозначен с Kahn и предимства. Много положителна реакция се обозначава с четири плюса (+ + +) - се характеризира със загуба на ясни люспи видими във всички епруветки и леко опалесцираща течност. Положителната реакция е показана с три плюса (+ + +) и се характеризира с най-малко една отделна флокулация във всички епруветки. За слабо положителна реакция е обозначен с два плюса (+), характеризираща се с по-слабо образуване на утайка и присъствието на фини частици в мътна течност. Образуването на много малки частици, суспендирани в мътна течност означават плюс (+). Липса на утайка и без суспендирани частици в течност е мярка отрицателния-отрицателна реакция и е означен минус (-). Епруветките трябва да се спазват люспи.
TSITOHOLEVAYA утаечни РЕАКЦИЯ (таблица. 27) Sachs-Vitebsk. За тази реакция трябва да инактивира тест серум и антиген tsitoholevy Sachs-Vitebsk, която се екстрахира липиди от мускулите на сърцето говеда, към който се добавя холестерол.
Таблица 27
Схема tsitoholevoy реакция Sachs - Vitebsk

Разклаща се енергично в продължение на 1 минута и се оставя при стайна температура в продължение на 30 минути
Физиологичен I 0.5 I 0.5 I 0.5
При загуба на холестерола кристали в антигена трябва да се загрява на водна баня при температура от 55-56 ° или в пещ. Разположен на флакона със титър. Антигенът се разрежда с физиологичен разтвор съгласно настоящото титър, 1 мл антиген се пипетират бързо прибавя към 2 мл физиологичен разтвор, разбърква се добре и съща пипета и се оставя в продължение на 10 минути при стайна температура в продължение на съзряване.
Експериментите бяха проведени в три тестови аглутинация тръби. Първата тръба 0.1 мл отмерена syrorotki изследва и се прибавя 0,05 мл от разредения антиген на втория изсипва 0.05 мл от разредения антиген и 0,1 мл физиологичен разтвор и трета probirku- 0.1 мл серум и 0.05 мл етилов алкохол. Всички епруветки се завихрят в продължение на една минута и се оставя да престои в продължение на 30 минути при стайна температура. Към всяка от тях се прибавя 0,5 мл
физиологичен разтвор, разклаща се отново и се вземат под внимание резултатите. контролен антиген поставя в епруветка за целия опит. Счетоводен-Sachs Vitebsk реакции произвеждат по същия начин, както реакцията Kahn.
Реакцията на обездвижване бледо treponemes. Както и в момента се използва за диагностика на сифилис реакция обездвижи treponemes, същността на която! Това е способността на кръвта на серум сифилис пациент да се спре движението на спирохети. Антиген за тази реакция са живи Treponema получен от инфектирана тъкан заек тестисите. Антигенът се счита за подходящ, ако микроскопия показват голям брой мобилни treponemes. Три седмици преди реакцията на настройка на пациента не трябва да получават антибиотици или други лекарства antisyphyllitic. Тази реакция е по-специфично и чувствително от реакционната Wasserman и седиментни на.

Химиотерапия. За лечение на сифилис използва успешно живак лекарства, бисмут, арсен (salvarsan, novarsenol, miarsenol) и пеницилин.