Подготовка ястия, готвене физиологичен разтвор - микробиология с техниката на микробиологични изследвания

Получаване на ястията, ГОТВЕНЕ смачка конгестия и физиологични разтвори
Посуда. Стъклария (матраци, флакони, тръби и други подобни. D.) са широко използвани в микробиология лаборатория за микробно култивиране на хранителна среда, както и за други цели. Преди употреба, съдовете трябва да бъдат добре подготвени. За тази цел се използват стерилизирани ястия, промива се с топла вода с помощта на грива или четка, след което 2- промива 3 пъти с дестилирана вода и се суши.
Ако податлив на конвенционален измиване съдове с трудност, то се третира в продължение на 30 минути със смес от хром (в 1 литър вода 50 г калиев дихромат, 100 г техническо качество сярна киселина) и след това се промива добре с вода.
Съдове с следи агар, желатин и други среди могат да се накисват за една нощ преди промиване в разтвор луга. За да използвате цвета боя да се отмени 3% разтвор на белина.
Ястията се прилагат по отношение на хранителните среди, не могат да бъдат обработени дезинфектанти. скорошно добавка прави плодородна почва неподходящи.
Сушенето трябва ястия в сушилня или сушилня в стаята температури до 50 ° и добра вентилация.
Тапи за уши. Сухи тръби, флакони, ампули, флакони, затворени с тапи памук, които се получават както следва. Поставете на масата продълговата правоъгълна плоча съответната стойност на вълната са сгънати навътре всичките четири ръба (фиг. 25), така че да се получи лента с ширина, равна на дължината на тръбата, и навитата тръби перли с диаметър или колби. Памук щепсел може да бъде обвит с парче марля в един слой. Краищата на марля вратовръзка от външната страна на тапа резба. В момента на разположение в специални машини, машини за производство на памучни запушалки.
Saline. За един литър дестилирана вода вземе 8,5 грама сол се разтварят под обратен хладник, охлажда се, филтрира се през филтърна хартия и се стерилизира в автоклав при 120 ° в продължение на 20 минути.
Използването на пипети. Микробиологичната лаборатория разполага се използва широко пипети. Пастьор пипети са и класифицирани. Първо имаме разделение и изчисление течност при работа с тях се намират на втория kapli- се раздели, и количеството на течностите, изтичащи от тях се определя в милилитри, десети от милиметъра и т.н. Единият край на пипета, други - .. Тесен. За да се регулира отпадъчните води края на пипета, затворете показалеца и да разкрие достатъчно само да се бавно изтичане настъпило. Прехвърля се с пипета памучен тампон до края, което е взето в устата. Бал на вълна не трябва да бъде прекалено стегнат, но не трябва да се движи свободно в пипетата. Вълнени влакна не стърчат от ръба на пипетата, тъй като те не се оставя да се плътно затягане последната пръст. Съдебните заседатели парчета вълна може да се изгарят в пламъка на горелката. С пипета в една или няколко части, увити в хартия и стерилизирани. Когато се работи с инфекциозен материал в горния (широк) край на пипетата допълнително често носят гумена тръба или луковица, чрез който и да произвеждат nasasyvanie.

Фиг. 25. памучни запушалки на регресия.

Стерилизация и нейните видове

Пълното освобождаване на обект материал от средата на растеж без изключение микроби, наречени стерилизация (стерилизация на). Концепцията за "стерилизация"-широка концепция за "дезинфекция", тъй като той има предвид, само за унищожаване на патогенни микроби. Следните видове стерилизация: 1) високо стерилизация temperaturoy- 2) механично стерилизация.

1. Стерилизация висока температура се извършва по различни начини:

а) пламък калциниране горелка - най-бързият и най-сигурният начин да се стерилизира, но той има ограничено приложение, тъй като повечето индивиди чрез калциниране влошава. Калциниране стерилизирани платина линия, игли и малка метална шпатула и стъклени предмети като пинцети, слайдове, пипети, и така нататък. Etc.-
б) кипене - най-простият метод на стерилизация. Чрез кипене в продължение на 30 минути стерилизирани спринцовки, хирургически инструменти, и така нататък. Н. добавяне на вода до 1% сода предпазва инструментите срещу ръжда и в същото време се подобрява надеждността на стерилизация. Въпреки това, този метод не е напълно надежден, защото спорите на някои бактерии могат да продължат продължително kipyachenii-
в) стерилизиране на пара течност се произвежда в tekucheparovom Koch машина. Това устройство (фиг. 26) е ламарина цилиндър с двойна стена, конична горния капак покрити. За да се намали пренос на топлина устройство е обвити външно филц или азбест. Капакът има отвор, където се добавя термометъра. Това устройство съдържа калай свободно подвижен кофа (за стерилизация материал), стените и дъното на които са снабдени с отвори.
От вътрешната страна на цилиндъра на различни височини има издатини, които са разположени следните надупчена ламарина. В долната част на водата се излива в устройството, поставени в обекти на устройството да се стерилизират, и се нагрява до горната част на отвора не ще силни реактивни параметри, докато температурата във вътрешността на устройството става равен на 100 °. Нагряването продължава при 100 ° в продължение на 30 до 60 минути. За по-голяма надеждност, както и за стерилизация на някои материали, които променят свойствата си след продължително действие на висока температура (желатин, захар и други), като нагряване обикновено произвеждат три последователни дни 30-60 минути (фракционна стерилизация). Когато първите топлина вегетативни форми на бактерии са убити, но спори могат да оцелеят. До следващия ден спорите покълват и да станат вегетативни форми, особено ако пациентът е стерилизира в продължение на дни при температура не по-ниска от 20-22 °. Следван от отопление убит нововъзникналите вегетативни форми. Тъй като е възможно някои от покълнат на спори не е във времето, материалът се поддържа в продължение на още 24 часа при стайна температура и след това се подлага на трето стерилизация.

Фиг. Koch 26. Устройство за стерилизация течност пара.

Фиг. 27. Вертикалната автоклава.

Така че, обикновено стерилизация апарат Koch 3 дни подред 30-60 minutes-
ж) парна стерилизация се извършва под налягане в автоклава (фиг. 27 и 28), който е изграден на принципа papinova котела. Автоклавът за първи път е приложена на практика от нашия сънародник Geidenreich през 1884 г. Тя се състои от масивна цилиндрична меден котел, снабден с обвивка от ламарина. Котелът е затворен херметически метален капак завинтва здраво с винтове. На капака, а понякога и в стената на автоклава (в зависимост от строителство) има няколко дупки: манометър, предпазен клапан и изпускателни клапани за пара.
Вътре меден котел бъде поставена в друг пот, така че има свободно място остава между тях. Между водата в котела се излива през фуния, поставена в измервателен вода тръба. Вода m тръба е подсилен в черупката. Нивото на водата в автоклава е водно-измервателна тръба и е настроен на същата височина, според закона на скачените съдове. В горния край на пространството между стените на котела през серия от отвори комуникира с вътрешността на котела. Парата се издига между стените на котела през горния отвор, се простира в пространството за стерилизация и през стерилизиран материал след това се изпуска през изпускателния клапан.

Фиг. 28. Автоклавът е хоризонтална.
Стерилизация в автоклав се извършва по следния начин. Автоклавът се излива във вода. Артикули да бъдат стерилизирани (Bix, културна среда, и така нататък. D.), монтиран в каната, капакът се завинтва, отказ да се отвори изпускателният клапан и водата се нагрява. Когато водата се загрява, тя започва да се излезе от кран парата заедно с въздух. Необходимо е, че въздухът е бил изместен от пара, защото в противен случай манометъра няма да съответства на температурата. Когато температурата в котела достигне 100 °, крана започва да бие парна струя. Когато парата ще измести всички въздуха от автоклава, тя преминава през пробка за пара пълно съскащ поток не съдържа влага (суха пара). Тогава чешмата е затворен. Парата не излиза навън, и навлиза в затворено пространство и натрупване в нарастващи цифри, увеличава налягането, докато в същото време и температура, както е показано чрез манометъра и термометър. При налягане от 2 атмосфери. (Включително нормално налягане) температурата е равно на 120 °, при налягане от 3 atm.-134 °. Когато налягането достигне съответните четения (обикновено от 2 атм.) За да се регулира началото на отоплителния чрез задържане на налягането на това ниво в продължение на 20-30 минути, след което се спира отоплението и чакат, когато манометъра да падне до нула. Внимателно се произвежда пара, капакът се отваря и материалът се отстранява.

Фиг. 30. Устройство за стерилизация с горещ въздух.

Фиг. 29. Фурна Пастьор.
Ако не трябва да се отваря стерилизирани течност клапан преди манометъра достигне нула. В противен случай, поради бързото падане на налягането на флуида да ври, "хвърлят" памук самата тапа ще се изсипе на съдовете. За контролиране действието на автоклава са различни вещества, които имат определена точка на топене, например benzonaftolom - температура на топене 110 °, -113 ° антипирин, резорцинол и сяра - 119 ° -120 ° и бензоена киселина. Когато се изпитва в стъклена тръба с дължина 6 cm 5-, затворена в единия край, се излива от един от посочените по-горе вещества се добавят малко багрило сух анилин (fuchsine, сафра-нин, brilliantgryun и др.) И епруветката се запечатва. Тръба с прах се поставя в автоклав стерилизира между обектите. Ако температурата е достатъчно висока, материалът се топи и ярко боядисани в цвят, който съвпада взето kraske-
г) Стерилизация със суха топлина, произведено в пещта Pasteur (фиг. 29), което е шкаф калай с двойни стени, извън кормилното азбест с електрическо нагревателно устройство. Нагретият въздух циркулира в пространството между двойните стени и чрез един или чрез редица специални отвори. Горещият въздух затопля обектите, които са в гардероба. Стерилизация със суха топлина трябва да продължи 1 час при 160 ° или 3/4 час при 165-170 °. Температурен контрол се извършва на термометъра. Като се започне стерилизация се измерва от момента, когато термометър 160-165 °.

В момента, произведени електрически машини, различни форми и снабдена с добра топлоизолация, необходимата температура се поддържа автоматично посредством термостата, чиято работа се контролира от контролната крушка (фиг. 30).
Стерилизация на Пастьор фурна изложен на всички изделия от стъкло, пипетка, хартия и вълна в малки опаковки. Да бъдат стерилизирани сухи тръбички и колби затворени с тапи памук, така че след стерилизация на бактериите от въздуха стават вътре. Чаши Geidenreich една или повече, увити в bumagu- така правя накапване с пипета и voronkami-
д) фракционна използва за стерилизация на вещества варира под въздействието на температура от 100 °. Тези предмети се подлагат на загряване в продължение на 5 последователни дни на 1 час при температура от 56-58 °. Фракционна произведени или във водна баня или в специален priborah-
ж) пастьоризация - стерилизация при 60-70 °, въведен с Пастьор bessporovyh за убиване на микроби в такива течности, които променят и развалят при по-високи температури (вино, бира, мляко). Широко използвани пастьоризация на млякото, тъй като стерилизация при температура не по-висока от 65 ° запазва своя аромат и хранителни свойства.
Апарат за съсирването на серум. Апаратът е метална кутия с двойни стени, между които е запълнено с вода (фиг. 31). Долната част на устройството наклонени към тръбите може да се постави в наклонено положение. Извън това са обвити азбест и затворен от две капачки, стъкло, за да може да се наблюдава среда процес кръвосъсирването, и горната - метал. В горната част на кутията има отвор, през който се излива вода. Водата в апарата се загрява до температура 80- 90 ° газова горелка или електрически уред. При тази температура на загряване, произведен от последователни 1 час 3 дни.

Фиг. 32. Seitz филтър.

Фиг. 31. Устройство за съсирването на серум.
Този апарат използва за коагулация серум, както и за получаване на редица яйце културална среда, където едновременно с втвърдяване на средата е неговата стерилизация.

1. Механично стерилизация. Механично стерилизация се постига с помощта на бактериални филтри, получени от фино порест материал. Микробите не могат да проникнат през тези пори. Съществува голямо разнообразие от бактериални филтри. Най-често се използва Seitz филтър (фиг. 32) и мембранни филтри.

Зайц филтри се състои от плоча азбестови точки с различни размери се поставят в специални притежателите метали.
За филтриране на всеки филтър трябва да бъдат специално инсталирана - носи си към приемника, който ще се филтрата. Приемници могат да служат като стъклени бутилки с страна контейнер и се разпространяват като дъното на фунията. Чрез помпена тръба въздух получаване на водна струя или друга помпа. Тъй като приемникът използва също плоскодънни конични съдове с странично удължение монтиране в горната част, през която се вкарва въздух.
За да монтирате плоча Зайц филтри са притежателите на метални. Те се произвеждат от никелирана метал и се състои от две части, горна цилиндрична без дъно и на дъното, на дъното се завинтва апарати и специални винтове. Той се намира в средата на дъното стесняваща се тясна тръба, която служи за изтичане на филтрата. Между две части плътно притисната азбест плоча, насложен върху метална решетка, която служи като опора за нея. Цялото устройство се стерилизира в автоклав.
След стерилизация чрез контакт с места запушалка приемник и гледане тръба трябва да бъде плътно свързан и парафин.
Мембранните филтри са порест нитроцелулоза филм под формата на дискове 35 мм в диаметър, с дебелина 0,1 мм и наподобяват тънка бяла хартия. размер на порите разграничи големи пори и малки пори филтри. В зависимост от пропускливостта са следните филтри: № 1, 2, 3, 4 и 5. Най-плътен филтър - № 1, най-свобода - № 5.
Също така тези филтри се освобождава така наречените предварителен филтър, целта на което е да се почисти водата от grubovzveshennyh частици. Най-често в практиката № 3 филтър с диаметър на порите от 0.7 микрона (потребителски съоръжения мембранни филтри е описана на стр. 436 от "посев вода на мембранни филтри" раздел).