Диагностика на токсоплазмоза

За диагностика на токсоплазмоза T. Gondii необходимо да се избере от кръв или други биологични течности или тахизоити идентифицирани в секрети или образците тъкани и телесни течности, кисти - в плацентата или тъканите на плода или новороденото, както и хистологични промени характеристика на лимфните възли. Също така информативни серологични изследвания.

Културните и микроскопски методи за диагностика на токсоплазмоза

Биофлуид, левкоцити или биопсии въведени в клетъчната култура или инфектирани ги мишки. Биофлуид трябва да се обработват и веднага се прилага на животно, въпреки че T. Gondii се изолира от тъкани и кръв, които се съхраняват при 4 ° С за една нощ. Замразяване или опушване убийство Т. Gondii. Mouse перитонеална течност е тествана за тахизоити след 6-10 дни след заразяването, или по-рано, ако животното умира. Ако мишката е все още жив 6 седмици и кръв тя намери антитела бе разгледано в мозъка на мишките кисти. Ако се установи, кисти, тъканта на мишки, инжектирани други мишки.

На микроскопско изследване на клетъчни култури, който беше въведен Т. Gondii, намерени мъртви и живи клетки, както и много екстрацелуларни тахизоити. Изолиране на Toxoplasma от кръв или други течни горива доказателства за остра инфекция. Изолиране на Toxoplasma набраздения мускул, белодробна тъкан, мозъка, очите (получен при аутопсия или ин виво) на плода и новороденото не е възможно да се разграничат от остро заболяване прехвърля обикновено.

Диагнозата на остра инфекция може да се достави от присъствието на тахизоити в биопсия образци, аспиратите костен мозък или биологични течности, като CSF, или околоплодна течност. В конвенционалните препарати тахизоити обикновено са трудни за откриване, така че често се изисква имунофлуоресцентен или имунопероксидазен оцветяване. Лечебните кисти потвърждават диагнозата на токсоплазмоза, но не позволяват да се направи разграничение остра от хронична патология, но наличието на множество кисти доказателства за скорошен остра инфекция. Кисти в тъканите на плацентата или новороденото потвърждават диагнозата на наследствена токсоплазмоза. Характерните хистологична картина високо специфичен за toxoplasmic лимфаденит.

Серологично диагностични техники токсоплазмоза

За да се потвърди диагнозата на вродени или придобити остра токсоплазмоза може да изисква редица серологични техники. Във всяка лаборатория, която се занимава с серологичните тестове трябва да бъде потвърдена от резултатите от своите проучвания, които диагностицират инфекция в някои клинични състояния и да се осигури адекватен контрол на качеството, преди да започне лечението. Резултатите от серологичните тестове, които се използват като база за лечение, трябва да бъдат подкрепени от специализирана лаборатория.

Реакция Sabin-Feldma nachuvstvitelna spetsifichna- в него и благоприятно IgG антитела определени. Резултатите трябва да бъдат изразени в IU / мл, въз основа на международните стандартни препарати, предлагани от СЗО.

индиректен имунофлуоресцентен метод за откриване на IgG антитела са същите като реакцията Sebino-Feldman, заглавия в двете паралелни реакции. Тези антитела обикновено се появяват след 1-2 седмици. след инфекция, след 6-8 седмици. постигане на висок титър (>1: 1000), и след това се редуцира по време на месец. Ниски титри (1: 4-1: 64) обикновено се съхраняват живота. Антитяло титър съответства на тежестта на заболяването. Приблизително 50% от комплекти за откриване на антитела за T. Gondii от индиректна имунофлуоресценция правилно стандартизирана и може да осигури значителен брой фалшиво положителни и фалшиво отрицателни резултати.

Комплектът за аглутинация (Bio-Merieux, Lyon, Франция), продавани в Европа, за откриване на IgM антитела, използвани Цели паразити, консервирани с формалин. Този тест е точен, лесен за използване и евтин.

индиректен имунофлуоресцентен метод с IgM информативен за диагностициране на остра токсоплазмоза в по-големи деца, тъй като IgM антитела се появяват по-рано (често на 5-ти ден от началото на инфекцията) и изчезват бързо, отколкото на IgG антитела. Най титър на антитяло, определено по този метод, са бързо нараства (от 1:50 до 1: 1000), и няколко капки седмици (1:10 или 1:20) или реакция става отрицателни. Въпреки това, при някои пациенти, ниски титри продължават до няколко години. В наследствена токсоплазмоза индиректен имунофлуоресцентен метод открива IgM антитела по рождение, само около 25% от децата. IgM антитела са често отсъстват в серума по време на остра токсоплазмоза поради имунна недостатъчност, в допълнение, тези антитела не са налични в по-голямата част от пациентите с активна токсоплазмоза, удариха само очите му.

ELISA с метода на "двоен сандвич" - по-чувствителен и специфичен метод за откриване на IgM антитела от непряк имунофлуоресцентен метод. В по-големи деца, нивото на антитела срещу T. Gondii 2 или повече (мярка за една от специализираните laboratoriy- всяка лаборатория трябва да установи собствена справка) е вероятно да се покаже едно неотдавнашно инфекция. ELISAna IgM засича приблизително 75% от бебетата с вродена токсоплазмоза. ELISA, за разлика имунофлуоресцентен метод не дава фалшиво положителни резултати при пациенти с ревматоиден фактор, както и фалшиво-отрицателни резултати с високи титри на майчини IgG антитела в серума. Резултатите, получени с помощта на налични в търговската мрежа китове, трябва да се интерпретират с повишено внимание поради високото ниво на фалшиво-отрицателни резултати. Трябва също така да се гарантира, че активния набор се стандартизира за използване в определени клинични условия (например при новородени). В наследствена токсоплазмоза в плода и новороденото, както и остра токсоплазмоза в бременна ELISA за IgA е по-чувствителен от ELISA за IgM.

При метода на аглутинация immunosorbentafiksatsiya IgM пациент към твърдата повърхност е комбинирано с използването на формалин фиксирана T. Gondii или антиген-покрити частици латекс. Резултатът се отчита като в реакцията на аглутинация. Имуносорбент аглутинация не дава неверни положителни резултати и антинуклеарни антитела. Антитела към T. Gondii на IgM се откриват чрез имунофлуоресценция по-бързо от ELISA. аглутинация имуносорбентен метод ELISA е по-високо в чувствителност и може да открива IgM антитяло IgM по-рано и по-дълго време от ELISA. В момента на метода на определяне на IgM имуносорбитен аглутинация - най-добрият начин за диагностициране на вродена токсоплазмоза. В наследствена токсоплазмоза, остър придобита токсоплазмоза също информационен дефиниция на IgE антитела чрез ELISA или метода на аглутинация имунопоглъщани.

Видео: Диагностика на токсоплазмоза котки

В метода на диференциални титри на аглутиниране на антитела срещу тахизоити формалин фиксирана (HS антиген), в сравнение с титрите на антителата срещу тахизоити, фиксирани с ацетон или метанол (АС антиген) - това позволява да се прави разлика между скорошен и отдавна инфекция при възрастни и по-големи деца. Този метод е особено подходящ за потвърждаване пресен миокарден токсоплазмоза при бременни жени, тъй като титрите на антителата на IgM и IgA, определени чрез ELISA и имуносорбентен аглутинация, метат остават повишени за дълго време (при възрастни и по-големи деца - до няколко години).

За да докаже, че острата инфекция започна не повече от 12-16 седмици. Преди използва тест за авидитет (висок афинитет показва гореспоменатия период).

Видео: Токсоплазмоза Лечение

В непреки хемаглутинационни антитела срещу T. Gondii на, характеризиращ се с имунофлуоресценция и се открива чрез взаимодействие Sabin-Feldman. Тези антитела могат да се задържат в продължение на години. Въпреки това, косвено хемаглутинационна реакция не трябва да се използва при кърмачета със съмнение за наследствена токсоплазмоза и скрининг жени за токсоплазмоза, придобити по време на бременност, тъй като ранните етапи на реакцията може дълго да останат отрицателни.

Относително висок титър антитела срещу T. Gondii във водната течност или CSF показва местната образуването на антитела по време на активни токсоплазмоза очите или на ЦНС.

Т. Gondii антиген се открива само по време на остър toksoplazmoza- в серума на здрави и хронично болни не е така. Антигенът присъства в серума, околоплодната течност и CSF малкия брой деца с наследствена токсоплазмоза.

Вродена инфекция може да се диагностицира с помощта на сравнителен Western имуноблотинг серуми на майката и детето. Ако майката и детето серум серум съдържа антитела, които реагират с различни антигени, на Т. Gondii, което предполага наследствена токсоплазмоза.

Immunofiltratsiony анализ, който използва мембрани с микропори могат едновременно да провери специфичността на антителата чрез имунопреципитация и антитяло изотипове характеризират с immunofiltration антитяло, белязано с ензим. Този метод може да се открие на 85% от случаите на наследствена токсоплазмоза в първите дни на живота. Проучване на този метод продължава.

PCR се използва за амплифициране на ДНК на T. Gondii, който след това се открива, използвайки ДНК сонди. Определяне на околоплодна течност повтарящ ген T. Gondii - В1 е най-добрият метод за диагностициране на наследствена токсоплазмоза в плода. Чувствителността и специфичността на този метод в анализа на околоплодна течност, получена при 18 седмица от бременността или по-късно, представлява около 95%. За диагностика на токсоплазмоза око под разнообразна PCR стъкловидното течност.

Реакцията на бластна трансформация на лимфоцити в отговор на антигени T. Gondii, използвани за диагностика на наследствена токсоплазмоза в случаи, когато други методи на изследване са отрицателни, но съмнението продължило токсоплазмоза. Но се получи отрицателен резултат не изключва токсоплазмоза, защото много заразените деца не реагират на антигени на Т. Gondii.

придобита токсоплазмоза

Видео: Пренатална диагностика, токсоплазмоза

Доказателство за скорошна инфекция са сероконверсия (вид на IgG антитела), прилагане на антитела, ако е възможно в perelivanii- последователно (две тръби) увеличаване на антитяло титър на T. Gondii IgG клас ако серум бяха взети в интервали от 3 седмици. и паралелно изследва наличието на антитела срещу T. Gondii клас IgM.

токсоплазмоза око

Пациенти с активен хориоретинит токсоплазмоза IgG антитела титър е обикновено от 1: 4 до 1:64. Правилната диагноза е вероятно, ако характеристика на ретината щети и резултатите от серологични тестове са положителни. За диагностика на токсоплазмоза прилага око PCR стъкловидното течност, обаче, този метод се използва рядко, тъй като на свързани с материал Добивът опасности.

Токсоплазмоза в нарушения на фона на имунитет

При тези пациенти, IgG антитяло титър може да бъде ниска, и IgM антитела често липсват. Диагностика на дисеминирана токсоплазмоза помага откриване T. Gondii антигени в серума, и CSF.

При пациенти със СПИН диагностично важно е да се разреши лезии в централната нервна система по време на лечение с пириметамин и бивш juvantibus sulfadiazonom. При липса на отговор на терапия ех juvantibus, и за предотвратяване на други заболявания прилагат мозъчна биопсия.

наследствена токсоплазмоза

За пренатална диагностика на плода ултразвук се прилага, което се повтаря на всеки 2 седмици., Както и PCR с околоплодна течност. Освен това, T. Gondii може да бъде изолиран от плацента.

В най-добрия наследствена токсоплазмоза серологични методи за диагностика. За диагностика трябва да поддържа или да се увеличи в титър Sabin-Feldman реакция, флуоресцентна антитяло техника или откриване IgM чрез ELISA или аглутинация имуносорбентен. IgM полуживот период е 3-5 дни, затова, ако в проникване на антителата през плацентата, нивото им в кръвния серум на детето значително намален в продължение на 1-2 седмици. Пасивно придобити IgG антитела изчезват след няколко месеца или една година, в зависимост от размера на оригиналното заглавие. Синтезът на антитела срещу T. Gondii обикновено става показателно за третия месец от живота, ако детето не получи лечение. В нелекувани деца синтез може да се забави до 9-месечна възраст, или от време на време, това не може да бъде. Когато детето започне синтеза на специфични антитела, токсоплазмоза може да бъде потвърдена серологично, дори и без откриване на IgM антитела. Диагностика на съотношение растеж титър на специфични антитела за общо IgG- ако това съотношение намалява, това означава, че специфичните антитела се родител.

Ако при раждането, е заподозрян наследствена токсоплазмоза, е необходимо да се извърши физическа obsledovanie- офталмологични и неврологични CT golovy- на изследванията е да се опита да изолира Т. Gondii на плацентата и бебешки левкоцити (с помощта на кръв от пъпната връв и leukoconcentrate) - за определяне на титъра на антитела към класове Т. Gondii IgG, IgM, IgA и IgE в серума krovi- определяне на общия размер на IgG и IgM в syvorotke- изпълнява лумбални пункции с определяне на броя на клетките в CSF, глюкоза, протеин, антитяло към класове T. Gondii IgG и IgM и общо IgG- issled Vat ген CSF за T. Gondii чрез PCR и извършване на биологична проба с ОСР в мишки. Наличието на антитела в ОСР до T. Gondii IgG клас (ако CSF не е замърсена с кръв) или местно производство на антитела в антитела ОСР до T. Gondii IgG клас потвърждаване на диагнозата на наследствена токсоплазмоза.

диференциална диагноза. Симптомите са подобни на симптомите на наследствена токсоплазмоза, са общи за много заболявания на перинатална период, особено вроден CMV инфекция. Нито вътречерепен калцификати, хориоретинит, или не са патогномонични. Серологични критерии за вродена токсоплазмоза са по-малко от 50% от децата с хориоретинит до 5 години- причините за повечето от останалите случаи са неизвестни. Клиничната картина на новороденото могат също да съответстват на сепсис, серозен менингит, сифилис или хемолитична болест.