Brucella - микробиология с техниката на микробиологични изследвания

Фиг. 94. Brucella в чиста култура.
Оцветяване на Brucella Kozlovsky. Фиксираните проби се оцветяват с 2% воден затопляне до safroninom (до мехурчета), охлажда се, промива се с вода и dokrashivaetsya 0.75-1% воден разтвор на зелен малахит над 17а-2 minutes- Brucella запази safronina червено и останалите бактерии и клетъчни елементи боядисани в зелено.
Културни и биохимични свойства. Brucella растат добре на обикновените хранителни среди при аеробни условия. Въпреки това, аборт патоген korov- »Br. ABq ^ ТУ говежди изразена микроаерофилни свойства: Първото поколение на този микроб размножават само в атмосфера, съдържаща 5-10% въглероден двуокис, и само следващите субкултури дават добър растеж при нормални условия.
На агарови плаки растат по-малки като роса, кръгли изпъкнали колонии, постепенно увеличаване до 2-3 мм в диаметър. Тези колонии обикновено имат гладка структура (S-форма) са неясни, с белезникав перлен. Процесът на дисоциация изглежда грубо форма (R-форма), които се различават от S-формират редица функции (таблица. 22). Наклонена растат малки изолирани колонии, които по-късно се сливат, за да образуват сиво-бяло, полупрозрачен покритие. Култивиране на агар с 5% глицерол или чернодробно растежна среда подобрява Brucella.

Brucella

В Brucella бульон осигури цялостна мътност с последващо образуване на слуз утайка на дъното не втечнява желатин, мляко не пресече, не разлага въглехидрати. Ферментирало протеини за образуване на амоняк и сероводород, намаляване на нитрати в нитрити.
Антигенни структура. Brucella имат две общи соматични антигени А и М, така че да се направи отделна линия между тях с помощта на аглутинация реакция провали. В зависимост от вида на Brucella двата антигена, разположени в клетки в различни съотношения. Така че, Br. melitensis антиген М преобладава, докато Br. абортус говежди и Вг. абортус suis- антиген А. Наскоро Brucella антиген намерено VI-.
Resistance. Когато са изложени на температура от 60 ° Brucella умират в рамките на час. 1% разтвор на карболовата киселина ги убива продължение на 15 минути. Изсушеният урината, те може да продължи до 22 дни.
Патогенност при животни и образуване токсин. Чрез бруцелата податливи морски свинчета, бели мишки, плъхове и зайци. В естествени условия, бруцелоза намерени в кози, овце, свине и крави.

Екзотоксин Brucella не се образува. Токсични микробни клетки се отнася до ендотоксини.
Патогенеза и клиника. Източникът на инфекция с бруцелоза е голям и особено малки преживни животни (овце и кози) и свине. Human инфекция се проявява чрез директен контакт с инфекциозен материал (често, когато се грижат за животните), или в резултат на консумация на мляко, млечни продукти и месо от заразени животни, ако тези продукти не са били подложени на термична готвене.
Има много случаи на заразяване чрез прясно козе сирене - сирене.
Atrium е стомашно-чревния тракт, кожата и лигавиците. На мястото на портална врата Brucella на не причиняват възпаление и проникне в регионалните лимфни възли, които са невероятно. В тези възли Brucella пролиферират енергично, след което в резултат на "пробив" регионален лимфен бариера по хематогенен разпространение в тялото, което води до първична обобщение инфекция. Brucella кръв ток се записват във вътрешната opgany (далак, лимфни възли, костен мозък, и т.н.), където метастатичен огнища оформен. В миналото изостряне на процеса отново се появява умножение на Brucella, които, след като в кръвта са отговорни за рецидиви генерализирани инфекции. Инкубационният период продължава от 7 до 21 дни. Заболяването се развива постепенно. Типичен проява на инфекция е вълнообразна треска: крива температура е с вълнообразен (вълнообразен) характер. Бруцелозата се появява като хронично повтарящи се инфекции с много разнообразна клинична картина (увреждане на нервите, ставите, костите, белите дробове, очите, черния дроб, далака и други органи). Бременните жени могат да се появят аборт. Има нетипични, леки форми на бруцелоза, които дават само леко повишаване на температурата.
Заболяването може да продължи от няколко месеца до няколко години и завършва с самолечение - възстановяване (PF Zdrodovsky).
От тялото на пациенти с Brucella отделят с урината, и жени, които кърмят и с мляко.

Имунитет. Отложено болест оставя Папата се относителен имунитет. В кръвта на пациенти открива аглутини, pretsipitiny и komplechent свързващи антитела. Още в началото на заболяването, в остър стадий започва имунологични промени в тялото, което води до остра процес става хронична, а след това латентно състояние и накрая самолечение се случи.
В immunogenesis с бруцелоза, играе роля не само хуморални фактори, но, както се вижда от експерименти PA Vershilovoy животните, увеличават защитната функция на лимфните възли. Също така беше установено, че когато настъпи повишаване бруцелоза фагоцитоза, която се открива чрез спиране опсоно-фагоцитната реакция.
Бруцелоза в човешки и животински организъм се придружава от алергичен прегрупирането, което се изразява в увеличаване на чувствителността на инфектирания организъм към Brucella и техните токсини Съответно, за диагностициране на бруцелоза прилага тест алергия Burne.
Микробиологична диагноза. Бруцелозата е на особено опасни инфекции, поради което бактериологично диагноза може да се извършва само в специализирани институции.
Материалът за лабораторно изследване може да се кръв, точковидна гръдната мозък, урина, мляко (откриване патоген) и серум на пациента (за откриване на антитела).
метод кръвна култура позволява да се идентифицират Brucella от първите дни на заболяването. Кръв от вената се инокулира в 10 мл колби две с 100-200 мл месо-пептон бульон или черен дроб. Най-добри резултати се получават при добавяне на хранителна среда с 1% глюкоза и 2% глицерол.

Br за растеж. абортус говежди трябва да се създаде повишена концентрация на въглероден диоксид. Последното се постига чрез елементарно. Памук колба щепсел затваряне запали и избута в гърлото на дълбочината, която след това плътно затворен отгоре с гумена запушалка.
Инокулираните колби (един с обикновен бульон, а другата с висока концентрация на въглероден диоксид) се поставят в термостат при 37 °, след 7-8 дни или повече, по-късно идва растеж Brucella, често под формата на малки колонии tyazhah вградени в фибрин. Бульон докато леко мътен или е прозрачна. В присъствието на бульон растеж произведени посев за чаша с чернодробна агар агар и хранителен агар Г. Сухо инокулация Brucella D се увеличава и се състои от хранителен бульон, дрожди автолизат и натриев хлорид. От Brucella в първото поколение има бавен растеж, култури трябва да се инкубират в продължение на най-малко един месец на всеки 5-7 дни и да направят една чаша засяване с черния дроб агар. От колонии otvivayut чисти култури, чието идентифициране е завършена аглутинация с Brucella серум. Когато се вземе предвид диференциация на Brucella видове поведение
Таблица 23

Символи: + за растеж или развитие serovodoroda- - без освобождаване на растежа или отсъствието на емисиите на сероводород.
култура първо поколение на въглероден диоксид, тяхната способност да произвеждат сероводород и растеж чернодробно агар върху твърди носители, към които се добавят някои анилинови бои в определени концентрации (Таблица 23)..
За да се изолира mielokultury костен мозък точковидна взето спринцовка на гръдната кост, както и изследва кръвта на кръвни култури. Mielokultura освободен в 1 / 2-2 пъти по-често от кръвна култура. За urinokultury вземат урината катетър се асептично се центрофугира. Утайката се посяват върху плочи с агар, към която се прибавя тинтява виолетово в разреждане 1: 200 000 за инхибиране на растежа на грам-положителни флора.
Brucella ваксинация възможно най-голяма, за да се получи култури с анализирания материал с жълтъка от пресни яйца или жълтъчната торбичка на пилешки ембриони. Кръвта се разрежда 1: 3 и цитрат бульон в количество 0,1-0,2 мл се прилага в няколко яйца. (Техника яйца заразени описано в глава "вируси" стр. 385.) тествани Заразената яйце поставя в термостат за 5 дни при 37 °, последвано от 0.3 или 0.5 мл от съдържанието на яйца инокулират на твърди и течни хранителни среди, култури всеки 2-3 дни.
Голям диагностично значение е серологично диагностициране - аглутинация Райт.
Реакция Райт. Тази реакция е специфична. Тя се проявява в първите дни на болестта, и могат да се съхраняват за дълго време от изчезването на симптомите на бруцелоза.
Райт реакция беше поставен под Widal реакцията на процедура бруцелоза. Като антиген за използване Реакционната суспензия се убити Brucella, съдържащ 1 млрд. Бактериални органи в 1 мл от този диагностичен комплект, съдържащ 10 млрд. Микробните органи, разреден 1:10 преди употреба. Реакцията е винаги слагам Райт с две контроли.

1. Контрол серум поза с всеки тестов серум.
2. контролен антиген поставя в епруветка за произволен брой серуми тествани.

Епруветките се поставят на 4 часа в термостат при 37 °, при което първият вторичен uchet- отчитане се извършва след 18-20 часа престояване при стайна температура. Положителната реакция при титър 1: 50 се счита за съмнително, при титър 1: 100 - слабо положителен при титър от 1200 и 1400 - положителните и титъра на 1800 и по-горе - силно положителна.
Реакция Heddlson добре Kaytmazovoy. Бърз метод serodiagnosis предложен през 1926 г. Heddlson. Модификация Heddlsona не е имал широко използване толкова дълго, колкото EI Kaytmazova не се подобри и рационализира. За производството на реакцията Heddlsona Kaytmazovoy са необходими следните съставки: 1) серум на пациента, 2) физиологичен разтвор, 3) diagnosticum (цвят). Същността на този прост и силно чувствителна реакция аглутинация е следния (таблица. 24).
Таблица 24 Схема Heddlsona реакция - Kaytmazovoy

Обикновена стъкло (размер 20X15 cm) rascherchivayut в шест квадрати. През първите пет квадратчета микропипета серум на пациента се прилага в количество от 0,08- 0.04- 0.02- 0.01- 0.02 мл, шестият - 0,03 мл diagnosticum. През първите четири квадратите се прибавя 0.03 мл от diagnosticum, на петия и шестия - 0,03 мл физиологичен разтвор. Всички капки внимателно се разбърква със стъклена пръчка в посока от по-голям в по-малка разреждане и след това стъклото се нагрява леко над пламъка на горелката за 3 минути. В случай на положителни реакции се появяват различни люспи (аглутинация). Продължителността на наблюдение от 5 до 8 минути. За диагностициране на бруцелоза да се отнася и за свързване на комплемента, дай opsodo-фагоцитарната проба.
тест Алергия Бърн. За целите на диагностиката, вариращи 8-10-ти ден на болестта, които се използват на интрадермален тест алергия от Бърн. Използването като антиген бруцелин (или Мелитина) - стерилен филтрат 3-4 седмични култури от Brucella бульон. Като положителна реакция на следващия ден при бруцелин на мястото на инжектиране (0.1 мл прилагат подкожно в централната част на флексорния повърхността на ръка) се появява болезнена еритема и оток на 4-6 cm по размер (Фиг. 95 вложка).

Фиг. 95. Burne тестове за алергия (положителен).